三黃跌打膏外敷對大鼠急性軟組織損傷的療效

姜新根 孫 赫 趙金花

中醫學上，急性軟組織損傷屬于“急性筋傷”范疇，主要表現為腫脹、局部疼痛、皮膚青紫瘀斑等，嚴重降低了患者的生命質量[1-2]。對于此癥應盡早有效治療，以減輕病情，緩解傷痛，促進機體恢復，常規治療方案雖可在一定程度上緩解癥狀，改善病情，但療效不佳[3]。近年來，中醫治療該癥逐漸取得了明顯效果，但目前關于三黃跌打膏外敷對大鼠急性軟組織損傷的療效報道極少，且探討并不深入。鑒于此，本研究就三黃跌打膏外敷對大鼠急性軟組織損傷的療效進行分析。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

購買廣東斯嘉景達生物科技有限公司的SPF 級SD 大鼠64 只，其中16 只SD 大鼠作為正常對照組，雌雄各8 只，體重182～218 g，平均（200.00±11.95）g。其他大鼠均建成急性軟組織損傷模型，以抽簽法分為模型對照組（n=16）、三黃跌打膏組（n=16）、狗皮膏藥組（n=16）。模型對照組：雌雄各8 只，體重180～220 g，平均（200.00±12.00）g；三黃跌打膏組雌雄各8 只，體重181～220 g，平均（200.50±11.98）g；狗皮膏藥組雌雄各8 只，體重182～200 g，平均（200.55±12.01）g。4 組大鼠一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 動物模型制備建模前24 h使用8%硫化鈉脫去右后大腿鼠毛，10%水合氯醛按體重（0.1 ml/100 g）腹腔注射麻醉后固定于固定臺上，用200 g 砝碼通過與之直徑相同的塑料管自50 cm 高度自由落體落在大鼠右后大腿肌肉豐厚處，連續擊打2 次，造成擊打部位出現散在出血，打擊處腫脹，皮下有瘀斑但皮膚不破損。打擊后若有骨折、皮膚破裂者予以剔除。

1.2.2 三黃跌打膏藥物制備方法三黃跌打膏（大黃50 g、黃連50 g、黃柏50 g、制天南星50 g、赤小豆150 g、樟腦5 g），將大黃、黃連、黃柏、制天南星混合打粉，過100 目藥篩。赤小豆用5 倍量的飲用水浸泡30 min 后大火煮開，之后以小火煎煮，持續30 min，收集藥液、過濾。藥渣再用5 倍量飲用水煎煮，水沸后，以小火煎煮30 min，過濾藥液后，與第一次藥液合并，繼續煎煮藥液，至濃縮成含生藥1 g/ml 的濃縮液，之后將樟腦用100 ml 95%乙醇溶解后，與濃縮液混合，再將20 g 蜂蜜溶于混合液中，最終形成配制液，應用配制液將粉碎好的藥粉調成糊狀，制成貼膏，將其置于4 ℃冰箱中保存，備用。每日貼敷2 次，治療1 周[4]。

1.2.3 動物分組及干預將造模成功大鼠隨機分組，每組16 只，雌雄各半，包括模型對照組、三黃跌打膏組、狗皮膏藥組。造模成功后1 h 給予相應的藥物包扎，外用特制膠布及紗布固定，每天換藥1 次。在建模前用皮尺測量大鼠右后大腿的周長，在第3、7 天給藥2 h 后分別每組取出8 只大鼠，雌雄各半，用皮尺測量大鼠右后大腿的周長，然后10%水合氯醛腹腔注射麻醉后，腹主動脈取血，取部分全血檢測血液流變學指標，部分血液分離血清檢測炎癥介質水平。

1.3 觀察指標

1）大腿周長：于給藥前，第3、7 天給藥后2 h，應用皮尺對大鼠右后大腿的周長進行測量。2）血液流變學指標：于第3、7 天給藥后2 h，應用10%水合氯醛腹腔注射麻醉后，于各組大鼠腹主動脈取血，迅速注入肝素抗凝管內，采用血液流變檢測儀（濟南東方美洋商貿有限責任公司，型號MEN-C80）對大鼠全血黏度、血漿黏度、血細胞比容、血小板黏附率進行測量。3）炎癥介質：第3、7 天給藥后2 h，腹腔主動脈取血，置于離心管中，室溫放置2 h 后，以3 000 r/min 轉速離心5 min，分離血清。嚴格按照酶聯免疫吸附劑測定試劑盒操作說明，以酶聯免疫吸附試驗法檢測白細胞介素-1β（IL-1β）、白細胞介素-6（IL-6）、前列腺素E2（PGE2）水平。

1.4 統計學分析

采用SPSS 22.0 統計軟件進行數據分析，計量資料以±s表示，組間比較采用F檢驗，兩兩比較采用q檢驗，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 大腿周長

各組給藥前大腿周長比較差異無統計學意義（P＞0.05）；給藥第3、7 天，與正常對照組比較，模型對照組大腿周長最長，三黃跌打膏組大腿周長最短，各組大腿周長比較差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 4 組大鼠大腿周長比較(cm,±s)

表1 4 組大鼠大腿周長比較(cm,±s)

組別 只數 給藥前 第3 天 第7 天 正常對照組 16 5.50±0.50 5.51±0.52 5.50±0.51模型對照組 16 6.09±0.43 6.08±0.35 6.80±0.54三黃跌打膏組 16 6.12±0.44 5.71±0.28 5.75±0.56狗皮膏藥組 16 6.08±0.46 6.01±0.34 5.89±0.48 F 值 0.039 5.859 18.540 P 值 0.962 0.005 0.000

2.2 血液流變學指標

給藥第3 天，4 組低切全血黏度、血細胞比容差異無統計學意義（P＞0.05），4 組高切全血黏度、血漿黏度、血小板黏附率比較，差異有統計學意義（P＜0.05）；給藥第7 天，4 組高切全血黏度、低切全血黏度、血細胞比容、血漿黏度比較，差異有統計學意義（P＜0.05）；與其他各組比較，三黃跌打膏組大鼠第3 天與第7 天的血液流變學指標變化幅度更明顯，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 4 組大鼠血液流變學指標比較(±s)

表2 4 組大鼠血液流變學指標比較(±s)

組別 只 數 第3 天 第7 天 第3 天 第7 天 第3 天 第7 天 第3 天 第7 天 第3 天 第7 天 高切全血黏度(mpa·s) 低切全血黏度(mpa·s) 血細胞比容(%) 血漿黏度(mpa·s) 血小板黏附率(%) 正常對照組 16 4.91±0.45 4.92±0.46 30.95±3.02 30.80±2.31 0.41±0.01 0.42±0.02 1.27±0.15 1.27±0.16 50.24±14.36 50.30±14.40模型對照組 16 5.45±0.46 4.96±0.34 38.39±2.96 38.87±2.30 0.50±0.02 0.52±0.01 1.20±0.05 1.20±0.06 44.33±12.64 43.22±14.35三黃跌打膏組 16 5.22±0.31 4.50±0.50* 36.50±4.22 30.42±5.48 0.49±0.04 0.38±0.01 1.22±0.05 1.27±0.06 32.45±13.04 53.52±15.41狗皮膏藥組 16 4.92±0.61 4.66±0.52 34.45±7.40 31.89±5.30 0.48±0.03 0.46±0.05 1.25±0.05 1.25±0.06 46.24±10.52 51.20±13.54 F 值 4.987 4.116 2.292 15.428 1.655 87.704 4.053 6.784 6.083 2.236 P 值 0.011 0.023 0.113 ＜0.050 0.202 0.000 0.024 0.003 0.005 0.119

2.3 炎癥介質水平

給藥第3、7 天，4 組IL-1β、IL-6 水平比較差異有統計學意義，三黃跌打膏組IL-1β、IL-6 水平低于其余各組（P＜0.05）。見表3。

表3 4 組大鼠炎癥介質水平比較(ng/L,±s)

表3 4 組大鼠炎癥介質水平比較(ng/L,±s)

IL-1β IL-6 組別 只數 第3 天 第7 天 第3 天 第7 天 正常對照組 16 180.02±3.54 179.54±4.02 335.50±40.21 330.05±40.22 模型對照組 16 358.62±3.52 228.52±4.01 434.55±110.20 348.52±40.20 三黃跌打膏組 16 312.34±3.40 180.02±4.84 281.52±104.20 295.52±46.20 狗皮膏藥組 16 328.94±2.98 186.68±5.01 358.41±124.01 340.02±50.00 F 值 803.729 513.538 7.322 6.222 P 值 ＜0.050 ＜0.050 0.002 0.004

3 討論

急性軟組織損傷通常是由于肌肉或肌腱、韌帶不同程度的損傷，導致出現疼痛、活動受限、僵硬等癥狀，若未及時得到有效治療，則會引起肌肉萎縮、關節強直、關節脫位等，威脅患者身體健康與生命安全[5-6]。該病發生的早期，多采用冷敷、抬高肢體、加壓包扎等處理措施，初期可有效控制病情發展，但預后不佳[7-8]。

本研究選取64 只SPF 級SD 大鼠作為樣本，將其中48 只建模并分組，給予不同治療方法，研究數據顯示，給藥第3、7 天，提示不同干預方法干預后大腿周長生長情況亦有所不同，其中三黃跌打膏組治療效果更佳[9]。研究還發現，與其他各組比較，三 黃跌打膏組大鼠第3 天與第7 天的血液流變學指標變化幅度更明顯。提示與其他治療方法比較，三黃跌打膏外敷法能有效改善大鼠血液流變學情況。IL-6 主要是由T、β 細胞、單核巨噬細胞分泌的細胞因子，為炎癥反應的促發劑，可引起β 細胞分化，產生抗體，誘導T 細胞激活增殖及分化，并參與機體免疫應答，可反映組織受損程度[10-11]。IL-1β 為炎癥反應中的一個重要介質，組織受損后炎癥部位、脊髓水平的濃度明顯升高，會誘導其他促炎因子釋放，促進、維持炎癥反應[12-13]。研究發現，給藥第3、7 天4 組IL-1β、IL-6 比較差異有統計學意義，且三黃跌打膏組IL-1β、IL-6 水平均最低，提示三黃跌打膏可顯著抑制急性軟組織損傷大鼠軟組織分泌IL-1β、Il-6 水平，調節炎癥介質水平，緩解腫脹、疼痛等癥狀[14-15]。三黃跌打膏主要由大黃、黃連、黃柏、制天南星、赤小豆、樟腦等成分組成，其中大黃、黃連、黃柏具有清熱解毒、瀉下攻積、活血化瘀等功效，制天南星具有燥濕化痰、祛風、止痙、散結消腫等功效，赤小豆可清熱解毒、利水消腫，樟腦可通竅。諸藥合用，外敷于相應部位，可共奏活血祛瘀、涼血止痛、散結、消腫等功效，效果顯著。

綜上所述，三黃跌打膏外敷治療大鼠急性軟組織損傷效果顯著，可明顯改善其血液流變學指標，減輕炎癥反應，臨床價值顯著。