微柱凝膠技術(shù)在臨床輸血中的應(yīng)用效果及對提高患者輸血有效率的作用分析

趙鼎銘 郭美玲

（1 葫蘆島市中心血站，遼寧 葫蘆島 125000；2 葫蘆島市中心醫(yī)院，遼寧 葫蘆島 125000）

在臨床治療中，臨床輸血屬于有效的治療方法。現(xiàn)今，隨著輸血相關(guān)技術(shù)的逐漸發(fā)展，輸血成了搶救患者生命的一項(xiàng)關(guān)鍵措施，它可以有效地改善患者的血液循環(huán)和物質(zhì)的新陳代謝，在臨床上具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值[1]。輸血療法可以迅速地增加患者的血紅細(xì)胞和血紅素，因此在臨床上得到了廣泛地運(yùn)用。但由于血液的非同源性，會(huì)引起患者出現(xiàn)過敏、發(fā)熱、溶血等癥狀。為避免出現(xiàn)輸血不良反應(yīng)，必須對供血者的血型鑒定、抗體篩選等進(jìn)行檢測。抗體篩選和交叉配血都是不可忽視的兩個(gè)步驟，一個(gè)是檢查患者抗體是否存在異常抗體，另一個(gè)是檢查受血者和獻(xiàn)血者之間的抗體和抗原是否一致，以保證供血者和受血者的血型與臨床上的血型相符。目前，醫(yī)務(wù)工作者運(yùn)用凝聚胺交叉配血方法進(jìn)行異常抗原篩選及交叉配血試驗(yàn)，其工作原理是通過中和紅細(xì)胞的表面電荷，將不規(guī)則的抗原與之相連接，并通過快速的離子化，檢測到未聚特異性凝集的異常抗原。盡管該方法具有很高的敏感性，能夠檢測到IgG和IgM抗體，但缺點(diǎn)是對操作的要求很高，必須對搖動(dòng)的強(qiáng)度和時(shí)機(jī)進(jìn)行控制，容易受到人為因素的影響。現(xiàn)今在臨床輸血方面有多種新型的方法和觀念，出現(xiàn)了多種臨床輸血新技術(shù)和概念[2]。醫(yī)療機(jī)構(gòu)對需要輸血治療的患者使用微柱凝膠技術(shù)輸血治療，對其輸血效果做出分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料 納入時(shí)間為2018年4月至2019年4月，選取來我院就診的需要輸血治療的患者120例，依照隨機(jī)數(shù)字表法分組，每組60例。試驗(yàn)組男32例，女28例，年齡25～74歲，平均年齡（50.31±2.15）歲；參照組男31例，女29例，年齡24～75歲，平均年齡（50.23±2.38）歲；以上數(shù)據(jù)錄入到統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件中，并對其進(jìn)行分析檢驗(yàn)，組間數(shù)據(jù)對比差異性不明顯（P＞0.05）。以上所有研究對象均知情本組研究內(nèi)容，并自愿簽署同意書，上報(bào)于我院倫理委員會(huì)，得到批準(zhǔn)認(rèn)可，保證積極配合臨床操作。

1.2 方法 采取所有患者5 mL血液標(biāo)本，放入存在抗凝劑的真空管中，采集兩管作為試驗(yàn)標(biāo)本，將其充分混勻?qū)嵤┰囼?yàn)。試驗(yàn)組使用微柱凝膠技術(shù)輸血，內(nèi)容為：對所有患者混合后的血液標(biāo)本，吸取供血人員和受血人員的血樣懸液10 μL，將1 mL生理鹽水加入，配置成濃度為0.8%的紅細(xì)胞懸液。使用微柱凝膠卡進(jìn)行離心，對其檢測編號進(jìn)行標(biāo)記，并對所有主側(cè)管和次側(cè)管進(jìn)行測試。依照微柱凝膠卡的使用說明書，在主側(cè)管中將配置好的濃度為0.8%的紅細(xì)胞懸液中加入受血人員血樣，在次側(cè)管中將配置好的濃度為0.8%的紅細(xì)胞懸液中加入供血人員的血樣。分別在離心機(jī)中加入兩種混合液，離心時(shí)間為3～5 min（轉(zhuǎn)速為3 500 r/min），對其檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行觀察[2]。

參照組使用傳統(tǒng)凝聚胺交叉配血技術(shù)輸血，主要包含：嚴(yán)格依照試劑說明書進(jìn)行操作，將受血人員和供血人員的血樣標(biāo)本配置成濃度為3%～4%的紅細(xì)胞鹽水懸液[3]。選取2支潔凈試管，將主側(cè)管、次側(cè)管標(biāo)注清晰，然后將供血人員1滴紅細(xì)胞懸浮液和受血人員2滴血樣放入主側(cè)管中，將受血人員1滴紅細(xì)胞懸浮液和供血人員2滴血樣放入次側(cè)管中。并將0.8 mL低離子介質(zhì)液體分別放在兩支試管中，靜止1 min后，取1滴凝聚胺放入試管中。以3 000 r/min的速度進(jìn)行離心，離心時(shí)間為15 s。將上清液倒出，對殘留液體進(jìn)行觀察，如未出現(xiàn)凝集情況，需要重新試驗(yàn)，并對其相關(guān)結(jié)果進(jìn)行判定。最后使用兩種方法將交叉配血不和的病理進(jìn)行直接抗球蛋白試驗(yàn)檢測，并判定其結(jié)果[4]。

1.3 觀察指標(biāo) 對所有患者均使用直接抗人球蛋白（DAT）試驗(yàn)，針對其DAT試驗(yàn)敏感性、DAT試驗(yàn)特異性、DAT試驗(yàn)陽性率結(jié)果進(jìn)行比較。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 對本組研究中涉及的相關(guān)數(shù)據(jù)錄入至SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件中，分別使用[n（%）]表示計(jì)數(shù)資料、使用（±s）表示計(jì)量資料，并對應(yīng)進(jìn)行χ2和t值檢驗(yàn)，組間數(shù)據(jù)對比結(jié)果顯示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義時(shí)用P＜0.05表示。

2 結(jié) 果

對所有患者均使用直接抗人球蛋白試驗(yàn)，對其檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行比較。試驗(yàn)組和參照組針對交叉配血不合的血樣，采取直接抗人球蛋白檢驗(yàn)，對兩組陽性率進(jìn)行比較，差異性不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)組患者配血的特異性、敏感性相比于參照組均較優(yōu)，組間差異性顯著（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組患者使用直接抗人球蛋白檢驗(yàn)結(jié)果對比[n（%）]

3 討 論

隨著臨床輸血技術(shù)的逐漸更新，輸血治療成為臨床救治患者生命的主要方法，特別是對于危重病患者，輸血治療可以最大程度地挽救患者的生命[5]。由于輸血治療中存在著過敏、溶血、發(fā)熱等多種不良反應(yīng)，因此在實(shí)際應(yīng)用中，安全性和有效性是判斷輸血是否能夠獲得成功的關(guān)鍵。由于輸血是臨床治療中最為常見的一種治療方式，而在進(jìn)行輸血之前必須為患者進(jìn)行交叉配血檢測，以此判斷受血者是否能夠使用供血者的血液，從而降低發(fā)生溶血的風(fēng)險(xiǎn)概率。根據(jù)血液類型的鑒別，通過交叉配血的選擇，進(jìn)一步確認(rèn)了供血者與受血人的血型是否相符，從而確保血液安全使用，防止出現(xiàn)各種突發(fā)事件。輸血治療是搶救和治療的重要方法之一，它能起到維持血容量、預(yù)防休克的效果，對搶救患者的生存非常重要。為確保輸血的安全性，醫(yī)務(wù)工作者在進(jìn)行血型鑒定和抗體篩選等方面都要做好充分的準(zhǔn)備工作，避免出現(xiàn)嚴(yán)重的并發(fā)癥。當(dāng)前醫(yī)務(wù)工作者普遍采用的是凝聚胺交叉配血法進(jìn)行抗體篩選和交叉配血，這種檢測技術(shù)雖能檢測到非標(biāo)準(zhǔn)的血樣，但檢測過程容易受人為因素影響，而微柱凝膠技術(shù)具有簡單快捷、安全性高等優(yōu)點(diǎn)，可以克服凝聚胺交叉配血法的缺點(diǎn)，保證了輸血的安全性。

近幾年，在各個(gè)醫(yī)院，血液系統(tǒng)中廣泛采用了微柱凝膠技術(shù)輸血進(jìn)行交叉配血。既能檢測到凝聚胺交叉配血法IgM類的血型，又能大大減少了溶血性輸血的發(fā)生率。微柱凝膠法交叉配血由于采用了分子篩法，具有樣品數(shù)量小、操作簡便、敏感性高、可長時(shí)間存放等特點(diǎn)，成為目前國內(nèi)外輸血者普遍采用的一種免疫檢查技術(shù)，但由于其在血液中經(jīng)常會(huì)產(chǎn)生亞側(cè)向凝集反應(yīng)，如果不能及時(shí)、準(zhǔn)確地進(jìn)行分析，將會(huì)降低血液供應(yīng)的準(zhǔn)確性。有學(xué)者指出，針對輸血方法進(jìn)行研究，傳統(tǒng)凝聚胺交叉配血技術(shù)具有配血速度較快的優(yōu)點(diǎn)，在臨床急診配血中適用度較高，而主凝膠技術(shù)配血具有較高的敏感度和特異性，進(jìn)而將臨床輸血有效率提升[6]。又有學(xué)者指出，微柱凝膠技術(shù)配血具有較強(qiáng)的敏感性、較高的特異性，將以往的凝聚胺法交叉配血不完全抗體漏檢的缺點(diǎn)予以彌補(bǔ)，建議在臨床輸血治療中可將兩種方法聯(lián)合使用[7]。微柱凝膠技術(shù)十分敏感，逐漸趨于標(biāo)準(zhǔn)化，其結(jié)果具有保存時(shí)間長、操作安全的特點(diǎn)，臨床上可廣泛應(yīng)用[8-9]。

一般在患者輸血治療前均采取血型鑒定試驗(yàn)、抗體篩查試驗(yàn)、交叉配血試驗(yàn)以及血液免疫學(xué)檢查等，試驗(yàn)原理是抗原-抗體反應(yīng)[10]。以往試驗(yàn)方法主要包含抗人球蛋白法和鹽水法。鹽水法具有操作簡單，針對不完全抗體具有較低的檢出率，抗人球蛋白法屬于輸血檢驗(yàn)中金標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法，其試驗(yàn)操作十分復(fù)雜，具有較長的試驗(yàn)時(shí)間，針對操作人員具有較高的要求，在臨床輸血中應(yīng)用受限[11]。

凝聚胺交叉配血法具有簡單操作、快速檢驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)，試驗(yàn)原理主要經(jīng)低離子介質(zhì)將標(biāo)本介質(zhì)的離子強(qiáng)度降低，進(jìn)而使紅細(xì)胞之間的距離縮小，有利于血清中的紅細(xì)胞和抗體出現(xiàn)特異性結(jié)合[12]。凝聚胺交叉配血法的試驗(yàn)結(jié)果受血漿蛋白、冷凝集素影響較大，在臨床檢驗(yàn)中，其特殊血型極易出現(xiàn)漏檢情況[13]。凝聚胺交叉配血法測定容易受到肝素、藥物等因素的影響，從而產(chǎn)生偏差。凝聚胺交叉配血法溶液會(huì)釋放大量陽性電荷，導(dǎo)致紅細(xì)胞出現(xiàn)非特異性凝集，臨床上通過滴加枸櫞酸鈉后，對凝集是否分散進(jìn)行觀察，以判斷血型匹配結(jié)果。而微柱凝膠技術(shù)則是將生物化學(xué)凝膠過濾技術(shù)與離心技術(shù)與免疫化學(xué)抗原的抗體反應(yīng)有機(jī)地融合在一起，其檢測效果好，而且不會(huì)受到混合因子的干擾。微柱凝膠技術(shù)的交叉配型可比凝聚胺交叉配血法更好地檢出較微弱的抗原抗體，并能準(zhǔn)確地引導(dǎo)患者進(jìn)行合理的血液輸入，影響因素少，結(jié)果準(zhǔn)確。與傳統(tǒng)的凝集胺交叉配血法比較，微柱凝膠技術(shù)具有較高的檢測敏感性和特異性。

微柱凝膠技術(shù)是一項(xiàng)新型的血液血清檢測技術(shù)，它的本質(zhì)就是血液凝固試驗(yàn)，即選擇凝膠的種類和濃度來調(diào)節(jié)分子篩的粒度，以保證自由的紅細(xì)胞全部穿過分子篩，從而區(qū)分出是否有凝集的紅細(xì)胞。微柱凝膠技術(shù)可用于篩選異常的抗體，具有優(yōu)良的敏感度、方便快捷的操作、高精確度、可重復(fù)性利用等特點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于交叉配血、抗體篩選、血型檢測中。與凝聚胺交叉配血法相比，微柱凝膠技術(shù)加入了抗人球蛋白測試和大分子量梯度的高濃度液后，不僅節(jié)省了清洗過程，還能提高檢測靈敏度，便于對低濃度的抗體進(jìn)行檢測。微柱凝膠技術(shù)主要為抗人球蛋白試驗(yàn)，現(xiàn)今臨床上紅細(xì)胞免疫學(xué)檢測技術(shù)應(yīng)用較廣。在微柱凝膠卡中，包含抗人球蛋白試驗(yàn)、大分子密度梯度溶液試驗(yàn)，不需要洗滌紅細(xì)胞，即可采取微柱凝膠試驗(yàn)，將試驗(yàn)的敏感度予以提升。微柱凝膠法相比于以往抗人球蛋白試管法，對試驗(yàn)人員的要求較低、操作步驟簡單、試驗(yàn)時(shí)間短、試驗(yàn)操作相比于標(biāo)準(zhǔn)化簡單，便于得出結(jié)果和保存，在臨床上應(yīng)用較廣。與凝聚胺交叉配血法比較，微柱凝膠技術(shù)具有簡便、操作方便、檢測中樣品使用量小、不需要清洗、保存時(shí)間較長、更能滿足規(guī)范化的需求。但是，由于該技術(shù)的費(fèi)用比較高，且花費(fèi)時(shí)間較長，不適合在急診輸液中使用。同時(shí)，結(jié)合凝聚胺交叉配血法和微柱凝膠技術(shù)進(jìn)行非標(biāo)準(zhǔn)的抗體篩選和交叉配型，確保選擇的血液處理方法具有科學(xué)性和可行性，為臨床用藥期間的患者身體和心理健康提供了可靠的保障。總之，微柱凝膠技術(shù)靈敏度高，判斷簡單，而且檢測的結(jié)果不容易被人為因素干擾，可作為臨床醫(yī)師在臨床應(yīng)用中的參考依據(jù)。

以上數(shù)據(jù)對比得出，試驗(yàn)組和參照組針對交叉配血不合的血樣，采取直接抗人球蛋白檢驗(yàn)，對兩組陽性率進(jìn)行比較，差異性不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)組患者配血的特異性、敏感性相比于參照組均較優(yōu)，組間差異性顯著（P＜0.05）。提示不同交叉配血方式的效果不同，凝聚胺交叉配血法的陽性檢出率高，檢測速度快。微柱凝膠技術(shù)的操作簡單，具有可重復(fù)性，結(jié)果可以長期保存，誤差率較小，但是耗時(shí)較長。與凝聚胺交叉配血法相比較，微柱凝膠技術(shù)檢驗(yàn)在臨床輸血治療中具有更好的應(yīng)用價(jià)值。

綜上所述，在臨床輸血治療中，使用微柱凝膠技術(shù)檢驗(yàn)，將輸血中出現(xiàn)的交叉配血敏感性和特異性予以提升，臨床上具有較高的應(yīng)用價(jià)值。