微柱凝膠法與凝聚胺法及鹽水法在交叉配血中的應(yīng)用效果

傅萍燕，賴婷婷，曾志

龍巖人民醫(yī)院 (福建龍巖 364000)

輸血是臨床搶救患者的重要方法之一，適用于急救及改善患者健康狀況。由于人體血液中的抗體、抗原較為復(fù)雜，輸血時機(jī)體可能產(chǎn)生排異反應(yīng)，導(dǎo)致受血者出現(xiàn)溶血性輸血反應(yīng)[1]，故在輸血前進(jìn)行交叉配血試驗尤為重要。交叉配血的主要目的是檢查供血者與受血者之間血液的相容性，以保證輸血過程中受血者的人身安全[2]。目前，臨床進(jìn)行交叉配血試驗的方法繁多，其中，鹽水法、凝聚胺法(moditying polybrene test，MPT)及微柱凝膠法(microtubes gel test，MGT)是3種常用的試驗方法，但采用不同的試驗方法進(jìn)行交叉配血的效果不盡相同[3]。鑒于此，本研究探討MGT、MPT及鹽水法在交叉配血中的應(yīng)用效果，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年2月至2020年2月我院收治的200例需進(jìn)行交叉配血的患者為研究對象，其中，男115例，女85例；年齡46～72歲，平均(59.23±3.28)歲；既往有輸血史65例，妊娠史77例。

1.2 方法

所有患者均以MGT、MPT和鹽水法進(jìn)行交叉配血試驗，采集受血者、供血者(本研究以龍巖市中心血站提供的成分血為供血者)3 ml的抗凝靜脈血，采用臺式離心機(jī)(南京貝登醫(yī)療股份有限公司，型號 L530)以3 000 r/min離心1 min后，分離血漿；用0.9%氯化鈉注射液與受血者、供血者的紅細(xì)胞配成1%和5%的紅細(xì)胞懸液備用。

采用MGT進(jìn)行交叉配血試驗：試劑為低離子抗人球蛋白卡[伯樂生命醫(yī)學(xué)產(chǎn)品(上海)有限公司]，標(biāo)記主次側(cè)卡片，于次側(cè)加50 μl受血者1%紅細(xì)胞懸液及50 μl供血者血漿，主側(cè)加50 μl供血者1%紅細(xì)胞懸液及50 μl受血者血漿；在37 ℃下孵育15 min后，將卡片放在專用離心機(jī)[伯樂生命醫(yī)學(xué)產(chǎn)品(上海)有限公司，ID-Centrifuge型]中以2 000 r/min離心10 min，觀察結(jié)果，若離心后紅細(xì)胞全部下沉到微管底部，說明未發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，交叉配血結(jié)果相合，若微管中的紅細(xì)胞產(chǎn)生凝集，離心后未能全部下沉到底部，表示配血結(jié)果不合。

采用MPT進(jìn)行交叉配血試驗：試劑為凝聚胺介質(zhì)(珠海貝索生物技術(shù)有限公司)，在兩支試管上注明主次側(cè)，于次側(cè)加100 μl供血者血漿及50 μl受血者5%紅細(xì)胞懸液，主側(cè)加100 μl受血者血漿及50 μl供血者5%紅細(xì)胞懸液，再將0.65 ml低離子溶液分別加入兩管中，混合均勻后，再分別向兩管中加入2滴凝聚胺溶液，再次混勻，然后用低速離心機(jī)(珠海貝索生物技術(shù)有限公司，型號 BASO2005-1型)以3 400 r/min離心10 s，去除上清液，留取管底0.1 ml液體，觀察紅細(xì)胞在管底有無發(fā)生凝集情況，若未發(fā)生凝聚，則需重新檢測；最后，將2滴懸浮液加入兩管中，輕搖試管，使液體混勻，若60 s內(nèi)凝集散開，說明懸浮液所導(dǎo)致的非特異性凝聚，交叉配血結(jié)果相合，若凝集不散開，表示配血結(jié)果不合。

采用鹽水法進(jìn)行交叉配血試驗：標(biāo)記主次側(cè)試管，于主側(cè)加50 μl供血者5%紅細(xì)胞懸液及100 μl受血者血漿，次側(cè)加100 μl供血者血漿和50 μl受血者5%紅細(xì)胞懸液，用低速離心機(jī)以1 000 r/min離心1 min，觀察試管中的上清液有無溶血，并將試管輕輕旋轉(zhuǎn)或輕彈，對試管底反應(yīng)物凝集情況進(jìn)行仔細(xì)觀察，若發(fā)現(xiàn)溶血或凝集現(xiàn)象，表示配血結(jié)果不合，若未發(fā)現(xiàn)溶血或凝集現(xiàn)象，表示交叉配血結(jié)果相合。

1.3 評價指標(biāo)

觀察記錄3種試驗方法的配血時間，比較3種試驗方法的配血結(jié)果，并分析配血結(jié)果不合的原因。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 配血時間

MGT的配血時間為(34.56±4.68)min，MPT的配血時間為(13.15±2.45)min，鹽水法的配血時間為(21.32±3.41)min，MPT、鹽水法、MGT 3種試驗方法的配血時間依次延長，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=1 771.772，P<0.05)。

2.2 配血結(jié)果

MGT的配血不合率高于MPT及鹽水法，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；MPT與鹽水法的配血不合率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1 3種試驗方法的配血結(jié)果比較(200例)

2.3 配血結(jié)果不合原因

3種試驗方法配血結(jié)果不合的原因中，血液病為主要原因，見表2。

表2 3種試驗方法配血結(jié)果不合的原因比較(例)

3 討論

輸血雖然能夠幫助患者改善自身病情，但也存在一定的風(fēng)險，如輸血過程中人體免疫系統(tǒng)可損傷抗原細(xì)胞，從而引發(fā)嚴(yán)重不良反應(yīng)[4]。而交叉配血試驗是患者輸血前必不可少的步驟，旨在保證輸血安全。交叉配血試驗通常需進(jìn)行主次側(cè)試驗，若主側(cè)試驗出現(xiàn)凝聚，表示不能輸血，若次側(cè)試驗出現(xiàn)凝聚，表示雖可輸血但需減少輸血[5]。現(xiàn)階段，隨著醫(yī)療檢測技術(shù)的不斷發(fā)展，MGT、MPT和鹽水法等方法被廣泛用于臨床交叉配血試驗中。因此，積極探尋不同試驗方式的優(yōu)缺點，對今后臨床選擇適合的試驗方式尤為重要。

本研究結(jié)果顯示，MPT、鹽水法、MGT 3種試驗方法的配血時間依次延長，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；MGT的配血不合率高于MPT及鹽水法，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。經(jīng)分析，其原因在于，MGT是集生物化學(xué)凝膠過濾技術(shù)、離心技術(shù)和特性免疫技術(shù)反應(yīng)于一體的新技術(shù)，通過在微柱中進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)，再借助凝膠微小的過濾網(wǎng)分開凝集、游離紅細(xì)胞，可判斷出抗人球蛋白補(bǔ)體成分是否為致敏的紅細(xì)胞，該方法靈敏度較高，易檢測出微弱凝聚和不規(guī)則抗體，且可降低人為誤差率，試驗結(jié)果更為準(zhǔn)確，更能保證患者的用血安全[6-7]；但其檢測成本較高，且需一定的檢測時間，可能耽誤急診重癥患者的搶救時機(jī)。MPT通過凝聚胺溶解后，會釋放大量正電荷，使紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷被中和，進(jìn)而縮短紅細(xì)胞間距，使正常紅細(xì)胞間出現(xiàn)可逆非特異性凝集，當(dāng)與抗體致敏紅細(xì)胞凝集時，可出現(xiàn)不可逆凝集，從而判斷配血結(jié)果的相合情況[3，8]，此外，MPT可在15 min內(nèi)完成檢測，具有快速、操作簡便的優(yōu)勢；但MPT易受人為因素、溫度、藥物等的影響，當(dāng)患者存在自身免疫性溶血性貧血、輸血妊娠史等情況時，其紅細(xì)胞上的抗原較弱，易出現(xiàn)漏檢。鹽水法對檢測設(shè)備的要求低，且成本低廉、耗時較短，可有效檢出IgM類血型抗體，且在檢測ABO弱抗原抗體反應(yīng)能力方面的靈敏度較高，可在一定程度上彌補(bǔ)MPT存在的不足，但由于IgG在鹽水介質(zhì)中無法與相應(yīng)抗體的紅細(xì)胞進(jìn)行凝集，故鹽水法對人體血液中IgG抗體的檢測能力不佳，靈敏度不高[9]。本研究結(jié)果還顯示，3種試驗方法配血結(jié)果不合的原因中，血液病為主要原因。經(jīng)分析，其原因可能為，血液病多為反復(fù)輸血產(chǎn)生免疫性抗體，可凝集自身和其他所有人的紅細(xì)胞，增加交叉配血不合率。對此，建議針對常規(guī)輸血時間較充裕的患者，可選用MGT進(jìn)行交叉配血，以提高輸血安全性；針對急診搶救患者，可先采用鹽水法配合MPT進(jìn)行交叉配血，再采用MGT進(jìn)行交叉配血復(fù)查，不僅可保證輸血的及時性，還可減少輸血反應(yīng)的發(fā)生。

綜上所述，采用MGT、MPT及鹽水法進(jìn)行交叉配血試驗各有優(yōu)缺點；相較于MPT及鹽水法，采用MGT進(jìn)行交叉配血可提高試驗的安全性，但耗時較長。臨床可根據(jù)實際情況靈活選用合適的試驗方法，以提高交叉配血的試驗效率及輸血的安全性。