煙草NtMYB4a基因酵母雙雜交誘餌載體的構建及互作蛋白的篩選

謝瑞瑩 曾露桂 姜超英 聶 瓊,,*

(1貴州大學煙草學院，貴州省煙草品質研究重點實驗室，貴州 貴陽 550025； 2貴州大學農學院，貴州 貴陽 550025；3貴州省煙草公司 貴州 貴陽 550081)

轉錄因子(transcription factor，TF)指能夠與真核基因的順式作用元件發生特異性相互作用，并對基因的轉錄有激活或抑制作用的DNA結合蛋白[1]。轉錄因子一般含有DNA結合結構域和轉錄激活結構域，前者可識別DNA上的特異序列，并使轉錄激活結構域定位于所調節的基因上游，后者可同轉錄復合體的其他成分作用，啟動轉錄激活結構域所調節的基因進行轉錄[2]。MYB轉錄因子(MYB transcription factor)家族被認為是植物中最大的一類轉錄因子，廣泛參與植物次生代謝、細胞分化、細胞周期調控、激素和環境因子的應答等生物學過程[3]，在植物抗逆應答過程中起著關鍵的調控作用[4]。此外，MYB轉錄因子通常與其他蛋白相互作用形成轉錄復合體共同調控各種代謝、發育過程或抗逆反應[5-6]。

酵母雙雜交系統利用雜交基因激活報告基因的表達，從而探測蛋白之間的相互作用[7]。該技術靈敏度高、功能強大、適用范圍廣，現已被應用于多個研究領域。在植物抗逆機制研究中，利用酵母雙雜交系統從cDNA文庫中篩選到9類與四季秋海棠(Begoniasemperflorens)BsMYB62互作的蛋白、2個與木薯(ManihotesculentaCrantz)MeMYB2互作的蛋白，并推測BsMYB62與這9類蛋白相互作用響應低溫和高光脅迫[8]，MeMYB2與MeNPH3互作參與光信號調節、與MePetB互作參與氣孔調節[9]。

煙草(Nicotianatabacum)是重要的經濟作物，也是重要的模式作物。探討煙草轉錄因子響應非生物脅迫的調控機制，對培育煙草抗逆品種具有重要意義。……