廣西斑地錦及其混淆品DNA 條形碼分子鑒定

侯 靜，黃 勇，黎 理，王素娥，蔡 毅

（廣西中醫藥大學，南寧 530001）

斑地錦（Euphorbia maculataL.）是大戟科（Euphorbiaceae）大戟屬（Euphorbia）地錦草組藥用植物，有清熱解毒、涼血止血、利濕退黃等功效；可用于治療痢疾、泄瀉、尿血、崩漏、瘡癤癰腫、濕熱黃疸等疾病［1］。近年來研究發現，其也具有保肝、治療宮頸癌、抗腫瘤、抗高血糖、抑制胃癌細胞增殖、抗骨質疏松及抗細胞毒性等藥理作用［2-14］。地錦草組植物有10 種［15］，分布在廣西的有6 種，其中斑地錦、匍匐大戟（Euphorbia prostrataAit.）、臺西地錦［Euphorbia taihsiensis（Chaw et Koutnik）Oudejians.］、千 根 草（Euphorbia thymifoliaL.）這幾種較為常見且常常混生，植物形態和藥材性狀也極為相似［16，17］，這就造成斑地錦鑒別困難，從而無法準確確定其來源。本研究采用DNA 條形碼技術對廣西產斑地錦及混淆品進行鑒別，有助于提高斑地錦臨床用藥的準確性，同時為地錦草組植物的鑒別提供一定的理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗儀器和試劑 儀器：ES2220M 型電子天平（普利賽斯公司），Milli-Q Biocel 型純水儀（Millipore 公司），DYY-6C 型電泳儀（北京六一生物科技有限 公司），Thermal Cycler-T100 型梯 度PCR 儀（BIORAD 公司），H1650-W 型高速離心機（湘儀公司），GelDoc XR+型全自動凝膠成像系統（BIORAD公司），HWS-24 型電熱恒溫水浴鍋（上海齊欣科學儀器有限公司），TGem Plus 型超微量分光光度計（天根生化科技（北京）有限公司）。試劑：2×Reaction Mix 緩沖液、D2000 DNA Marker、DNase/RNase-Free Deionized Water（TIAN GEM 公 司）；GelGreen（41003，Biotium）；1 mol/L Tris-HCl 緩沖液（pH 8.0）、0.5 mol/L EDTA 溶液（pH 8.0）、6×DNA Loading Buffer（Solarbio）、氯化鈉（西隴科學股份有限公司）、瓊脂糖（博格林生物）、無水乙醇、異丙醇、氯仿（分析純，天津市富宇精細化工有限公司）、CTAB（美侖生物科技有限公司）。

1.1.2 樣品 采自廣西壯族自治區的斑地錦及其混淆品樣品共41 份，經鑒定為大戟科大戟屬斑地錦、匍匐大戟、臺西地錦及千根草，樣品具體信息如表1所示。……