口腔清潔護(hù)理用品牙膏中葉綠素銅鈉鹽含量的測定高效液相色譜法(QB/T 5638-2021)

2022-06-13 02:30:58

口腔護(hù)理用品工業(yè) 2022年3期

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。

本文件由中國輕工業(yè)聯(lián)合會提出。

本文件由全國口腔護(hù)理用品標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會牙膏分技術(shù)委員會(SAC/TC492/SC1)歸口。

本文件起草單位：廣州質(zhì)量監(jiān)督檢測研究院、福建愛潔麗日化有限公司、淮安縱橫生物科技有限公司、杭州皎潔口腔保健用品有限公司、黑龍江省輕工科學(xué)研究院。

本文件主要起草人：王繼才、夏澤敏、李鑫宇、熊小婷、梁文耀、汪毅、聶明霞、稅鈿、吳謙、譚建華、席紹峰、郭長虹、吳玉鑾、陳萬金、丁觀軍、張秀英、王兆鵬、丁愷、路崴。

本文件為首次發(fā)布。

1 范圍

本文件描述了采用高效液相色譜法測定牙膏等口腔清潔護(hù)理用品中葉綠素銅鈉鹽的含量，包括原理、試劑、儀器和設(shè)備、分析步驟、結(jié)果計算、檢出濃度和定量濃度、回收率和精密度，允許差。

本文件適用于采用高效液相色譜法測定牙膏等口腔清潔護(hù)理用品中葉綠素銅鈉鹽的含量。

2 規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。

GB/T 6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

3 術(shù)語與定義

本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。

4 原理

試樣經(jīng)70%乙腈水溶液(體積分?jǐn)?shù))提取，離心過濾后，用高效液相色譜儀測定葉綠素銅鈉鹽，以保留時間和紫外光譜圖定性，外標(biāo)法定量。

5 試劑和材料

除另有規(guī)定外，本試驗用水均為GB/T 6682中規(guī)定的一級水。

5.1 葉綠素銅鈉鹽對照品CAS No:11006-34-1，純度≥98%。

5.2 乙腈：色譜純。

5.3 乙酸：分析純。

5.4 0.5%乙酸水溶液(體積分?jǐn)?shù))：準(zhǔn)確量取5mL乙酸(5.3)至燒杯中，再加入995mL純水，混勻。

5.5 70%乙腈水溶液(體積分?jǐn)?shù))：準(zhǔn)確量取700mL乙腈(5.2)至燒杯中，再加入300mL純水，混勻。

5.6 葉綠素銅鈉鹽標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液(1000μg/mL)：稱取葉綠素銅鈉鹽對照品(5.1)約10mg(精確至0.01mg)于10mL容量瓶中，用70%乙腈水溶液(5.5)定容至刻度，混勻。

5.7 葉綠素銅鈉鹽標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：用70%乙腈水溶液(5.5)將葉綠素銅鈉鹽標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液(5.6)分別配成一系列濃度為0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

5.8 石英砂： 25～150目。

5.9 微孔濾膜：0.45μm，材質(zhì)為尼龍。

6 儀器和設(shè)備

6.1 高效液相色譜儀：配二極管陣列檢測器。

6.2 分析天平：精度為0.1mg和0.01mg。

6.3 離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于10000r/min。

6.4 渦旋振蕩器：震蕩速度不低于1500r/min。

6.5 超聲波清洗器：功率不低于250W。

7 分析步驟

7.1 試樣處理

將牙膏試樣擠去20mm后，稱取約1g試樣(精確至0.001g)置于50mL聚丙烯離心管中，加入約1g石英砂(5.8)，再準(zhǔn)確加入70%乙腈水溶液(5.5)20mL，渦旋混勻后超聲提取10min，然后取適量提取液以10000r/min離心5min，上清液經(jīng)0.45μm濾膜(5.9)過濾，供高效液相色譜測定。

7.2 液相色譜參考條件

液相色譜參考條件如下：

a)色譜柱：C18柱(4.6mm×150mm，5μm)，或等效色譜柱；

b)流動相：乙腈(5.2)+0.5%乙酸水溶液(5.4)，梯度洗脫，洗脫程序見表1；

表1 梯度洗脫程序

c)流量：1mL/min；

d)檢測波長：408nm；

e)柱溫：30℃；

f)進(jìn)樣量：10μL。

7.3 測定

7.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

分別將標(biāo)準(zhǔn)工作溶液(5.7)注入高效液相色譜儀，在7.2色譜條件下測定標(biāo)準(zhǔn)溶液，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。葉綠素銅鈉鹽高效液相色譜圖參見附錄A中的圖A.1。

7.3.2 樣品測定

將按(7.1)處理好的待測試樣溶液注入高效液相色譜儀，在7.2的色譜條件下進(jìn)行測定，高效液相色譜圖參見附錄A中的圖A.2。根據(jù)保留時間和紫外吸收光譜圖定性，葉綠素銅鈉鹽3個特征峰(峰1：Cu chlorin e6、峰2：Cu chlorin p6和峰3：Cu isochlorin e4)的峰面積加和后采用外標(biāo)法定量。葉綠素銅鈉鹽3個特征峰對應(yīng)的紫外吸收光譜圖分別見附錄A中的圖A.3、A.4和A.5。

試樣溶液中葉綠素銅鈉鹽3個特征峰的響應(yīng)值之和應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍內(nèi)，超過線性范圍則應(yīng)稀釋后再進(jìn)行分析。