不同廠家的樺褐孔菌保健品中的活性成分含量分析

崔賀銘，高 洋，張玉瑩，彭雨鑫，付雯雯，武 毅

（吉林大學藥學院，長春 130021）

隨著對樺褐孔菌的深入研究，發現其具有多種藥理作用，樺褐孔菌可以提高機體免疫力、降血脂和降血糖，同時對心腦血管疾病也有一定治療作用[1-2]。這使得樺褐孔菌受到了國內外市場的熱切關注，其相關的保健產品被大量開發生產。但因不同廠家選用的樺褐孔菌品系、提取方法及提取條件各有不同，導致各個廠家生產的樺褐孔菌保健品的活性成分差別很大、良莠不齊。因此，本實驗選取了市面上6個不同廠家的樺褐孔菌保健品，采用紫外分光光度法對樣品中多糖、黃酮和多酚三種活性成分含量進行了檢測及對比分析，為今后開發樺褐孔菌相關保健品提供參考。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

UV-5800紫外分光光度儀（上海元析儀器有限公司），hh-S4恒溫水浴鍋（百祥儀器公司），ALC-10.4電子天平（上海精密科學儀器公司），101A-3E電熱鼓風干燥箱（上海實驗儀器廠有限公司）。

1.2 試劑與材料

樺褐孔菌保健品來自6個廠家（A.樺胺康白樺茸提取粉；B.Vimergy白樺茸膠囊；C.Siberian Forest樺樹茸膠囊；D.EQVILLE白樺茸精粉黑金顆粒；E.DR.med.Michalzik白樺茸精華膠囊；F.東鰲樺樹茸濃縮液黑金顆粒）；葡萄糖標準品購自國藥集團化學試劑有限公司；蘆丁和沒食子酸標準品均購自Solarbio試劑公司；福林酚試劑購自麥克林試劑有限公司；硝酸鋁、無水乙醇、亞硝酸鈉、氫氧化鈉、苯酚、濃硫酸及無水碳酸鈉均購自北京化工廠。

2 實驗方法與結果

2.1 樺褐孔菌保健品樣品制備

分別稱取6個不同廠家的樺褐孔菌產品樣品200 mg于100 mL容量瓶中，加入蒸餾水進行定容，混合均勻，獲得濃度為2 mg·mL-1待測樣本水溶液，備用。

2.2 標準曲線的建立

2.2.1 葡萄糖標準曲線的建立 參照前期實驗方法[5]，稱量于烘箱中干燥的葡萄糖標準品10 mg，置于100 mL容量瓶中，用蒸餾水進行定容，獲得濃度為0.1 mg·mL-1的葡萄糖標準品溶液，備用。移取葡萄糖標準溶液0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL、1.0 mL分別置于10 mL容量瓶中，加入蒸餾水使各組溶液體積補至1.0 mL，向各組加入5%苯酚溶液1.0 mL，充分混勻后，迅速加入5.0 mL濃硫酸，振蕩混勻，于40 ℃水浴中加熱15 min。加熱結束后，使用相應試劑重復同樣操作獲得空白對照組試劑。在490 nm條件下，測定吸光度值，每組平行測定3次，葡萄糖含量為橫坐標，吸光度值A為縱坐標，得到標準曲線的回歸方程：Y=6.138 3X+0.197 5，R2=0.999 8，葡萄糖標準曲線見圖1。

圖1 葡萄糖標準曲線

2.2.2 黃酮標準曲線的建立 參照前期實驗方法[3]，稱量于烘箱中干燥的蘆丁標準品11.3 mg，置于100 mL容量瓶中，用70%乙醇溶液進行定容，獲得濃度為0.12 mg·mL-1的蘆丁標準品溶液，備用。移取蘆丁標準溶液1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL分別置于10 mL容量瓶中，加入70%乙醇溶液使各組溶液體積補至5.0 mL，向各組加入5%亞硝酸鈉溶液0.5 mL，充分混勻后，靜置6 min，再加入10%硝酸鋁溶液0.5 mL，振蕩混勻，靜置6 min，向各組中加入4%氫氧化鈉溶液4 mL，靜置15 min，使用相應試劑重復同樣操作獲得空白對照組試劑。在510 nm條件下，測定吸光度值，每組平行測定3次，蘆丁含量為橫坐標，吸光度值A為縱坐標，得到標準曲線的回歸方程：Y=2.298 5X+0.212 0，R2=0.999 2，黃酮標準曲線見圖2。

圖2 黃酮標準曲線

2.2.3 多酚標準曲線的建立 參照前期實驗方法[5]，稱量于烘箱中干燥的沒食子酸標準品8.3 mg，置于100 mL容量瓶中，用蒸餾水進行定容，獲得濃度為0.083 mg·mL-1的沒食子酸標準品溶液，備用。移取沒食子酸標準溶液1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL、6.0 mL、7.0 mL、8.0 mL分別置于25 mL容量瓶中，加入蒸餾水使各組溶液體積補至8.0 mL，向各組加入1 mol·mL-1福林酚溶液3.0 mL，充分混勻后，在避光條件下靜置反應8 min，再加入10%碳酸鈉溶液6.0 mL，振蕩混勻，在避光條件下靜置反應60 min，向各組中加入蒸餾水進行定容，定容體積25 mL，充分混勻，使用相應試劑重復同樣操作獲得空白對照組試劑。在750 nm條件下，測定吸光度值，每組平行測定3次，沒食子酸濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標，得到標準曲線的回歸方程：Y=5.276 6X+0.005 6，R2=0.999 1，多酚標準曲線見圖3。

2.3 實驗結果

將6組不同廠家樣品，根據2.2.1、2.2.2、2.2.3所述方法對各樣本中的多糖、黃酮和多酚含量進行測定，各活性成分含量結果見表1、表2、表3。

表1 不同廠家樣品中多糖含量

表2 不同廠家樣品中黃酮含量

表3 不同廠家樣品中多酚含量

3 討論

研究發現，樺褐孔菌多糖具有抗氧化、降血糖、降血脂及保肝護肝等作用[4-6]；樺褐孔菌黃酮具有抗氧化及神經保護作用[7-8]；樺褐孔菌多酚則具有良好的抗氧化及抗腫瘤能力[9]。由于樺褐孔菌藥用價值高，具有防治常見慢性疾病的潛力，因此與其相關的保健產品不斷被開發生產并被投入市場。為考察市面上不同廠家的樺褐孔菌保健產品中多糖、黃酮和多酚三種活性成分含量，分別建立葡萄糖、蘆丁和沒食子酸的標準曲線，對6個不同廠家的樺褐孔菌保健品樣品進行了測定。研究發現，6個廠家樣品的活性成分中多糖成分含量較高。對于各活性成分分析的結果，B樣品中的多糖含量最高為34.80%；A樣品中黃酮和多酚含量均為最高，分別為11.59%和9.54%。本研究可為今后開發樺褐孔菌相關產品提供活性成分含量參考依據。