染色體核型、性激素、免疫性抗體檢測在女性生殖異常患者中的應用

郝潤英 李佳 袁茜 平慧

近年來，隨著環境污染、生活和工作壓力加大，女性生殖異常發生率呈逐年上升趨勢，對患者生活質量和家庭關系造成嚴重影響。研究顯示，染色體核型異常是導致女性生殖異常的重要因素，從而引起自然流產、胚胎停育、畸形胎等不良后果[1,2]。此外，相關資料表明，神經內分泌系統及免疫功能失調導致的性激素分泌紊亂及免疫性抗體產生與女性生殖異常密切相關[3,4]。本研究探討染色體核型、性激素及免疫性抗體在女性生殖異常患者中的檢測價值，旨在為臨床生殖異常患者的診斷、治療提供可靠依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年7月至2019年12月于我院就診的女性生殖異常患者423例作為觀察組，年齡20～43歲，平均年齡(31.91±4.98)歲；其中包括原發不孕248例，不良孕產史(自然流產、胚胎停育、畸形胎)175例。另選取同期進行健康體檢的正常女性150例作為對照組，年齡22～41歲，平均年齡(31.05±5.00)歲。2組一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 納入與排除標準

1.2.1 納入標準：①結婚>2年，配偶生育功能正常，未采取避孕措施≥1年未孕；②自然流產、死胎、畸形胎等不良孕產史者；③患者均知情同意。

1.2.2 排除標準：①重要臟器功能障礙者；②子宮肌瘤、子宮內膜異位癥、子宮切除患者；③免疫缺陷患者；④精神疾病患者。

1.3 檢測指標及方法

1.3.1 染色體核型分析：抽取患者外周靜脈血2 ml，肝素抗凝，取0.5 ml置于淋巴細胞培養基中37℃培養72 h。常規制片，G顯帶染色。采用染色體分析儀檢測染色體核型異常情況，每個患者至少分析5個核型，計數至少20個核型。存在嵌合體和異常核型者增加計數和分析。根據人類細胞遺傳學國際命名體制(International System for Human Cytogenetic Nomenclature,ISCN 2016)對染色體核型進行命名。

1.3.2 性激素：抽取患者空腹肘靜脈血5 ml，離心取上清，-80℃保存。采用化學發光法測定血清卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)的水平。

1.3.3 免疫性抗體：采用酶聯免疫吸附實驗(ELISA)測定血清抗子宮內膜抗體(EMAb)、抗精子抗體(AsAb)、抗卵巢抗體(AoAb)。

2 結果

2.1 2組患者染色體異常檢出率比較 對照組伴有染色體異常1例，檢出率為0.67%(1/150)，觀察組伴有染色體異常16例，檢出率為3.78%(16/423)，觀察組染色體異常檢出率顯著高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。觀察組根據病因分為原發不孕組248例和不良孕產史組175例，其中原發不孕組伴有染色體異常10例，檢出率為4.03%(10/248)，不良孕產史組伴有染色體異常6例，檢出率為3.43%(6/175)。見表1。

表1 2組患者染色體異常檢出率比較 例(%)

2.2 染色體異常核型分析 觀察組16例染色體異常患者中，包括染色體結構異常9例，其中相互易位4例，羅氏易位2例，倒位3例；染色體數量異常7例，其中數量增加2例，嵌合體4例，性反轉1例。見表2。

表2 染色體異常核型分析 n=16

2.3 不同病因生殖異常患者染色體核型分析 原發不孕組10例伴有染色體異常，其中染色體結構異常6例，染色體數量異常3例，性反轉1例，臨床表現均為原發不孕；不良孕產史組6例伴有染色體異常，其中染色體結構異常3例，染色體數量異常3例，臨床表現為自然流產、胚胎停育、畸形胎。見表3。

表3 不同病因生殖異常患者染色體核型分析 例

2.4 2組患者性激素水平比較 觀察組患者FSH、LH、P水平顯著高于對照組，E2水平顯著低于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 2組患者性激素水平比較

2.5 生殖異常患者中染色體正常、染色體異常者性激素水平比較 生殖異常患者中染色體異常者FSH、LH、P水平顯著高于染色體正常者，E2水平顯著低于染色體正常者(P<0.05)。見表5。

表5 生殖異常患者中染色體正常、染色體異常者性激素水平比較

2.6 2組患者免疫性抗體陽性率比較 觀察組EMAb、AsAb、AoAb陽性率顯著高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表6。

表6 2組免疫性抗體陽性率比較 例(%)

2.7 生殖異常患者中染色體正常、染色體異常者免疫性抗體陽性率比較 生殖異常患者中染色體異常者EMAb、AsAb、AoAb陽性率顯著高于染色體正常者，差異有統計學意義(P<0.05)。見表7。

表7 生殖異常患者中染色體正常、染色體異常者免疫性抗體陽性率比較 例(%)

3 討論

女性生殖異常是由遺傳因素、環境因素、解剖因素、免疫因素、內分泌因素等導致的臨床綜合征，對患者身心健康和家庭生活均造成嚴重影響。因此，探索女性生殖異常的可能影響因素對于疾病臨床診斷、治療具有重要意義。研究表明，染色體異常是導致女性不孕、自然流產、胚胎停育、畸形胎的重要原因[5,6]。因此，染色體核型分析是臨床篩查不孕不育的重要手段。本研究結果顯示，對照組伴有染色體異常1例，檢出率為0.67%(1/150)，觀察組伴有染色體異常16例，檢出率為3.78%(16/423)，觀察組染色體異常檢出率顯著高于對照組(P<0.05)，說明染色體異常是導致女性生殖異常的重要原因。

染色體異常分為結構異常和數量異常，其中結構異常較多見[7,8]。本研究中，觀察組16例染色體異常患者中，包括染色體結構異常9例和染色體數量異常及其嵌合體6例，提示女性生殖異常患者常伴有染色體結構異常和數量異常。染色體結構異常包括易位、倒位、缺失等類型，其中易位、倒位是女性生殖異常最常見的染色體異常類型，與自然流產、習慣性流產、不良生育等關系密切[9]。本研究結果顯示，觀察組16例染色體異常患者中，包括染色體結構異常9例，其中相互易位4例，羅氏易位2例，倒位3例。另外，原發不孕組染色體結構異常6例，臨床表現均為原發不孕；不良孕產史組染色體結構異常3例，臨床表現為自然流產、胚胎停育、畸形胎，提示染色體易位、倒位是造成原發不孕、不良孕產的高危因素。染色體數量異常包括整倍體和非整倍體數量異常，常導致胚胎停育、畸形胎等發生。本研究檢出16例染色體異常患者中，染色體數量異常及其嵌合體6例，其中45，X及其嵌合體為主要類型，患者以身材矮小、閉經、卵巢發育異常，內分泌失調為主要臨床特征。另外，原發不孕組染色體數量異常3例，臨床表現均為原發不孕；不良孕產史組染色體數量異常3例，臨床表現為自然流產、胚胎停育、畸形胎。

研究表明，內分泌紊亂是不孕不育的重要致病因素，對女性生殖產生重要影響[10,11]。生理情況下，育齡期女性黃體功能和卵子發育受下丘腦-垂體-性腺軸調控，若此通路任何環節出現問題，均造成性激素分泌紊亂及女性生殖異常。檢測性激素水平可作為判斷內分泌功能及臨床診斷不孕不育的可靠指標[12]。FSH、LH是垂體分泌的性激素，二者發揮協同作用，共同促進卵泡發育、成熟和排卵，并調控雌激素和孕激素分泌[13]。P、E2是卵巢分泌的類固醇激素，在維持妊娠及促進第二性征發育方面發揮重要作用[14]。另外，免疫功能失調與不孕不育關系密切，其中免疫性抗體產生是女性生殖異常的重要誘因[15,16]。EMAb是一種以子宮內膜為靶抗原的自身抗體，可影響胚胎著床及早期發育，從而造成不孕不育[17]。AsAb能夠與精子表面抗原結合，減弱精子活性，嚴重影響女性受孕能力[18]。AoAb是一種抗卵巢抗體，可誘發月經紊亂和卵巢早衰，影響卵泡發育、成熟和排卵[19]。本研究結果發現，觀察組FSH、LH、P水平及EMAb、AsAb、AoAb陽性率顯著高于對照組，E2水平顯著低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，且生殖異常患者中染色體異常者FSH、LH、P水平及EMAb、AsAb、AoAb陽性率顯著高于染色體正常者，E2水平顯著低于染色體正常者，差異有統計學意義(P<0.05)。說明女性生殖異常患者存在性激素分泌紊亂和免疫性抗體高表達，且染色體異常促進性激素分泌紊亂和免疫性抗體高表達。

綜上所述，女性生殖異常患者多伴有染色體核型、性激素及免疫性抗體異常，是造成女性不孕和不良孕產的重要原因。因此，聯合檢測染色體核型、性激素及免疫性抗體對于女性生殖異常患者臨床診斷和治療具有重要價值。