阿德呋啉對人工感染雞球蟲病的療效試驗

吳麗君，曾明華，江善祥，阮祥春，萬榮峰

(1.安徽農業大學動物科技學院，合肥 230036;2.南京農業大學，南京 210095)

雞球蟲病(Coccidiosis)是由艾美耳屬(Eimeria)的多種球蟲引起的嚴重危害家禽生長發育和造成嚴重環境污染的疾病［1］。其發病率為50% ～70%，死亡率20% ～80%［2］。據報道，全世界每年因球蟲病造成的經濟損失多達20億美元，抗球蟲藥的年消費為3億多美元［3-4］。目前，防治雞球蟲病的主要手段仍是用藥［5］，自從 Levine［6］發現磺胺類藥物具有抗球蟲作用以來，至今用于防治球蟲病的藥物有50余種。但前人的研究證明，球蟲幾乎對所有使用過的抗球蟲藥都有耐藥蟲株的出現，只是產生耐藥性所需的時間和耐藥性強弱不同而已［7-8］。球蟲耐藥性的產生導致抗球蟲藥物使用年限縮短，防治效果不佳，甚至失敗，引起臨床或亞臨床雞球蟲病，造成經濟損失。為解決耐藥性問題，常采用綜合防治措施，而開發新藥則是根本解決辦法。

本試驗在長期篩選的基礎上，研制出核苷類化合物阿德呋啉。該藥通過干擾球蟲的嘌呤代謝而發揮抗球蟲作用。抗球蟲活性主要集中在球蟲的無性生殖期，對卵囊的孢子化也有一定的抑制作用。它是一種新型廣譜抗球蟲藥物，與其他抗球蟲藥無交叉耐藥性，從而有效治療耐藥蟲株的感染。本試驗目的是評價這種新型抗球蟲藥對人工感染雞球蟲病的治療效果，探索其使用濃度，為臨床合理用藥提供依據。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 1日齡羅曼雄性雛雞購于合肥長豐雞場，出殼后即運至實驗室，飼喂不含任何藥物的飼料，自由飲水，無球蟲飼養至20日齡，經糞檢確認無球蟲卵囊后供試驗用。

1.2 試驗藥物 阿德呋啉，批號200909025，粉劑，含量75%，安徽農業大學藥理室與南京農業大學共同研制;磺胺喹噁啉，批號20100226，粉劑，含量≥95%，安徽華澳動物藥業有限公司提供。

1.3 方法

1.3.1 試驗分組 將19日齡健康雞稱重，剔除精神狀態不佳、生長發育不良、體重過大或過小的雞只，共120只，隨機分為6組，每組20只，各感染及給藥分組情況如表1所示。

表1 試驗分組及藥物添加情況

1.3.2 人工感染 供試卵囊:從肥西某雞場按常規方法采集混合卵囊，其中主要為柔嫩艾美耳球蟲、毒害艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲和布氏艾美耳球蟲，經孢子化后保存在本實驗室備用。給藥24 h后，除不感染不給藥組外，各組每只雞經口接種5萬個孢子化卵囊。

1.3.3 給藥方法 除陽性對照組和陰性對照組外，在接種卵囊前24 h，給各試驗組拌料混飼給藥，連續用藥7 d。

1.3.4 試驗期限及臨床觀察 試驗期為7 d，每日觀察雞的發病情況，記錄血便和死亡數等。人工感染后第7天，收集每組雞的糞便進行糞便卵囊計數;至第8天，將各組雞分別稱重并全部撲殺，觀察并記錄試驗雞的增重及盲腸和小腸病變情況。

1.3.5 藥效判定標準

1.3.5.1 相對增重率 試驗開始及結束時分別稱雞只體重，計算平均增重和相對增重率。以不感染不給藥組在試驗期間相對增重率為100%，計算其他各組的相對增重率，相對增重率×100即為相對增重率得分。

1.3.5.2 存活率 記錄各組死亡雞數，算出死亡率及存活率。

1.3.5.3 病變值 感染后第8天宰殺各組全部雞只，參照Johnson和Reid［4］設計的病變記分法，記錄每只雞的病變記分，將每組各雞的病變記分相加得病變值總分。腸道正常、無肉眼可見病變記0分，有少量散在病變記1分，較多稀疏病變記2分，有融合性大面積病變記3分，病變廣泛融合、腸壁增厚記4分。

1.3.5.4 卵囊值 根據卵囊比數計算卵囊值(表2)。卵囊比數(%)=(各試驗組卵囊數/感染不給藥組卵囊數)×100。

表2 卵囊值計算方法

1.3.5.5 抗球蟲指數(ACI)ACI=(存活率 +相對增重率)-(病變值+卵囊值)。ACI＜120，為無效;ACI在120～160范圍內，為低效;ACI在160～180之間，為中效;ACI＞180，為高效。

2 結果

2.1 臨床觀察 感染不給藥組雞感染卵囊后，逐漸出現采食減少、羽毛蓬亂、精神差、昏睡等反應，第5天起，有血便出現，第6～7天開始死亡。死亡雞經剖檢發現，盲腸腫大，有血水郁積，盲腸和小腸上有出血點;磺胺喹噁啉組及30 mg/kg阿德呋啉組的雞精神稍差，第5、6天出現少量血便，有少量雞只死亡;60 mg/kg阿德呋啉組、90 mg/kg阿德呋啉組、陰性對照組無臨床癥狀和死亡。

2.2 抗球蟲療效 試驗結果如表3所示。

表3 阿德呋啉對人工感染雞球蟲病的防治效果

從表3可以看出，各給藥組雞增重差異顯著較大。阿德呋啉90 mg/kg組相對增重率為83.2%，其結果經F檢驗，與不感染不給藥組差異不顯著(P＞0.05);阿德呋啉60 mg/kg組相對增重率與不感染不給藥組相比，差異顯著(P＜0.05);而其他各給藥組及陽性對照組的相對增重率與不感染不給藥組比較，均差異極顯著(P＜0.01)。從 ACI來看，阿德呋啉 90 mg/kg組為183.2，為高效抗球蟲藥。其余各給藥組ACI均小于120，無抗球蟲效果。

3 討論

本試驗采用雞球蟲野外分離株混合人工感染發病。其感染不給藥組，血便嚴重，卵囊值、病變值和死亡率較高，其他各給藥組均有不同程度的病理變化，但90 mg/kg阿德呋啉組除外，其中30 mg/kg阿德呋啉組有死亡。阿德呋啉是目前核苷類化合物中作為抗球蟲藥物的唯一品種［9］。它通過干擾球蟲的嘌呤代謝而發揮抗球蟲作用。其抗球蟲作用峰期為球蟲的無性生殖期，即在球蟲感染后1～3 d作用最強。同時它對球蟲卵囊形成階段也有效，可使卵囊的毒力降低，減少感染力。因此，適用于治療及預防各種雞球蟲病，阿德呋啉屬廣譜抗球蟲藥，對柔嫩艾美耳球蟲、堆型艾美耳球蟲、巨型艾美耳球蟲和毒害艾美耳球蟲都有效。本試驗采用混合蟲種感染，阿德呋啉90 mg/kg組獲得良好的治療效果，其抗球蟲指數ACI為183.2，屬高效抗球蟲藥;30、60 mg/kg組則效果不好，說明該藥在發揮治療作用時應使用較高濃度。從表3可見，阿德呋啉90 mg/kg組具有較好的平均增重率，其卵囊值和病變值為零，存活率為100%。而該藥的低濃度(30 mg/kg)組的存活率較低，與感染不給藥對照組差異不顯著(P＞0.05)。磺胺喹噁啉藥物對照組ACI僅為71.9，說明感染蟲株對該藥已產生耐藥性［10］。

綜合本次試驗結果，阿德呋啉可完全控制球蟲混合感染，有效對抗盲腸和小腸球蟲。該藥廣譜高效，抗球蟲機制獨特，與其他抗球蟲藥不產生交叉耐藥性，可用于耐藥蟲株的感染，是一種新型的抗球蟲劑。該藥首次進入臨床，在我國尚無生產，開發該藥有助于雞球蟲病的臨床治療，特別適用于換藥方案給藥。

［1］孔繁瑤.家畜寄生蟲學［M］.北京:中國農業大學出版社，1997:328-334.

［2］ 汪 明.獸醫寄生蟲學［M］.北京:中國農業出版社，2003:284-288.

［3］ 彼得L朗.球蟲生物學［M］.蔣金書，劉鐘靈，陸信武，等.譯.廣西:廣西科學技術出版社，1990:103-120.

［4］ 索 勛，李國清.雞球蟲病學［M］.北京:中國農業大學出版社，1998:238-268.

［5］Mcquistion T E，Mcdougald L R.Anticoccidial Activity of Halofuginone［J］.Veterinary Parasitology，1981，9:27-33.

［6］Levine P P.The Effect of Sulfanilamide on the Course of Expert Mental Avian Coccidiosis［J］.Comel1 Vet，1939，29:309-320.

［7］李云峰，曾振靈.抗球蟲藥研究進展(上)［J］.養禽與禽病防治，2001，(8):6-8.

［8］Chapman H D.Field Isolates of Eimeria Resistant to Sulfaquinoxalinum［J］.Veterinary Parasitology，1983，12:45-50.

［9］Chapman H D.Evaluation of the Efficacy of Anticoccidial Drugs against Eimeria Species in the Fowl［J］.International Journal for Parasitology，1998，28:1141-1144.

［10］ Chapman H D.Drug Resistance in Avian Coccidia(a Review)EJ3［J］.Vet Parasitol，1984，15:11-27.