分子印跡聚合物及其在藥物分離中的應(yīng)用研究進(jìn)展

賀倩倩，張高奎，賀利民

(華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院獸醫(yī)藥理研究室，廣州 510642)

采用生物技術(shù)制備的免疫親和萃取(immuno-affinity extraction，IAE)柱和分子印跡技術(shù)(molecular imprinting technique，MIT)制備的分子印跡固相萃取(molecularly imprinted solid-phase extraction，MISPE)柱均具有高度的選擇性和特異識(shí)別能力，是復(fù)雜生物樣品凈化，特別是藥物殘留分離、凈化和富集的理想選擇［1-2］。IAE技術(shù)是基于抗體-抗原(主體-客體)特異性作用原理，用于單一化合物或化合物族的選擇性萃取和富集，Delaunay等［3］對(duì)IAE在復(fù)雜樣品痕量組分分析和藥物殘留檢測(cè)的富集、凈化處理中的應(yīng)用進(jìn)行了很好總結(jié)。盡管IAE技術(shù)有高選擇性和強(qiáng)特異性識(shí)別能力，但抗體制備時(shí)間長(zhǎng)，費(fèi)用高，又因抗體是哺乳動(dòng)物對(duì)外來(lái)物應(yīng)答產(chǎn)生的一種蛋白質(zhì)——受檢測(cè)體系酸堿性、離子強(qiáng)度、溫度及有機(jī)溶劑等嚴(yán)重影響［4］，近20年來(lái)迅速發(fā)展的 MISPE技術(shù)可以有效解決IAE技術(shù)應(yīng)用中的這些不足。以分子印跡聚合物(molecularly imprinted polymers，MIP)為吸附劑的MISPE柱，不僅具有與IAE柱相似的專一識(shí)別能力和高選擇性;同時(shí)，因其為高分子合成材料，而且具有耐各種惡劣應(yīng)用環(huán)境的能力，克服了IAE柱的缺點(diǎn)(表1)。MIP俗稱“塑料抗體”，MISPE技術(shù)是化學(xué)改造的IAE技術(shù)，具有廣闊的應(yīng)用前景。

表1 分子印跡聚合物與生物抗體優(yōu)缺點(diǎn)

1 分子印跡技術(shù)的起源

分子印跡技術(shù)是合成對(duì)特定分子具有專一識(shí)別性能的聚合物技術(shù)。一直以來(lái)，普遍認(rèn)為MIT的出現(xiàn)主要是受人們對(duì)抗原-抗體、酶-底物、受體-配體等生物大分子專一識(shí)別的啟發(fā)而產(chǎn)生的，但MIT的起源是受生物大分子的專一識(shí)別和無(wú)機(jī)聚合物(硅膠)的選擇性吸附的共同啟發(fā)，更符合實(shí)際發(fā)展。生物大分子專一識(shí)別(抗體-抗原結(jié)合)機(jī)制的認(rèn)識(shí)經(jīng)歷了“肯定-否定 -再肯定 -再否定……”的不斷發(fā)展過(guò)程。從最初的“側(cè)鏈學(xué)說(shuō)”機(jī)制到20世紀(jì)30年代初被Breinl等提出的“模板學(xué)說(shuō)”否定［5］，隨后 Mudd［6］、Pauling［7］和 Burnet［8］等又對(duì)這一學(xué)說(shuō)相繼進(jìn)行了補(bǔ)充和完善，而到20世紀(jì)50年代中葉的“細(xì)胞選擇學(xué)說(shuō)”和后期的“克隆選擇學(xué)說(shuō)”又徹底否定了主宰免疫學(xué)分子識(shí)別機(jī)制20多年的“模板學(xué)說(shuō)”。

但“模板學(xué)說(shuō)”提出以抗原為模板來(lái)合成抗體的設(shè)想，并試圖用鎖-鑰理論來(lái)解釋免疫體系，大大啟發(fā)了廣大科研工作者。另一方面，當(dāng)免疫“模板學(xué)說(shuō)”尚在爭(zhēng)論中的時(shí)候，1931年，前蘇聯(lián)化學(xué)家Polyakov［9］在無(wú)機(jī)大分子(硅膠)對(duì)小分子選擇性識(shí)別方面已做了重要工作，他用各種有機(jī)溶劑添加劑(模板分子)與硅膠混合，發(fā)現(xiàn)硅膠干燥后再吸附該溶劑的能力與該有機(jī)溶劑的化學(xué)特性和結(jié)構(gòu)非常相關(guān)，這可以說(shuō)是現(xiàn)代分子印跡技術(shù)的雛型。1949年，“模板學(xué)說(shuō)”完善者 Pauling 的學(xué)生Dickey［10］將甲基橙等染料和水玻璃(硅酸鈉)混合，用冰乙酸處理制備硅凝膠，進(jìn)一步老化、洗滌、干燥后得到固體顆粒硅膠，用甲醇洗去硅膠中的染料分子，再評(píng)價(jià)該硅膠對(duì)甲基橙等染料的吸附能力。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，制備硅膠的吸附具有特異性，對(duì)不同染料(模板)的吸附能力有顯著差異，被認(rèn)為是首先提出“分子印跡”概念的人，但由于受到當(dāng)時(shí)人們認(rèn)識(shí)水平限制，對(duì)這一概念并沒(méi)有引起足夠的重視。直到1972 年，Wulff團(tuán)隊(duì)［11］和 Klotz研究小組［12］各自獨(dú)立制備了具有專一識(shí)別能力的共價(jià)型有機(jī)分子印跡聚合物——甲基橙-MIP和D-甘油酸-MIP以后，MIT才逐漸被人們所接受，每年發(fā)表的論文數(shù)量也逐漸增多。20世紀(jì)80年代后非共價(jià)型模板印跡聚合物的出現(xiàn)［13］，尤其是1993年Mosbach研究小組在Nature上發(fā)表具有開(kāi)拓性的關(guān)于制備非共價(jià)型茶堿-MIP的報(bào)道，使MIT的研究得到迅猛發(fā)展，每年發(fā)表的相關(guān)論文數(shù)量呈指數(shù)增加［14］。MIT之所以受到研究者如此關(guān)注，主要是因?yàn)樗鼘?duì)模板分子的識(shí)別具有構(gòu)效預(yù)定性、特異識(shí)別性和廣泛的實(shí)用性，使之在固相萃取［15-19］、色譜對(duì)映體分離［20-21］、人工抗體模擬［22］、生物化學(xué)傳感器［23］和選擇性催化劑［24］等方面得到廣泛應(yīng)用。

2 分子印跡技術(shù)的概念、原理和特征

分子印跡技術(shù)是指為獲得在空間結(jié)構(gòu)和結(jié)合位點(diǎn)上與某一分子(模板分子)完全匹配的聚合物的制備技術(shù)。目前，分子印跡過(guò)程的詳細(xì)機(jī)理還不明確，尚有待系統(tǒng)的深入研究。從本質(zhì)上來(lái)說(shuō)，MIP對(duì)分子的識(shí)別源于它與模板(印跡)分子之間在化學(xué)基團(tuán)以及三維空間結(jié)構(gòu)上的相互匹配，即MIP的選擇性與印跡分子和功能單體之間相互作用力的性質(zhì)、數(shù)量與強(qiáng)度以及印跡分子的結(jié)構(gòu)有關(guān)。Nicholls等［25］認(rèn)為，MIP復(fù)合物的形成過(guò)程以及MIP與印跡分子之間識(shí)別過(guò)程均受熱力學(xué)定律制約，功能單體和模板分子之間形成復(fù)合物的自由能變化可通過(guò)下式計(jì)算:

在上面方程式中△Gbind是形成復(fù)合物時(shí)Gibbs自由能的改變;△Gt+r是分子位移自由轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)損失的自由能;△Gr是分子內(nèi)旋被“凍結(jié)”時(shí)損失的自由能;△Gh是疏水性相互作用獲得的自由能;△Gvib是基團(tuán)振動(dòng)方式自由能;△Gp是偶極基團(tuán)相互作用總的自由能的貢獻(xiàn);△Gconf是由構(gòu)型變化引起的自由能改變;△Gvdw是由非范德華力相互作用損失的自由能。根據(jù)上式可以分析影響MIP形成和識(shí)別過(guò)程的諸因素，并進(jìn)而改善MIP的設(shè)計(jì)與制備，但分子印跡過(guò)程非常復(fù)雜，現(xiàn)在還很難定量估計(jì)某一因素對(duì)結(jié)合能的貢獻(xiàn)。盡管如此，實(shí)際中大量的MIP的制備都可以通過(guò)以下方法實(shí)現(xiàn):(1)首先將具有適當(dāng)功能基的功能單體與模板分子混合，形成單體-模板分子復(fù)合物;(2)選擇適當(dāng)?shù)慕宦?lián)劑將功能單體互相交聯(lián)起來(lái)形成網(wǎng)狀聚合物，從而使功能單體上的功能基在空間排列和空間定向上固定下來(lái);(3)通過(guò)一定的方法把模板分子脫去。結(jié)果在聚合物中留下一個(gè)與模板分子在空間結(jié)構(gòu)上完全匹配，并含有與模板分子專一結(jié)合的功能基的三維空穴(圖1)。此三維聚合物空穴可以選擇性地重新與模板分子結(jié)合，即對(duì)模板分子具有專一性識(shí)別作用。

圖1 分子印跡原理示意圖(摘自文獻(xiàn)［26］)

這個(gè)三維空穴的空間結(jié)構(gòu)由功能單體的種類、模板分子的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)所決定。由于用不同的模板分子制備的MIP具有不同的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)，所以一種MIP只能與一種分子結(jié)合，也就是說(shuō)MIP對(duì)該分子具有選擇性結(jié)合作用。由此可見(jiàn)，MIP具有的特點(diǎn)有預(yù)定性，即它可以根據(jù)不同的目的制備不同的MIP，以滿足各種不同的需要;識(shí)別性，即MIP是按照模板分子“量身定做”的，可專一地識(shí)別印跡分子;實(shí)用性，即它可以與天然的生物分子識(shí)別系統(tǒng)如酶與底物、抗原與抗體、受體與激素相比擬。但由于它是由化學(xué)合成方法制備的，因此又有天然分子識(shí)別系統(tǒng)所不具備的抗惡劣環(huán)境(高溫、高壓、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿和有機(jī)溶劑等)的能力，從而表現(xiàn)出高度的穩(wěn)定性和長(zhǎng)的使用壽命。

3 分子印跡聚合物制備方式和方法

3.1 分子印跡聚合物制備方式 根據(jù)印跡分子與功能單體間作用力的性質(zhì)，通常將MIP分為共價(jià)結(jié)合型(預(yù)組裝型)、非共價(jià)結(jié)合型(自組裝型)兩類。共價(jià)結(jié)合型MIP最早由Wulff［27］提出，聚合前印跡分子與功能單體反應(yīng)，形成硼酸酯、席夫堿、亞胺、縮醛等衍生物，再通過(guò)交聯(lián)劑聚合產(chǎn)生高分子聚合物，用水解等方法除去印跡分子即得到共價(jià)結(jié)合型MIP。目前已獲得針對(duì)一些糖類及其衍生物、氨基酸及其衍生物、扁桃酸、芳香酮、二醛類、鐵轉(zhuǎn)移蛋白、輔酶和甾類等化合物的MIP。共價(jià)結(jié)合型MIP的限制較大，并且共價(jià)作用較強(qiáng)，結(jié)合與解離速度緩慢，難以達(dá)到熱力學(xué)平衡，操作復(fù)雜。制備共價(jià)結(jié)合型MIP供選擇的功能單體較少，主要有4-乙烯苯硼酸、4-乙烯苯甲醛、4-乙烯苯胺、4-乙烯苯酚等，其中硼酸基團(tuán)與鄰二醇基團(tuán)形成的酯鍵效果較好，易于形成或斷裂，在糖類及其衍生物MIP的制備中有重要價(jià)值［28-29］。

Mosbach研究小組［14］首次制備了非共價(jià)結(jié)合型MIP。聚合前印跡分子通過(guò)分子間作用力(如氫鍵、偶極、靜電、電荷轉(zhuǎn)移、金屬配位、疏水作用等)，與功能單體形成超分子復(fù)合物，再進(jìn)一步聚合交聯(lián)和除去印跡分子，得到非共價(jià)結(jié)合型MIP。可供制備非共價(jià)型MIP的功能單體較多，以甲基丙烯酸(MAA)為代表的羧酸類單體最常用。MAA分子中的羧基能與許多官能團(tuán)發(fā)生較強(qiáng)的分子間作用，如與羥基、醚、羧基、酰胺、脲等形成氫鍵以及與氨基發(fā)生離子交換作用。其他較常用的單體主要有酸性的丙磺酸類、堿性的含氮雜環(huán)類(如乙烯基吡啶、乙烯基咪唑等)及中性的丙烯酰胺和羥乙基甲基丙烯酸酯等。實(shí)際中也可以將不同類型的功能單體混合使用，也取得了很好的效果［13，30-33］。

3.2 分子印跡聚合物制備方法 MIP最初的制備方法屬于本體聚合法(bulk polymerization)。該法制備的MIP對(duì)模板底物(印跡分子)具有良好的選擇和識(shí)別特性，而且合成操作條件易于控制，實(shí)驗(yàn)裝置簡(jiǎn)單，便于普及，迄今為止仍為MIP制備的主要方法。其中封管聚合是一種最為常用的方法，將印跡分子、功能單體、交聯(lián)劑按一定比例(通常摩爾比是1∶4∶20)溶解在溶劑(致孔劑)中，并加入適量的引發(fā)劑，移入反應(yīng)管中，采用超聲波脫氣、通氮?dú)獬酰谡婵障路夤芙?jīng)熱引發(fā)或紫外光照射引發(fā)，聚合得到塊狀聚合物。聚合物再經(jīng)粉碎、磨細(xì)、篩選等過(guò)程獲得合適大小的粒子，洗脫除去模板分子，干燥后備用，一般最終得到合格粒徑范圍的聚合物的產(chǎn)率較低。這種方法聚合過(guò)程簡(jiǎn)單，但后續(xù)工作繁瑣，研篩過(guò)程中產(chǎn)品有所損失，所得的顆粒形狀不規(guī)則，分散性較差，用作色譜固定相時(shí)其載流量和柱效率都不是很理想，在其他應(yīng)用方面也不便于使用。

Matsui等［34］首先將原位聚合法(in situ polymerization)引入MIP的制備中，在色譜柱內(nèi)直接合成MIP固定相，避免了封管聚合中研磨、過(guò)篩和沉降等環(huán)節(jié)，實(shí)驗(yàn)過(guò)程大大簡(jiǎn)化，方法具有直接、簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn)。但為了使原位聚合的色譜柱有良好的流動(dòng)性，制備時(shí)必須加入合適的致孔劑。聚合反應(yīng)程度的控制也非常重要，若聚合時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，合成的聚合物太致密，色譜柱的流動(dòng)性差，表現(xiàn)為柱壓高，流速低;聚合時(shí)間太短，合成的聚合物中選擇性結(jié)合位點(diǎn)少，色譜柱柱效低。黃曉冬等［35］采用原位聚合法直接在毛細(xì)管柱中合成了辛可寧-印跡聚合物，采用壓力輔助毛細(xì)管電色譜模式拆分了非對(duì)映異構(gòu)體辛可寧和辛可尼丁抗瘧藥物，柱效遠(yuǎn)高于其在高效液相色譜分離中的柱效。將分子印跡聚合物制成薄膜，則是另一類原位聚合方法，Mosbach研究小組最先合成以L-苯丙酰胺為模板分子的分子印跡聚合物膜［36］。

近年來(lái)，分子印跡聚合物微球的制備成為研究的熱點(diǎn)。球形分子印跡聚合物(spherical molecular imprinted polymer)的制備主要有三種方法:懸浮聚合(suspension polymerization)、沉淀聚合(precipitation polymerization)和多步溶脹聚合(multi-step swelling polymerization)。采用這幾種方法制備的MIP球形聚合物主要用作柱色譜和毛細(xì)管色譜固定相的填充材料以及免疫分析的吸附材料。瑞典的Mosbach研究小組最早制備了微球形的MIP［37］;日本的 Hosoya 等［38］、Yoshida 等［39］在這方面也做了卓有成效的工作，他們分別采用不同的方法成功制備了MIP微球，并將它們應(yīng)用于分離技術(shù)之中。但MIP微球的聚合操作較復(fù)雜，微球性能對(duì)聚合條件的依賴性較大，收率低等方面都有待深入研究。

多功能單體和組合功能單體的出現(xiàn)突破了傳統(tǒng)分子印跡制備技術(shù)中功能單體使用的單一性問(wèn)題，使功能單體源的選擇具有了多樣性。Araki等［40］在表面印跡中使用雙功能單體成功制備了氨基酸衍生物苯芐谷氨酸-MIP。Zheng等［41］采用丙烯酰胺和4-乙烯基吡啶組合功能單體制備出磺胺藥物-MIP，作為色譜固定相使用時(shí)，無(wú)論在水相還是有機(jī)相中，均表現(xiàn)出比單獨(dú)使用丙烯酰胺或4-乙烯基吡啶所制備的MIP更強(qiáng)的磺胺藥物親和識(shí)別性。

目前MIP的制備和使用大多只能在有機(jī)相中進(jìn)行，而實(shí)際樣品通常都富含水分，MIP的應(yīng)用受到很大限制。因此，開(kāi)展在水相或極性介質(zhì)中制備MIP的研究具有重大實(shí)際意義。近幾年出現(xiàn)了不少在水-醇體系合成MIP的報(bào)道［42-45］，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在水兼容性介質(zhì)中制備的MIP應(yīng)用于富水試樣中，目標(biāo)物的選擇性萃取獲得理想的效果。

將MIP制成具有生物活性的納米顆粒用于生物系統(tǒng)，顯示了其在藥理學(xué)、生物技術(shù)和制藥等方面的應(yīng)用前景，引起了研究者的高度興趣。Vaihinger等［46］采用微乳液聚合合成了印跡納米微球作為親和受體。

4 分子印跡聚合物在分離技術(shù)中的應(yīng)用

由于MIP獨(dú)特的性能，近年來(lái)在化合物的分離、凈化和富集中得到了廣泛的應(yīng)用，如在固相萃取、手性色譜、膜分離、生物傳感器及高效毛細(xì)血管電泳等分離技術(shù)中。

4.1 在固相萃取中的應(yīng)用 MIP具有從復(fù)雜樣品中高選擇性地吸附模板分子或與其結(jié)構(gòu)相近的某一族化合物的能力，克服了傳統(tǒng)SPE技術(shù)常常發(fā)生的共萃取現(xiàn)象，因此它非常適合用作固相萃取吸附劑來(lái)分離、富集復(fù)雜試樣中痕量的分析物，達(dá)到分離、純化的目的，從而降低檢測(cè)限，提高分析的精密度和準(zhǔn)確性。Sellergren［15］首次報(bào)道了將MIP用于固相萃取，他以Pentanamidie(PAM)為模板制備PAM-印跡聚合物，進(jìn)行固相萃取，取得了很好的效果。隨著對(duì)MIP研究的深入，MIP在SPE方面己經(jīng)廣泛應(yīng)用于選擇性固相萃取尿樣［47-49］、血液［50-53］、水 樣［42，54-55］、動(dòng) 物 組 織［18，56-57］、牛奶［58-60］、飼料［61-62］等基質(zhì)中的目標(biāo)分析物。

4.2 在色譜分析中的應(yīng)用 MIP在色譜中的應(yīng)用主要是作為色譜固定相用于手性藥物的分離拆分。早在1977年，Wulff等就報(bào)道了以α-D-甘露吡喃糖苷為模板制備的MIP作為HPLC固定相拆分其外消旋體，通過(guò)改變色譜操作條件，實(shí)現(xiàn)了外消旋體的完全拆分。目前手性藥物分離的主要方法是通過(guò)手性色譜柱進(jìn)行分離，而色譜中使用的手性固定相一般為帶有固載化的手性基團(tuán)，這些普通手性固定相雖然能將對(duì)映異構(gòu)體完全分開(kāi)，但難以預(yù)測(cè)其洗脫順序。與普通手性固定相相比，MIP具有高度預(yù)定的選擇性。以某一對(duì)對(duì)映體作模板分子制備的MIP，對(duì)此異構(gòu)體的保留時(shí)間最長(zhǎng)，最后被洗脫，因此以MIP作為手性固定相用于色譜拆分手性藥物，不僅可以完全分離一對(duì)異構(gòu)體，同時(shí)可預(yù)測(cè)手性藥物的洗脫順序，于是省去了測(cè)定洗脫物手性的過(guò)程。目前，MIP作為色譜固定相除已用于氨基酸及其衍生物、甾醇、β-阻斷劑、殺蟲(chóng)劑和糖及其衍生物的分離研究外，還用于茶堿、辛可寧、金雞納等生物堿的分離研究［21，63-66］。

4.3 在膜分離中的應(yīng)用 由于MIP所具有的剛性塊狀結(jié)構(gòu)，目前它主要的用途是作為色譜固定相和固相萃取吸附劑。MIP良好的操作穩(wěn)定性及識(shí)別性質(zhì)不受酸、堿、熱、有機(jī)溶劑等各種環(huán)境因素影響的特點(diǎn)，制備具有分子印跡功能的分子印跡薄膜將是功能分離材料研究領(lǐng)域中一個(gè)重要的發(fā)展方向［67］。但這方面的研究工作起步較晚，文獻(xiàn)報(bào)道也不多［68］。

Kobayashi等［69］采用相轉(zhuǎn)移方法，讓丙烯腈-丙烯酸共聚體在含有模板分子的溶液中固化制得的MIP薄膜，對(duì)茶堿等生物堿具有很高的立體選擇性。

4.4 在高效毛細(xì)管電泳中的應(yīng)用 高效毛細(xì)管電泳(HPCE)具有分辨率高、分離時(shí)間短、花費(fèi)低的優(yōu)點(diǎn)。把MIP與HPCE相結(jié)合，可克服高效液相色譜MIP柱柱效過(guò)低的缺點(diǎn)。Schweitz等［70］采用原位聚合法制備了MIP涂層毛細(xì)管，用于高效毛細(xì)管電泳分離異構(gòu)體，取得了很好的分離效果。

MIP除在以上幾種分離技術(shù)中得到廣泛應(yīng)用外，MIP作為吸附劑、離子交換樹(shù)脂的研究也引起了化學(xué)分析工作者的關(guān)注。孟子暉等［71］以沙林為模板分子，采用不同單體和交聯(lián)劑制備了一系列對(duì)沙林毒氣具有很強(qiáng)吸附能力的MIP。Castro等［72］用硫芴砜(DBTS)為模板分子合成的三種MIP，能從燃料中優(yōu)先吸附DBTS，從而達(dá)到分離純化的目的。

5 目前分子印跡技術(shù)尚存在的問(wèn)題

5.1 在基礎(chǔ)理論研究方面 分子印跡和識(shí)別的機(jī)理目前仍處于定性和半定量的水平，結(jié)合位點(diǎn)的作用機(jī)理、聚合物孔穴形態(tài)、形成結(jié)合位點(diǎn)的數(shù)量和傳質(zhì)機(jī)理仍有待進(jìn)一步研究。

5.2 在制備方式方法方面 目前可選擇和供使用的功能單體、交聯(lián)劑較少，本體聚合、原位聚合法在工藝和技術(shù)上有待進(jìn)一步完善和改進(jìn)，新型實(shí)用聚合方法亟待研究開(kāi)發(fā)，以滿足不斷發(fā)展的分子印跡識(shí)別要求。

5.3 在應(yīng)用領(lǐng)域方面 分子印跡技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域有待于進(jìn)一步拓寬。從目前的研究工作來(lái)看，MIT主要在小分子化合物分離、純化、富集方面取得較大進(jìn)展，已有商品化的分子印跡固相萃取小柱銷售，但在蛋白質(zhì)、多肽和酶等生物大分子甚至整個(gè)細(xì)胞的研究方面報(bào)道不多，效果也還不夠理想。MIT在氣體小分子方面的研究尚未見(jiàn)報(bào)道，隨著MIT研究的逐漸深入和應(yīng)用的日益廣泛，氣相中采用MIT高選擇性識(shí)別目標(biāo)分析物也將成為研究的重要方向之一。

6 展望

自從1972年Wulff團(tuán)隊(duì)和Klotz研究小組各自幾乎同時(shí)報(bào)道人工合成MIP以來(lái)，在短短近40年中，MIT得到了飛速的發(fā)展。MIP憑借其優(yōu)良的物理化學(xué)性能及對(duì)印跡分子的專一識(shí)別能力，在固相萃取、手性色譜分離、模擬生物抗體、仿生傳感器、催化及有機(jī)合成等方面得到了廣泛的應(yīng)用。MIT技術(shù)目前雖然尚存在許多問(wèn)題，但從技術(shù)上予以解決是可行的，如為解決“模板泄露”對(duì)低水平目標(biāo)物定量檢測(cè)的影響而產(chǎn)生了“虛擬模板”技術(shù)［73］;為了克服印跡過(guò)程中印跡分子洗脫困難、印跡效率低等問(wèn)題，Zimmerman等［74］創(chuàng)立了單分子印跡新技術(shù)。可以預(yù)言，隨著合成手段、現(xiàn)代分析檢測(cè)手段、生物技術(shù)和電子技術(shù)的迅猛發(fā)展，MIP的制備、表征和理論體系將日臻完善，其應(yīng)用范圍將更加廣泛。許多藥物小分子的MISPE柱已實(shí)現(xiàn)商業(yè)化，手性分離和手性藥物以及仿生傳感器即將步入商業(yè)化階段，不久的將來(lái)，MIT所取得成果將廣泛應(yīng)用于日常生活的方方面面，發(fā)揮其重要作用。

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