METTL3/miR-126調(diào)控TGF-β1/smad2對高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞增殖的影響*

張靜，張 潔，莫 穎，張 蕾，孫明慧

（新疆醫(yī)科大學(xué)第五附屬醫(yī)院腎病科，烏魯木齊 830000）

糖尿病腎臟?。╠iabetic kidney disease，DKD）是糖尿病患者最嚴(yán)重、最普遍的并發(fā)癥之一，可導(dǎo)致患者死亡，也是終末期腎病（ESRD）的主要促成因素[1]。DKD有多種形態(tài)改變，包括系膜細(xì)胞肥大和增殖、腎小管細(xì)胞上皮—間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelialmesenchymal transition，EMT）、足細(xì)胞凋亡等[2]，其中腎小管細(xì)胞EMT是引起腎功能損害最常見的原因[3]。DKD的易感因素包括遺傳、代謝機制紊亂、高血糖、胰島素抵抗、血流動力學(xué)改變、炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激等[4]。有研究表明，糖尿病患者存在“遺留效應(yīng)”，表觀遺傳因素在該效應(yīng)中起到重要作用[5-6]。

腺嘌呤第6位氮原子上發(fā)生的甲基化修飾（m6A）是真核生物mRNA中最常見的甲基化修飾[7]。類甲基化轉(zhuǎn)移酶3（methyltransferase-like 3，METTL3）是構(gòu)成m6A甲基轉(zhuǎn)移酶復(fù)合體的核心組分，負(fù)責(zé)催化RNA發(fā)生m6A修飾[8]。在2型糖尿病中，葡萄糖調(diào)節(jié)METTL3介導(dǎo)的m6A修飾，然而，METTL3在糖尿病相關(guān)疾病調(diào)控中的作用存在爭議[9]，METTL3與DKD發(fā)病機制之間的關(guān)系仍不清楚。METTL3還可以介導(dǎo)m6A修飾調(diào)控miRNA表達[10]。有研究表明，多種miRNA在DKD發(fā)病機制中發(fā)揮重要作用[11]。其中miR-126參與糖尿病的發(fā)生和發(fā)展，在DKD中的表達下調(diào)，但具體作用機制尚不清楚[12-13]。本研究旨在探討METTL3對高糖（HG）誘導(dǎo)的大鼠腎小管上皮細(xì)胞（NRK-52E）和大鼠腎小球系膜細(xì)胞（HBZY-1）增殖的影響及其作用機制，并闡明METTL3與miR-126的相互作用，為探索DKD新的治療靶點提供實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 細(xì)胞與培養(yǎng) 大鼠NRK-52E細(xì)胞和大鼠HBZY-1細(xì)胞均購自武漢Procell公司。將NRK-52E細(xì)胞和HBZY-1細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有10%胎牛血清（FBS）和1%青—鏈霉素DMEM培養(yǎng)基的離心管中，1 000 r/min離心10 min，收集細(xì)胞，用含10%FBS的完全培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞；……