酶聯免疫法和金標法檢測HIV 抗體的價值對比

郭志飛

獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)簡稱艾滋病,主要是因為HIV 對機體免疫系統進行攻擊而造成的?，F階段,艾滋病是臨床無法治愈的疾病,具有較高的死亡率,所以又被稱為世紀殺手。因為艾滋病具有較長的潛伏期,許多患者在感染艾滋病后依然是健康的,同時伴有輕微癥狀或者無癥狀,很可能導致HIV 傳染給其他人員,具有終生傳染性［1,2］。所以,如何在短時間內明確診斷為艾滋病,并將攜帶HIV 患者篩查出,是當前控制艾滋病傳播及發展的主要方法。現階段,主要利用HIV 抗體檢測方法診斷HIV 感染,而酶聯免疫法是以往常用的一種檢測方法,在醫學技術日益提高的背景下,金標法被廣泛應用于臨床中,以便更好的篩查HIV。因而,本次研究針對金標法與酶聯免疫法在HIV抗體檢測中的應用效果進行簡單闡述,具體如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本次研究選取本院2019 年1 月～2020 年5 月接收的120 例接受HIV 抗體檢測的患者,其中男64 例,女56 例；年齡最小18 歲,最大65 歲,平均年齡(33.65±10.45)歲；文化水平：小學23 例,初中28 例,高中31 例,大專及大專以上38 例。經醫院醫學倫理委員會批準。納入標準：自愿參與研究并簽署同意書；研究資料齊全、完整；具備正常溝通、表達、理解能力；具備良好的依從性。排除標準：合并血液系統疾病或者免疫系統疾病；存在心理障礙或者具有精神疾病史；合并惡性腫瘤；哺乳期或者妊娠期婦女。

1.2 方法 采集所有患者5 ml 的空腹血液標本,血液樣本檢測前,均未被污染,同時也無溶血現象。血液采集過程中,全面落實無菌操作原則。

1.2.1 金標法檢測 在25 μl 的血清中添加金標法試劑,然后添加一滴緩沖液,靜置20 min,通過肉眼觀察,如果試紙上存在2 條紅線,表示血液標本檢測為陽性；若是無2 條紅線,表示血液樣本檢測為陰性,準確記錄紅線產生時間。

1.2.2 酶聯免疫法檢測 應用酶聯免疫試劑及配套儀器,按照說明書進行操作,檢測過程中,應用酶標儀,對標準a 值進行檢測：參考波長為630 nm,檢測波長設置為450 nm,若a 值≥1,說明血液樣板檢測為陽性；若a 值＜1,說明血液樣本檢測為陰性。酶聯免疫檢測血液樣本期間,嚴格按照檢測儀器及說明書進行,同時讓相同的檢測人員檢測血液樣本。

不同檢測方法初次檢驗后明確診斷為陽性的血液樣本,需要二次檢測,進行確認試驗,將確認試驗檢測結果為陽性的血液樣本送至疾控中心展開免疫印跡檢測。

1.3 觀察指標 準確記錄酶聯免疫法與金標法檢測結果,并進行比較。

1.4 統計學方法 采用SPSS20.0 統計學軟件進行統計分析。計數資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P＜0.05 表示差異具有統計學意義。

2 結果

金標法血液樣本陽性率為9.17%,酶聯免疫法血液樣本陽性率為2.50%。金標法血液樣本陽性率高于酶聯免疫法,差異有統計學意義(χ2=4.855,P=0.028＜0.05)。以免疫印跡檢測結果為金標準,金標法檢測HIV 抗體的假陽性率為0.91%(1/110),酶聯免疫法檢測HIV 抗體的漏診率為70.00%(7/10)。見表1。

表1 不同檢測方法對HIV 抗體的檢測結果比較［n(%),n=120］

3 討論

艾滋病是由于HIV 感染而引起的病情相對嚴重的傳染疾病,具有盜汗、持續發熱等臨床癥狀,中青年人是主要患病人群,主要通過母嬰、性接觸及血液方式等傳播。艾滋病自身具有較大的危害性,是因為HIV 感染造成的。HIV 是一種可以對機體免疫系統造成攻擊的病毒,其主要負責攻擊免疫系統中相對重要的CD4 淋巴細胞,使得該細胞受損,機體免疫功能喪失［3］。所以,機體很容易感染各種各樣的疾病,同時也可能導致惡性腫瘤的發生,具有較高的死亡率。一般情況下,機體中HIV 潛伏期是8～9 年,HIV 潛伏階段,患者無任何癥狀,也不會對正常工作和生活造成影響［4］。所以需要及早檢測潛伏在機體的HIV,其直接影響著艾滋病的控制及傳播?，F階段,抗體檢測是診斷艾滋病常用方法,機體HIV 感染后,其會在短時間內出現抵抗性抗體及免疫反應,其能夠更好的控制寄生蟲、病毒和病原體的入侵等。

金標法是一種全新的體外診斷方法,其具有特異性高、靈敏性高等特點,該方法操作快捷、簡答,且具有較高的檢測準確率。通過特制的檢驗盒能夠快速取得檢測結果,詳細操作如下［5］：血液標本采集后,在試紙上滴注血液樣本,靜置20 min 后,仔細觀察試紙顏色是否發生改變,如果顏色改變,表示初步檢測為陽性。對于大部分患者和醫院均比較適用,該方法具有操作便捷、方便、檢測準確高等特點。酶聯免疫法是改良酶免疫測定原理的技術,其包括三種,分別是抗體競爭法、間接法與雙抗原夾心法。當前,雙抗原夾心法試劑是國外及國內常用的檢測方法,操作步驟如下［6］：在酶反應中添加底物,因為酶催化作用,導致底物轉變成有色產物,產物與標本中受檢物質的量存在緊密關聯。所以,需要根據顏色反應進行定量分析或者定性分析。由于酶催化具有較高頻率,所以能夠進一步放大反應效果,進而提高了檢測方法的敏感度。

本次研究主要在空腹狀態下采集5 ml 血液樣本,采集期間,全面落實無菌操作原則,指導患者分別實施酶聯免疫法與金標法檢測,研究結果顯示,金標法血液樣本陽性率為9.17%,酶聯免疫法血液樣本陽性率為2.50%。金標法血液樣本陽性率高于酶聯免疫法,差異有統計學意義(P＜0.05)。以免疫印跡檢測結果為金標準,金標法檢測HIV 抗體的假陽性率為0.91%(1/110),酶聯免疫法檢測HIV 抗體的漏診率為70.00%(7/10)。由此可見,金標法在HIV 抗體檢測中具有靈敏度高等特點,而且酶聯免疫法具有較高的特異度。不同血液中HIV抗體檢測方法,從檢測原理和操作兩個方面分析,存在一定差異,金標法不僅能夠快速反應,而且并不需要消耗大量時間和特殊設備,從容取得檢測結果。對于病情嚴重者,如果采用酶聯免疫法對血液進行檢測,很可能延誤病情,如果血液檢測時未確診,則會導致臨床醫師在未知狀態下展開手術,進而增加了艾滋病傳播風險［7］。所以,通過金標法能夠有效解決急診中遇到的該類狀況,協助醫師更好的診斷病情。但是酶聯免疫法在監測精準度方面較金標法高,且具有較低的誤差。盡管操作較為復雜,對于非緊急狀況較為適用。

金標法在血液HIV 抗體檢測中具有較高的靈敏度和特異度。兩種方法血液HIV 抗體檢測中具有重要作用,從檢測過程及檢測原理兩個方面來看,存在許多不同地方［8］。通常情況下,金標法能夠在短時間內完成檢測,而且檢測期間不應用特殊設備,檢測時間短,能夠在短時間內取得血液樣本檢測結果。針對病情嚴重者,若應用酶聯免疫法檢測,則會對疾病診斷時間造成影響,未取得血液檢測結果前,則會對臨床醫生的診治造成影響,進而提高了傳播風險［9］。而金標法可以彌補酶聯免疫法的不足,在短時間內了解患者病情。酶聯免疫法的檢測效果更加明顯,但是該方法操作繁瑣、復雜,導致使用范圍受到影響。

金標法具有操作簡單、方便、檢測速度快、敏感性高等特點,對于個人檢測和中小醫院更加適用。酶聯免疫法同樣具有良好的特異性及敏感性,但是其需要結合酶標儀等設備輔助,而且對專業人員的操作要求較高,且操作繁瑣,往往需要大量時間檢查,對于單份標本的檢測不適用。本次研究中,金標法與酶聯免疫法均具有良好的診斷效果,所以應加強對檢測方法的選擇,從而更好的判斷疾病,根據診斷結果予以患者相應的治療,從而促進患者治療效果和生活質量的提高,改善其身體狀況。

總而言之,HIV 抗體檢測過程中,酶聯免疫法與金標法均具有一定效果,臨床檢測過程中,需要根據患者實際狀況對檢測方法進行選擇,從而促進診斷準確率的提高,以便醫生根據檢測結果為患者提供針對性治療方法,改善患者身體狀況和生活質量。