血清整合素β1、纖維粘連蛋白和層粘連蛋白在子宮內(nèi)膜異位癥中的臨床價值

傅 萍

復(fù)旦大學附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院婦產(chǎn)科，上海 200090

子宮內(nèi)膜異位癥(EMT)是婦科的常見疾病，現(xiàn)發(fā)病機制仍不清楚，其中主要的學說為經(jīng)血逆流學說，認為子宮的內(nèi)膜細胞隨著經(jīng)血倒流到盆腔，并在盆腔種植、生長和蔓延，形成異位內(nèi)膜[1-2]。EMT形成過程中涉及內(nèi)膜與細胞基質(zhì)之間，細胞與細胞之間的相互關(guān)系，其中細胞外基質(zhì)在EMT形成過程中具有重要作用，其主要成分為糖蛋白、膠原和蛋白聚糖。纖維粘連蛋白(FN)和層粘連蛋白(LN)是細胞外基質(zhì)中的糖蛋白成分，能夠與相應(yīng)受體結(jié)合，與細胞分化、黏附和遷移具有密切聯(lián)系[3]，雖然EMT是良性疾病，但也有類似惡性腫瘤的生物學特性。整合素β1(ITGb1)是黏合素超家族成員，介導(dǎo)細胞與細胞外基質(zhì)的黏附及白細胞與內(nèi)皮細胞的黏附，在EMT的發(fā)生發(fā)展過程中具有重要作用[4]。本研究通過聯(lián)合檢測EMT患者血清ITGb1、FN和LN水平，觀察其在EMT發(fā)生發(fā)展中的作用。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2019年1月至2020年12月在本院就診的EMT患者96例為EMT組。年齡22～45歲，平均(35.46±7.67)歲；體質(zhì)量指數(shù)(BMI)為(22.81±2.83)kg/m2；美國生殖醫(yī)學協(xié)會子宮內(nèi)膜異位癥(r-AFS)分期：Ⅰ期24例，Ⅱ期27例，Ⅲ期31 例，Ⅳ期14例。根據(jù)痛經(jīng)評分標準將患者分為輕度(<8分，31例)、中度(8～13.5分，36例)和重度(>13.5分，29例)；病理結(jié)果：結(jié)節(jié)內(nèi)具有新鮮血液為活動型(66例)，無新鮮血液為非活動型(30例)。納入標準：所有患者均經(jīng)手術(shù)確診為EMT；自愿參與，依從性良好。排除標準：子宮腺肌病；血液系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)疾病；內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病；6個月內(nèi)接受過激素藥物治療；妊娠期和哺乳期女性。選擇同期體檢健康者52例為對照組，年齡23～45歲，平均(35.78±8.67)歲，BMI為(22.72±1.96)kg/m2。兩組年齡、BMI等基線資料比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。所有研究對象均簽署知情同意書，本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核通過。

1.2方法

1.2.1痛經(jīng)評分標準 經(jīng)前小腹疼痛基礎(chǔ)分為5分，腹痛明顯為0.5分，腹痛難忍為1分，疼痛坐立不安為1分，出現(xiàn)休克為2分，面色蒼白為0.5分，四肢發(fā)冷1分，冷汗淋漓1分，疼痛需要臥床休息1分，影響工作和學習1分，一般止痛措施不能緩解為1分，用一般止痛措施能緩解為0.5分，伴隨腰部酸痛、肛門墜脹和惡心嘔吐分別賦值0.5分；疼痛1 d以內(nèi)為0.5分，每增加1 d加5分。

1.2.2血清標本留取及檢測 患者入院后抽取肘靜脈血約5 mL，在室溫下靜置約20 min，然后以3 000 r/min離心10 min，離心半徑為15 cm，去上清液約3 mL，放置于-80 ℃的冰箱中待測。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清ITGb1、FN和LN水平，所有試劑盒采用R&D公司產(chǎn)品，嚴格按照試劑盒說明書操作。

1.2.3觀察指標 (1)比較兩組血清ITGb1、FN和LN水平；(2)血清ITGb1、FN和LN對EMT的診斷效能；(3)血清ITGb1、FN和LN水平與痛經(jīng)嚴重程度、EMT分期和分型的關(guān)系。

2 結(jié) 果

2.1兩組血清ITGb1、FN和LN水平比較 EMT組血清ITGb1、FN和LN水平明顯高于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組血清ITGb1、FN和LN水平比較

2.2血清ITGb1、FN和LN對EMT的診斷效能 血清ITGb1、FN和LN對EMT均具有較好的診斷效能，3項聯(lián)合檢測的靈敏度為97.9%，特異度為86.5%，曲線下面積(AUC)為0.973，高于ITGb1(Z=3.847，P<0.05)、FN(Z=5.196，P<0.05)和LN(Z=4.268，P<0.05)單項檢測。見表2、圖1。

表2 血清ITGb1、FN和LN對EMT的診斷效能

圖1 血清TGb1、FN和LN診斷EMT的ROC曲線

2.3血清ITGb1、FN和LN水平與EMT分期的關(guān)系 EMT患者血清ITGb1、FN和LN水平隨著r-AFS分期的升高而升高(P<0.05)。見表3。

表3 血清ITGb1、FN和LN水平與EMT分期的關(guān)系

2.4血清ITGb1、FN和LN水平與痛經(jīng)嚴重程度的關(guān)系 血清ITGb1、FN和LN水平隨著痛經(jīng)嚴重程度的升高而出現(xiàn)明顯升高(P<0.05)。見表4。

表4 血清ITGb1、FN和LN水平與痛經(jīng)嚴重程度的關(guān)系

2.5血清ITGb1、FN和LN水平與EMT分型的關(guān)系 EMT活動型患者血清ITGb1、FN和LN水平高于非活動型患者(P<0.05)。見表5。

表5 血清ITGb1、FN和LN水平與EMT分型的關(guān)系

3 討 論

整合素是一種黏附分子受體，廣泛分布于細胞表面，具有多種生物學功能，主要參與細胞與細胞，細胞和細胞外基質(zhì)(FN、LN和膠原蛋白等)之間的信號傳遞和黏附，與炎性反應(yīng)和血管生成具有重要聯(lián)系，對細胞增殖、遷移和分化等具有重要作用[5]。現(xiàn)有研究表明，整合素在EMT形成過程中具有重要的作用，而整合素表達失調(diào)可能是導(dǎo)致EMT形成的重要原因[6]。本研究發(fā)現(xiàn)EMT患者血清ITGb1水平明顯高于對照組，且血清ITGb1水平隨著EMT分期和痛經(jīng)評分升高而出現(xiàn)明顯升高，活動型EMT患者血清ITGb1水平明顯高于非活動型患者，說明ITGb1在EMT發(fā)生發(fā)展過程中具有重要作用，能夠反映EMT疾病和疼痛的嚴重程度，血清ITGb1水平越高，提示EMT越可能為活動型。關(guān)于ITGb1的研究主要集中于癌癥，血清ITGb1水平與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展具有密切聯(lián)系，并且血清ITGb1水平與子宮內(nèi)膜癌的惡性程度、轉(zhuǎn)移和預(yù)后具有密切的聯(lián)系[7]，在一項有關(guān)宮頸癌的研究中發(fā)現(xiàn)，沉默ITGb1基因的表達能夠明顯抑制癌癥細胞的增殖和遷移[8]。EMT具有類似腫瘤的特性，如侵襲和種植，但很少會發(fā)生惡變，本研究進一步證實血清ITGb1水平能夠反映EMT的生物學特性和疾病的嚴重程度，與既往文獻報道一致[9]。本研究結(jié)果顯示，血清ITGb1>3.62 μg/mL時，其診斷EMT的靈敏度為74.0%，特異度為88.5%，AUC為0.877，說明血清ITGb1水平對EMT具有較好的診斷效能。

本研究結(jié)果顯示，EMT患者血清FN水平明顯高于對照組，并且隨著EMT分期和痛經(jīng)評分的升高而升高，活動型EMT患者明顯高于非活動型患者，說明FN參與了EMT的發(fā)生發(fā)展，是反映EMT嚴重程度的指標，F(xiàn)N可能參與了EMT的粘連形成過程，并且影響子宮內(nèi)膜的植入和生長。FN是細胞外基質(zhì)的重要細胞黏附分子，不僅在維持組織形態(tài)方面具有重要作用，而且在調(diào)控黏附、生長、分化和促進細胞的增殖和遷移方面具有重要作用，在阻斷FN表達后，膠原纖維形成受阻[10]。FN是細胞外基質(zhì)的主要成分，在細胞生長中具有重要作用，在惡性腫瘤晚期階段，F(xiàn)N表達水平出現(xiàn)明顯升高，有利于腫瘤細胞侵襲周圍組織，導(dǎo)致腫瘤進一步發(fā)展，F(xiàn)N被認為可作為腫瘤早期轉(zhuǎn)移的指標[11-13]。FN引起EMT發(fā)生增殖和侵襲的機制可能為：FN與特異性受體整合素結(jié)合后，對細胞的黏附起到定向移動作用，促進內(nèi)膜細胞向降解后的基質(zhì)區(qū)發(fā)生浸潤，有利于內(nèi)膜細胞的侵襲和增殖[14]。本研究發(fā)現(xiàn)血清FN水平>128.64 μg/mL時，其診斷EMT的靈敏度為62.5%，特異度為86.5%，AUC為0.813，說明血清FN對EMT具有較好的診斷效能。

本研究結(jié)果顯示，EMT患者血清LN水平明顯高于對照組，并且隨著EMT分期和痛經(jīng)評分升高而升高，并且發(fā)現(xiàn)活動型EMT患者血清LN水平明顯高于非活動型，說明LN與EMT的發(fā)生發(fā)展具有密切聯(lián)系，血清LN水平與EMT嚴重程度相關(guān)。現(xiàn)已知LN是一種存在于基底膜的大分子非膠原性糖蛋白，與整合素結(jié)合后可發(fā)揮多種生理功能[15]。LN最早是作為惡性腫瘤預(yù)后評估的重要指標，在一項研究中發(fā)現(xiàn)腫瘤患者LN水平明顯高于健康對照組，LN水平隨著腫瘤浸潤程度的升高而升高，并且發(fā)現(xiàn)其水平與惡性腫瘤的預(yù)后具有明顯相關(guān)性，LN水平越高，其生存期越短[16-18]。在一項對子宮腺肌病患者的研究中發(fā)現(xiàn)，LN水平與子宮腺肌病的病灶增大有密切相關(guān)性，其會影響子宮腺肌病的發(fā)展[19]。有研究顯示，EMT患者無論腹腔液還是血液中的LN水平均高于對照組，并且隨著疾病嚴重程度的升高而升高[20]。本研究發(fā)現(xiàn)血清LN>93.90 ng/mL時，其診斷EMT的靈敏度為89.6%，特異度為69.2%，AUC為0.858，說明LN對EMT具有較好的診斷效能。

本研究結(jié)果顯示，血清ITGb1、FN和LN聯(lián)合診斷EMT的靈敏度高達97.9%，特異度為86.5%，AUC為0.973，明顯高于各項單獨檢測，說明3項指標具有某種內(nèi)在聯(lián)系和互補性。現(xiàn)已知FN和LN是細胞外基質(zhì)的主要成分，廣泛分布于基底膜透明層，與膠原蛋白結(jié)合形成基底膜的骨架，在基底膜的形成過程中具有重要作用，與ITGb1結(jié)合后，對基質(zhì)進行破壞，導(dǎo)致EMT的發(fā)生發(fā)展[21]。故ITGb1、FN和LN在EMT發(fā)生過程中具有不同的作用，聯(lián)合檢測有助于提高其對EMT的診斷效能。

綜上所述，血清ITGb1、FN和LN水平能夠反映EMT的嚴重程度，3項聯(lián)合檢測對EMT具有較好的診斷效能。