電化學發光法和液相色譜-串聯質譜法檢測25-羥基維生素D評價分析

李沙

【摘要】目的：對電化學發光法和液相色譜-串聯質譜法檢測25-羥基維生素D進行評價分析。方法：收集200份血清樣本，分別進行液相色譜-串聯質譜法檢測和電化學發光法檢測，評價相關性及一致性。結果：兩種方法檢測25-羥基維生素D總濃度無明顯差異性，P>0.05。相關性及一致性好。結論：電化學發光法和液相色譜-串聯質譜法在25-羥基維生素D檢測中的相關性及一致性好。

關鍵詞：電化學發光法;液相色譜-串聯質譜法;25-羥基維生素D

【Abstract】Objective： To evaluate and analyze the detection of 25-hydroxyvitamin D by electrochemiluminescence and liquid chromatography-tandem mass spectrometry.Methods： 200 serum samples were collected and detected by liquid chromatography-tandem mass spectrometry and electrochemiluminescence respectively.Correlation and consistency were assessed. Results： There was no significant difference in the total concentration of 25-hydroxyvitamin D detected by the two methods， P>0.05. Good correlation and consistency. Conclusion： Electrochemiluminescence and liquid chromatography-tandem mass spectrometry have good correlation and consistency in the detection of 25-hydroxyvitamin D.

Key words： electrochemiluminescence; liquid chromatography-tandem mass spectrometry; 25-hydroxyvitamin D

維生素D是人體健康發展所必須的重要營養元素，維生素D補充情況將會對人體正常的磷和鈣代謝產生影響，密切聯系人體健康，所以，維生素D水平測量結果的準確對預防和治療多種代謝相關疾病具有積極意義。在人體血液中，維生素D主要是以25-羥基維生素D的形式運輸，這也是評價人體內部維生素D營養情況的有效標準。電化學發光法和液相色譜-串聯質譜法等可對25-羥基維生素D濃度進行檢驗，同時基于測定結果評價人體內維生素D情況。

1.材料和方法

1.1一般材料

收集200份樣本進行試驗，并且按照試驗需求均進行液相色譜-串聯質譜法檢測和電化學發光法檢測。

1.2實驗方法

電化學發光法采用電化學發光全自動免疫分析儀及相關配套試劑盒進行，樣品檢測操作流程按照試劑盒說明標準進行。液相色譜-串聯質譜法設置色譜柱c18柱，流動相A相為0.1%甲酸水溶液，B相為流速0.3ml/min甲醇，進樣體積為1.5μL，柱溫為35℃進行梯度洗脫。質譜條件采用電噴霧電離，正離子模式 （ESI+）進行多反應監測。

1.3統計學處理

采用SPSS24.0進行數據統計，計量資料t檢驗，P<0.05存在統計學意義。Kappa分析比較兩種方法一致性。

2.結果

用兩種方法分別檢測200份血清樣本中25-羥基維生素D水平。結果顯示，電化學發光法檢測后25-羥基維生素D總濃度分布范圍為9.11～115.25nmol/L，平均（42.04±10.22）nmol/L;液相色譜-串聯質譜法檢測后25-羥基維生素D總濃度分布范圍為9.24～113.76nmol/L，平均（42.55±10.24）nmol/L。兩組比較，t=1.320，P>0.05。Spearman相關系數r=0.811（95% CI：0.753～0.844），ICC=0.761（95% CI：0.712～0.805）。

3.討論

維生素D在人體內可轉變成為25-羥基維生素D，在人體全血或者血清之中，25-羥基維生素D的含量可充分的將人體維生素D的營養情況作出充分反應。目前25-羥基維生素D常見檢測方法有酶聯免疫法、電化學發光法、放射免疫法以及液相色譜-串聯質譜法等。液相色譜-串聯質譜法（LC-MS/MS）處理樣品之后選擇應用液相色譜實現分離，使用串聯質譜儀設備作為檢測儀器，在經過多種反應檢測掃描模式處理后，對碎片離子和分子離子展開兩次質量選擇，同時凸顯出其對25-羥基維生素D檢測的靈活性、準確性和特異性。液相色譜-串聯質譜法為目前最廣泛的定量測定方法，亦被視為金標準。

本次研究將液相色譜-串聯質譜法檢測和電化學發光法檢測同步用于25-羥基維生素D檢測，以評價兩者一致性。結果顯示，兩種方法檢測25-羥基維生素D總濃度無明顯差異性，P>0.05。相關性及一致性好。

綜上所述，電化學發光法和液相色譜-串聯質譜法在25-羥基維生素D檢測中的相關性及一致性好。

參考文獻

[1]李新才，林玉梅，曹春芳，等.羅氏cobas e601電化學發光免疫分析儀和索靈LIAISON XL化學發光免疫分析儀25-羥基維生素D檢測結果比對分析[J].基層醫學論壇，2021，25（31）：4559-4561.

[2]龔美亮，王科宇，陳瑞，等.一種免疫分析系統與液相色譜-串聯質譜檢測25-羥維生素D的一致性評價[J].中華檢驗醫學雜志，2021，44（07）：621-626.

[3]李思燃，付志成，張惠迪，等.液相色譜-串聯質譜法和酶聯免疫法檢測人血清中25-羥基維生素D的一致性評價[J].衛生研究，2020，49（03）：447-452+457.

1761500783352