淺談氣相色譜法檢測果蔬中農(nóng)藥殘留能力驗(yàn)證操作技巧及關(guān)鍵

俞 曉

烏魯木齊市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測中心，烏魯木齊 830002

氣相色譜法是測定果蔬中農(nóng)藥殘留量常用的、成熟的檢測方法，目前在我國地市級、尤其是縣級農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測機(jī)構(gòu)中廣泛應(yīng)用。以NY/T761-2008（第一和第二部分）檢測標(biāo)準(zhǔn)為例,淺析如何將能力驗(yàn)證盲樣考核工作順利完成，更好的服務(wù)蔬菜水果中農(nóng)藥殘留量測定、質(zhì)量管理和技術(shù)管理工作。

1 選定能力驗(yàn)證考核的操作人員

1.1 進(jìn)行能力驗(yàn)證時，人員是最重要的要素

一般分為操作人員和監(jiān)督人員。操作人員對氣相色譜法測定果蔬中有機(jī)磷、有機(jī)氯及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的方法十分熟練，并且進(jìn)行過內(nèi)部盲樣測試練兵，制定能力驗(yàn)證考核的實(shí)施方案，需確定操作具體人員，通過內(nèi)部盲樣測試訓(xùn)練后，則認(rèn)為其具有能力通過能力驗(yàn)證的測試考核。

1.2 監(jiān)督人員

多次參加并通過國家和省級能力驗(yàn)證考核的熟練人員，對整個驗(yàn)證過程有偏離的細(xì)節(jié)進(jìn)行監(jiān)督。

2 能力驗(yàn)證前首要是儀器設(shè)備維護(hù)

2.1 對氣相色譜儀進(jìn)行全方位的維護(hù)保養(yǎng)

更換進(jìn)樣隔墊、高惰性玻璃襯管、清洗進(jìn)樣針；老化色譜柱或換新色譜柱，盡量用新的或老化過的干凈色譜柱。更換新的進(jìn)樣隔墊，以防止出現(xiàn)平行樣品不平行等干擾檢測結(jié)果的可能性；用高惰性襯管，將基質(zhì)效應(yīng)對檢測數(shù)據(jù)的影響降至最低。

2.2 調(diào)試儀器、設(shè)備到最佳運(yùn)行狀態(tài)

能力驗(yàn)證前，將氣相色譜儀的色譜條件調(diào)試好，如進(jìn)樣口、檢測器、色譜柱溫度等條件，用最優(yōu)化的程序升溫條件；檢查空氣發(fā)生器、氮?dú)獍l(fā)生器、氫氣發(fā)生器等設(shè)備保持最佳工作狀態(tài)；將所用的刻度吸管、容量瓶進(jìn)行校正，對所用到的玻璃器皿進(jìn)行清洗、烘干。

2.3 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)由農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測試中心（天津）提供濃度為1000μg/mL，在考核的盲樣到實(shí)驗(yàn)室前，將農(nóng)藥標(biāo)液配制成10μg/mL儲備液，再配制成一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液，上機(jī)建立標(biāo)液圖譜。

3 制備與能力驗(yàn)證考核樣相同基質(zhì)的樣品

一般考核部門通知本次能力驗(yàn)證采用的蔬菜、水果的樣品基質(zhì)和空白樣品制備篩選。若考核部門不提供考核空白樣品（對照樣品），可自行篩選出空白樣品，以便用空白樣品做加標(biāo)回收質(zhì)控。

4 考核樣品的領(lǐng)取或接收

收到或領(lǐng)取的能力驗(yàn)證考核盲樣，一般提供2組考核盲樣，1組蔬菜盲樣、1組水果盲樣。其中1組蔬菜考核盲樣4份，即1份蔬菜空白樣品（對照樣品），3份蔬菜平行考核盲樣。1份水果空白樣品（對照樣品），3份水果平行考核盲樣。

5 能力驗(yàn)證盲樣處理的方法步驟及技巧

先從保溫箱中各取出1份蔬菜和1份水果空白樣品（對照樣品），考核部門提供空白樣品量不足，可用自行篩選的空白樣品；各1份蔬菜和水果考核盲樣，解凍后，按照NY/T761-2008檢測方法標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行前處理提取、濃縮、凈化操作。

5.1 考核盲樣定性，初步定量

解凍，稱樣前用稱樣勺充分?jǐn)嚢杌靹颉Ｈ舭l(fā)放的考核盲樣作業(yè)指導(dǎo)書中指出可按農(nóng)殘檢測方法從提供的盲樣中稱樣，可按照NY/T761-2008檢測方法，稱取25.0g的空白樣品和25.0g考核盲樣。

若發(fā)放的考核盲樣作業(yè)指導(dǎo)書中指出不可分取稱盲樣，只稱取25.0g空白樣品，考核盲樣直接按照考核部門提供的作業(yè)指導(dǎo)書中操作即可。

稱取25.0g空白樣品，取1份平行考核樣品，直接轉(zhuǎn)移倒入燒杯中，用量筒準(zhǔn)確量取50.0mL乙腈（加乙腈量要準(zhǔn)確）分多次洗空白樣和盲樣離心管，按照NY/T761-2008檢測方法操作，提取、過濾、靜置30min后，用10.0mL移液管吸取10.0mL乙腈層時，要準(zhǔn)確。

均質(zhì)、振蕩速度、力度、時間把控統(tǒng)一，旋蒸或氮吹至近干，要點(diǎn)是氮吹或旋蒸近干，若還剩一滴，取下，用氮?dú)饬骶従彺蹈桑恍D(zhuǎn)蒸發(fā)溫度在40℃，水浴氮吹溫度在50℃，溫度不要過高，不可吹過干[2]。

有機(jī)氯及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留過弗羅里矽柱，要點(diǎn)是過柱不能干，要依據(jù)方法依次淋洗小柱，否則易造成農(nóng)藥吸附，導(dǎo)致回收率偏低。流速要勻速，不可用外力強(qiáng)壓下去，外力強(qiáng)壓不能保證力量都均勻，會造成平行樣品不平行的結(jié)果。定容5.0mL時，要準(zhǔn)確，渦旋混勻時不要濺灑出來[4]。

上機(jī)測試完成后定性。用標(biāo)液圖譜模板做對比，確定盲樣的添加農(nóng)藥名稱。初步確定添加農(nóng)藥的量。即技術(shù)骨干參與數(shù)據(jù)分析，確定盲樣中檢出的農(nóng)藥參數(shù)及初步的含量。

基質(zhì)配標(biāo)液。單點(diǎn)校正，空白樣前處理結(jié)束時以5.0mL溶劑定容，移入2mL進(jìn)樣瓶中后，剩余3mL液體，要用它匹配標(biāo)液，就是配基質(zhì)標(biāo)液。結(jié)果計(jì)算時，用帶基質(zhì)的做標(biāo)液，來計(jì)算盲樣中的農(nóng)藥含量。

5.2 考核盲樣準(zhǔn)確定量

加標(biāo)回收試驗(yàn)時，與剩2份盲樣同時做加標(biāo)及回收率的測定。定盲樣中檢出的農(nóng)藥參數(shù)后，從冰箱中取出剩余2份平行考核盲樣，同時再稱取與考核盲樣相同基質(zhì)的空白樣品25.0g，作為加標(biāo)質(zhì)控樣，添加與初定量濃度大致相同或非常接近含量的農(nóng)藥參數(shù)，有機(jī)磷與有機(jī)氯菊酯類同時加標(biāo)，一次前處理就完成。按照上述初定量的前處理步驟和方法進(jìn)行操作，至上機(jī)測定。

基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液配制。取1mL空白基質(zhì)溶液氮?dú)獯蹈桑尤?mL相應(yīng)質(zhì)量濃度(與添加濃度一致)的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液復(fù)溶,過有機(jī)微孔濾膜（0.22μm）。基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。

計(jì)算回收率。計(jì)算這個空白樣品加標(biāo)的回收率，若回收率在70%～120%之間，可確定結(jié)果。

計(jì)算盲樣結(jié)果，再次數(shù)據(jù)分析，用基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液定量，數(shù)據(jù)校正，確定檢測數(shù)據(jù)結(jié)果，填寫原始記錄及能力驗(yàn)證結(jié)果單，注意數(shù)字修約；上報(bào)原始記錄、譜圖及結(jié)果。

6 數(shù)據(jù)分析中出現(xiàn)問題及措施探討

空白樣品里檢出有農(nóng)殘。空白樣品與考核的平行盲樣中農(nóng)殘含量一樣或空白樣品與考核的平行盲樣中農(nóng)殘含量不一樣，都對定性造成一定的干擾和影響，通常情況下，考核部門對盲樣做過均勻性、穩(wěn)定性測試，空白樣品里已有的農(nóng)殘不會再添加。

平行樣品不平行，前處理過程，積分錯誤或不合理造成。不能完全依賴儀器軟件自動積分，積分錯誤可手動積分。

加標(biāo)回收率低或過高。加標(biāo)回收率低前處理過程有損失，加強(qiáng)日常練習(xí)，所有農(nóng)藥標(biāo)液都進(jìn)行加標(biāo)回收練習(xí)，找出出現(xiàn)問題的環(huán)節(jié)；加標(biāo)回收率高，基質(zhì)效應(yīng)的影響，使用新的高惰性襯管、基質(zhì)標(biāo)液定量等措施[5]。

標(biāo)準(zhǔn)曲線制作。先進(jìn)行單點(diǎn)校正，估算盲樣濃度；在線性范圍內(nèi)，制作標(biāo)線濃度點(diǎn)要落在標(biāo)曲的中間，最好與標(biāo)線的某個點(diǎn)相近或重合。

基質(zhì)配標(biāo)液，即用考核樣中空白基質(zhì)來配制標(biāo)液；考核樣中空白樣品用來做加標(biāo)回收；用加標(biāo)回收率來驗(yàn)證盲樣結(jié)果[6]。