邯鄲地區(qū)某牛場球蟲病的調(diào)查和防治

孔 博，錢常歡，施宇博，龐維鵬，崔 平

（河北北方學(xué)院研究生學(xué)院，河北 張家口 075000）

牛球蟲病是因球蟲寄生于牛腸道引起的原蟲病，呈世界性分布[1]，主要臨床表現(xiàn)為出血性腸炎。患牛出現(xiàn)腹瀉、貧血、消瘦、生長受阻、免疫力下降、生產(chǎn)性能下降、脫水等癥狀，嚴(yán)重可導(dǎo)致死亡。牛球蟲病是牛養(yǎng)殖業(yè)常見病之一，多發(fā)于春秋兩季的低濕牧場[2-3]。牛球蟲病多流行于小牛；成年牛呈隱性感染，感染卵囊數(shù)超10萬個(gè)時(shí)，即出現(xiàn)典型臨床表現(xiàn)[4]。糞便是犢牛感染的主要來源，糞便污染墊草和飼料也可引起小牛感染[5]。調(diào)查顯示，奶牛球蟲感染率為95.1%，其中犢牛最易感[6]。李豪等[7]調(diào)查我國部分地區(qū)的43個(gè)奶牛場，其中39個(gè)場檢測出球蟲。倪曉婷等[8]調(diào)查寧夏3 個(gè)牛場的球蟲感染情況，感染率分別為40.74%、28.11%和13.67%；檢出12種艾美耳屬球蟲，柱狀艾美耳球蟲為優(yōu)勢蟲種。文崇利等[9]檢測內(nèi)尼里、地中海及摩拉等3個(gè)品種牛群的糞便，發(fā)現(xiàn)各品種牛均對(duì)球蟲易感；青年牛和犢牛的感染率分別為1.3%、35.7%。牛球蟲病對(duì)畜牧業(yè)造成巨大損失[10]。因此，牛球蟲病的調(diào)查和防治尤為重要。本研究調(diào)查邯鄲地區(qū)某牛場球蟲的感染狀況及種類，確定該牛場球蟲的優(yōu)勢蟲種，以期為該牛場球蟲病的預(yù)防和治療提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣本來源

樣本來自2019 年冬季和2020 年春季的邯鄲某牛場，選擇5 個(gè)年齡段的奶牛和肉牛（公、母各半）：0～1 月齡、2～6 月齡、7～12 月齡、1～3 歲及3 歲以上。每組隨機(jī)采樣30份。

1.2 試劑與儀器

主要儀器：ZEISS 顯微鏡、NIS-Elements Viewer 軟件（ZEISS 公司）；80-2 型離心機(jī)（北京冠普佳能科技有限公司）；恒溫培養(yǎng)箱（北京富瑞恒創(chuàng)科技有限公司）；麥?zhǔn)舷x卵計(jì)數(shù)板（北京卓川電子科技公司）。

主要試劑：2.5%重鉻酸鉀溶液（山東西亞化學(xué)股份有限公司）、飽和鹽水。

1.3 測定指標(biāo)及方法

1.3.1 樣本處理

采樣時(shí)間選擇清晨（溫度低，卵囊發(fā)育緩慢），采集被檢牛群新鮮糞便50～100 g，裝入密封袋，標(biāo)記牛的體況、編號(hào)、年齡，4 ℃保存。每份被檢糞便50 g 與糞樣體積的5～6 倍的水混勻，經(jīng)80、200 目銅篩過濾，3 600 r/min 離心5 min，取沉淀與飽和鹽水混勻；混合液3 600 r/min 離心5 min，取最表層液體滴于載玻片，400倍光鏡下觀測。

1.3.2 卵囊收集與培養(yǎng)

適量陽性球蟲糞便加水混勻，雙層過濾后3 600 r/min離心5 min，取沉淀加飽和鹽水?dāng)噭颍? 600 r/min 離心5 min。吸取離心管中的表面液體，加6～10 倍水?dāng)噭螂x心5 min，取沉淀加入2.5%重鉻溶液，清洗沉淀物。平皿內(nèi)放入收集的卵囊，27～28 ℃培養(yǎng)。每隔6 h觀察卵囊的情況，待其完全孢子化，記錄所用時(shí)間。

1.3.3 球蟲卵囊計(jì)數(shù)

取2 g 陽性球蟲糞便，加入58 mL 飽和鹽水混勻。抽取混合液至麥?zhǔn)嫌?jì)數(shù)室，顯微鏡下計(jì)算1 cm方格內(nèi)的球蟲卵囊總數(shù)，計(jì)算兩刻度室里卵囊數(shù)的平均值，乘以200，得到每g糞中的卵囊數(shù)（OPG值）[11]。

1.3.4 判定指標(biāo)

感染率：出現(xiàn)球蟲卵囊的樣本數(shù)占所檢份數(shù)的百分比。感染強(qiáng)度：運(yùn)用McMaster's method，計(jì)算其OPG值。

檢出率：待全部卵囊孢子化后進(jìn)行定種。檢出率為每種球蟲卵囊與總球蟲卵囊數(shù)量的比值。檢出率高的蟲種即為該牛場的優(yōu)勢蟲種。

1.3.5 蟲種鑒定

將孢子化后的卵囊液制片。在40×10 倍帶有測微尺的顯微鏡下，觀察其外形特征。根據(jù)卵囊、孢子囊和子孢子的大小、微細(xì)結(jié)構(gòu)、形態(tài)、顏色、卵囊及孢子囊內(nèi)是否存在顆粒或殘?bào)w，完成孢子化所用時(shí)間等鑒定蟲種。

2 結(jié)果與分析

2.1 2019、2020 年不同品種、不同年齡牛的球蟲感染率（見表1、表2）

由表1、表2 可知，2019 年冬季和2020 年春季，奶牛的球蟲總感染率分別為13.33%和16.00%，肉牛的分別為12.00%和14.00%；在不同年齡段中，3 歲齡以上的牛感染率最低，2～6月齡的牛感染率最高。

表1 2019年冬季不同品種、不同年齡牛的球蟲感染率Tab.1 Coccidia infection rates of different breeds and ages of cattle in winter 2019 單位：%

表2 2020年春季不同品種、不同年齡牛的球蟲感染率Tab.2 Coccidia infection rates of different breeds and ages of cattle in spring 2020 單位：%

2.2 2019、2020年冬季不同年齡的奶牛、肉牛球蟲感染強(qiáng)度（見表3、表4）

由表3 可知，2019 年冬季，不同年齡的奶牛中，2～6 月齡的奶牛OPG值最大，為5 000；3歲以上的奶牛OPG值最小，為602。不同年齡的肉牛中，1～3 歲的肉牛OPG 值最大，為4 963；3歲以上的肉牛OPG值最小，為610。

表3 2019年冬季不同年齡的奶牛、肉牛球蟲感染強(qiáng)度（OPG）Tab.3 Intensity of Coccidia infection in dairy cows and beef cattle of different ages in the winter of 2019(OPG)

由表4可知，2020年春季，不同年齡的奶牛中，7～12月齡的奶牛OPG 值最大，為10 000；3 歲以上的奶牛OPG 值最小，為809。不同年齡的肉牛中，2～6月齡的肉牛OPG值最大，為8 450；3歲以上的肉牛OPG值最小，為680。春季的感染強(qiáng)度高于冬季。

表4 2020年春季不同年齡的奶牛、肉牛球蟲感染強(qiáng)度（OPG）Tab.4 Intensity of Coccidia infection in dairy cows and beef cattle of different ages in spring 2020(OPG)

2.3 邯鄲地區(qū)某牛場不同種類的球蟲檢出率（見表5）

由表5可知，在感染的陽性牛中，共檢查到8種艾美耳屬球蟲。最常見的是牛艾美耳球蟲和邱氏艾美耳球蟲。

表5 邯鄲地區(qū)某牛場不同種類的球蟲檢出率Tab.5 Detection rate of different species of Coccidia in a cattle farm in Handan area

2.4 邯鄲地區(qū)某牛場不同種類的球蟲在各年齡段牛的感染率（見表6）

由表6 可知，在感染的牛場中，2～6 月齡牛感染率最高，1～3歲的牛感染率最低。

表6 邯鄲地區(qū)某牛場不同種類的球蟲在各年齡段牛的感染率Tab.6 Infection rate of Coccidia of different species in cattle of different ages in a cattle farm in Handan Area 單位：%

3 討論

各年齡段牛的感染狀況中，3歲以上的牛感染率較低，2～6 月齡的牛感染率卻非常高，說明該牛場牛球蟲主要感染犢牛，符合牛球蟲病的發(fā)病特點(diǎn)。這種現(xiàn)象可能與牛體自身的抵抗力等有關(guān)。該牛場的犢牛與成年牛混養(yǎng)，也使?fàn)倥８腥韭试龈摺Ｒ虼耍瑧?yīng)將犢牛和成年牛分別養(yǎng)殖，母牛哺育小牛后，乳房應(yīng)保持干凈，水源和肥料也應(yīng)衛(wèi)生、清潔，防止糞便污染。春季牛球蟲感染率高于冬季，且春季球蟲的感染強(qiáng)度高于冬季，與文獻(xiàn)[12]報(bào)道一致。主要原因?yàn)榇杭緶嘏嘤辏Ｉ醿?nèi)較潮濕，且牛混養(yǎng)數(shù)量多，衛(wèi)生條件不佳，導(dǎo)致牛感染球蟲病。因此，定期對(duì)牛舍進(jìn)行消毒，保持牛舍清潔、干燥、通風(fēng)，對(duì)控制和預(yù)防牛球蟲病具有重大意義。同時(shí)，應(yīng)重視營養(yǎng)供應(yīng)，保持飼料的平衡性，增強(qiáng)牛的身體機(jī)能。本研究中鑒定得到8種牛艾美耳屬球蟲，與劉俊偉等[13]研究結(jié)果一致；但因品種、采樣數(shù)量、采樣季節(jié)不同以及飼養(yǎng)管理的影響，個(gè)別種的卵囊量度和細(xì)微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)差別，部分病牛同時(shí)感染多種球蟲，牛、邱氏、橢圓艾美耳球蟲的感染率較高，最優(yōu)勢種為牛艾美耳球蟲。該牛場球蟲感染率低，但感染強(qiáng)度較高，平均OPG 大于1 000。因此，獸醫(yī)及工作人員應(yīng)重視牛球蟲病的防治工作，采取“預(yù)防為主，防治結(jié)合”的綜合性防治措施，一旦發(fā)現(xiàn)病牛，及時(shí)隔離、檢疫、藥物治療。可選用氨丙啉、鹽霉素、磺胺脒片等驅(qū)蟲藥進(jìn)行驅(qū)蟲治療，達(dá)到良好的治愈效果[5,14-16]。

4 結(jié)論

春季的球蟲感染率、感染強(qiáng)度均高于冬季。奶牛的感染率高于肉牛。不同年齡段的奶牛和肉牛中，2～6 月齡的奶牛和肉牛球蟲感染率最高，3 歲齡以上的感染率最低。該牛場的優(yōu)勢蟲種為牛艾美耳球蟲。