用TOSOH HLC-723 G8型糖化血紅蛋白儀檢測糖化血紅蛋白的精密度及正確度

郭勝利，郭麗麗，李守霞

(1. 邯鄲邯鋼醫院檢驗科，河北 邯鄲 056001 ；2. 邯鄲市中心醫院檢驗科，河北 邯鄲 056001)

近年來，糖化血紅蛋白檢測在診治糖尿病中得到了廣泛的應用。準確地檢測糖化血紅蛋白對檢測儀器分析性能的要求較高。在本研究中，筆者參照美國臨床和實驗室標準協會制定的相關標準、WS/T 492-2016、WS/T 420-2013、WS/T 402-2012、YY/T 1246-2014 等中國行業標準中的相關方法對用TOSOH HLC-723 G8 型糖化血紅蛋白儀（采用高效液相色譜法）檢測糖化血紅蛋白的精密度及正確度進行了評價。

1 材料與方法

1.1 標本來源

在我院就診糖尿病患者的乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA）抗凝全血；衛生部臨床檢驗中心提供的具有互換性的有證參考物質。

1.2 儀器和試劑

TOSOH HLC-723 G8 型糖化血紅蛋白儀及其原裝配套試劑、校準品、質控品。

1.3 驗證方案

1.3.1 精密度驗證實驗 選擇兩個糖化血紅蛋白濃度水平（5.0%、9.9%）的EDTA 抗凝全血，進行室內質控，每天每個濃度檢測1 個批次，每批次重復測定3 次，連續測定5 d，每個濃度水平累計檢測15 個結果，統計計算得出批內不精密度和總不精密度。糖化血紅蛋白的允許總誤差（allowable total error，TEa）為8.0%，實驗室允許批內不精密度≤2.0%（1/4 TEa），實驗室允許總不精密度≤2.67%（1/3 TEa）。

1.3.2 正確度驗證實驗 選擇衛生部臨床檢驗中心提供的具有互換性的有證參考物質，包括低〔（5.02±0.15）%〕、 中〔（6.86±0.15）%〕、 高〔（9.34±0.21）%〕三個糖化血紅蛋白濃度水平的EDTA 抗凝全血各100 μL。按糖化血紅蛋白檢測標準中的相關操作規程進行檢測樣本的前處理及測定，進行室內質控，每天每個濃度檢測1 個批次，每批次重復測定2 次，連續測定5 d，每個濃度水平累計檢測10 個結果，計算驗證區間（VI），參考物質的賦值在VI 范圍內，表示正確度驗證通過。

1.4 統計學方法

采用SPSS 20.0 軟件對研究數據進行統計學處理。計量資料用均數± 標準差（±s）表示，采用t檢驗，計數資料用百分比（%）表示，采用χ2 檢驗。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 糖化血紅蛋白檢測精密度驗證結果

在TOSOH HLC-723 G8 型糖化血紅蛋白儀上檢測糖化血紅蛋白的結果顯示，低（5.0%）、高（9.947%）兩個糖化血紅蛋白濃度水平血樣的實測批內不精密度分別為0.73%、0.519%，總不精密度分別為0.76%、0.779%，均在實驗室允許范圍（批內不精密度＜ 2.0%，總不精密度＜2.667%）內，檢測精密度驗證通過。詳見表1。

2.2 用參考物質進行糖化血紅蛋白檢測正確度驗證的結果

低〔（5.02±0.15）%〕、中〔（6.86±0.15）%〕、高〔（9.34±0.21）%〕 三 個 糖 化 血 紅 蛋白濃度水平參考物質的賦值分別落在VI 4.8 8 5% ～ 5.1 2 9%、6.7 2 8% ～ 7.1 9 4%、9.266% ～9.622% 范圍內，檢測正確度驗證通過。詳見表2。

表2 用參考物質進行糖化血紅蛋白檢測正確度驗證的結果（%）

3 討論

1968 年，Ranbar 等[1-2]在糖尿病患者體內的紅細胞中發現了異常血紅蛋白。此后，臨床上開始逐步了解了血紅蛋白與糖尿病的關系。現如今，糖化血紅蛋白已成為臨床上診斷、治療、監測糖尿病的重要指標。糖化血紅蛋白的穩定性較強，不會受到一過性血糖升高/ 降低的影響[3-4]。美國臨床化學協會糖化血紅蛋白標準化委員會和國際臨床化學與檢驗醫學聯合會糖化血紅蛋白標準化工作組均建議將高效液相色譜法作為檢測糖化血紅蛋白的金標準[5]。有研究指出，離子交換高效液相色譜法具有高效、高靈敏度、高準確度、操作簡便快捷等優點。精密度和正確度是檢測系統重要的性能指標。據統計，2000 ～2010年，臨床上檢測4% ～6% 濃度水平糖化血紅蛋白血樣的變異系數由7.0% 降至4.0%，檢測6% ～10% 濃度水平糖化血紅蛋白血樣的變異系數由5.0% ～5.5% 降至4.0%[6]。美國病理學家協會建議所有糖化血紅蛋白檢測方法的目標變異系數均應≤3.5%。其中，多數方法的目標變異系數應≤3.0%，少數方法的目標變異系數應≤2.0%。本研究的結果顯示，低（5.0%）、高（9.947%）兩個糖化血紅蛋白濃度水平血樣的實測批內不精密度分別為0.73%、0.519%，總不精密度分別為0.76%、0.779%，均在實驗室允許范圍（批內不精密度＜ 2.0%，總不精密度＜ 2.667%）內，檢測精密度驗證通過。通過檢測具互換性有證參考物質進行檢測正確度驗證的結果顯示，低〔（5.02±0.15）%〕、 中〔（6.86±0.15）%〕、 高〔（9.34±0.21）%〕三個糖化血紅蛋白濃度水平參考物質的賦值分別落在VI 4.885% ～5.129%、6.728% ～7.194%、9.266% ～9.622% 范圍內，檢測正確度驗證通過。

綜上所述，用TOSOH HLC-723 G8 型糖化血紅蛋白儀檢測糖化血紅蛋白的精密度及正確度均符合相關要求。