研究大麻素受體1型基因多態性對利拉魯肽治療早期2型糖尿病患者臨床療效的影響

唐英琪

（沈陽醫學院附屬中心醫院內分泌科，遼寧 沈陽 110000）

糖尿病在早期階段并無典型臨床癥狀，隨著病情發展到侵害靶器官后才會有對應的癥狀出現，作為當前中老年人慢性病發病率最高的疾病之一，2型糖尿病受環境、遺傳、生活方式等多種因素相互影響，雖然作為內分泌代謝紊亂性疾病對患者的威脅程度較低，但其可能引發各種并發癥如腎病、心血管疾病、神經性疾病、潰瘍性疾病甚至心理疾病等，嚴重威脅患者身體健康和生活質量。利拉魯肽是臨床常用于治療2型糖尿病的藥物，其氨基酸序列與人體中內源性酰化胰高血糖素樣肽1接近，且代謝穩定性較高，在臨床試驗中無論是單獨用藥或聯合用藥調整血糖水平效果均較顯著，但隨著其在臨床廣泛應用，大量的研究者[1-3]發現，該藥物對于2型糖尿病患者在療效方面具有個體差異。任麗君[4]的相關研究發現，對2型糖尿病病情有推動作用的相關位點接近100個，而位于6Q14-Q15位置的內源性大麻素受體1型基因（CNR1）為其中1個重要因素，有8個外顯子，且不同的人群也有對應的表現。近年來，CNR1基因1260G＞A單核苷酸多態性已被公認為與2型糖尿病疾病重要關聯易感基因，不同個體的不同基因表達對于病情、藥物療效等也有不同影響。本研究旨在了解CNR1基因的多態性對于利拉魯肽治療早期2型糖尿病患者效果的影響，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2018年1月至2019年1月本院收治的230例確診為早期2型糖尿病患者作為研究對象。其中男118例，女112例；年齡26～59歲，平均（46.22±2.51）歲。本研究獲得醫院倫理委員會審核批準。納入標準：患者及家屬均簽署知情同意書；確診為2型糖尿病且病程＜2年；曾用二甲雙胍治療對血糖未能達到預期改善效果而改用利拉魯肽治療；空腹血糖（FPG）＞7.0 mmol/L，餐后2 h血糖（2 h PG）＞11.1 mmol/L，糖化血紅蛋白（HbA1c）＞6.5%。排除標準：在本研究前曾應用GLP-1藥物治療；聯合其他降糖藥物治療；合并有肝腎功能障礙、心腦血管疾病、惡性腫瘤。

1.2 方法 所有患者均通過皮下注射方式應用利拉魯肽治療，初始計量為每天0.6 mg，隨著病情調整逐漸增加至每天1.2 mg，治療期間通過檢測患者血糖指標以及對藥物治療耐受情況來調整藥物劑量，但每天劑量不超過1.8 mg。

1.3 觀察指標 ①比較治療前后患者體重指數（BMI）、空腹血糖（FPG）、餐后2 h血糖（2 h PG）及糖化血紅蛋白（HbA1c）。②基因分型：抽取患者外周靜脈血5 ml，用儀器Chelex-100在全血中得到基因組DNA，置于-20℃環境中備用，在聚合酶鏈反應擴增中使用。對1260G＞A位點的上游、下游PCR引物進行設計，擴增該位點和附近的DNA片段，擴增條件：95℃，初始變性6 min，94℃，35個循環，每個循環30 s，60℃退火30 s，72℃延伸1 min。使用5U MSPI限制性核酸內切酶在37℃環境中對10μl的PCR產物做過度消化處理。使用2%瓊脂糖凝膠電泳分離消化產物，對A等基因進行切割，分別為92 bp及19 bp兩個片段，G等位基因則不作切割處理為111 bp片段。③比較不同基因分型患者mRNA表達水平及不良反應發生率（低血糖、惡心嘔吐）。

1.4 統計學方法 采用SPSS 20.0統計學軟件進行數據分析，計量資料以“±s”表示，行t檢驗，計數資料以[n（%）]表示，行χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 1260G＞A位點基因分型結果 GG型188例，GA型39例，AA型3例，其中等位基因頻率最小為0.098，其分布頻率與哈迪溫伯格平衡相符合（P=0.550）。鑒于AA型例數較少，將GA型、AA型患者合并。

2.2 治療前后患者各項指標比較 治療后，患者BMI、FPG、2 h PG及HbA1c均低于治療前（P＜0.05），見表1。

表1 治療前后血糖指標比較Table 1 Comparison of blood glucose index data before and after treatment

2.3 不同基因分型患者mRNA表達水平 GG型患者CNR1 mRNA表達水平為（4.2±1.3），GA/AA型患者CNR1 mRNA表達水平為（2.8±1.2），比較差異有統計學意義（P＜0.05）。

2.4 不同基因分析患者不良反應發生率比較 不同基因分型患者的藥物治療不良反應發生率比較差異無統計學意義，見表2。

表2 不同基因分析患者不良反應發生率比較Table 2 Comparison of adverse reaction rates in patients with different gene analysis

3 討論

本研究通過基因分型來系統的探究大麻素受體1型基因多態性與利拉魯肽干預效果間的關聯性。相對于位點野生型GG型患者而言，攜帶A等位基因的GG型以及AA型基因型患者對于血糖指標的控制程度更為突出，再對符合PBMC標本標準的患者進行CNR1 mRNA表達水平分析，提示不同基因類型的表達間也存在著一定的差異[5-6]。

目前CNR1基因在2型糖尿病的發病以及相關并發癥誘發過程中發揮的作用以及靶點仍未完全闡明，但相關研究表明，CNR1系統失衡可能會引發如肥胖、胰島素抵抗、血脂異常等代謝性疾病，而這些疾病本身也會促進2型糖尿病的發生和惡化[7]。

本研究結果表明，治療后，患者BMI、FPG、2 h PG及HbA1c均低于治療前（P＜0.05），說明基因表現型為GA或AA型的2型糖尿病患者相關指標水平調整更佳。GG型患者CNR1 mRNA表達水平高于GA/AA型患者，差異有統計學意義（P＜0.05）。推斷2型糖尿病患者接受藥物治療后其療效在一定程度上受到了CNR1基因1260＞A位點多態性的影響，其關聯性出現的原因可能為內源性大麻素系統通過外周、中樞相關機制影響甚至改變患者攝入食材的行為，增加CNR1表達導致患者食欲增加[8]，也說明了GG基因表達型患者因為mRNA表達量較高的情況下而使治療效果相對較低，而攜帶A等位基因患者在接受利拉魯肽干預后對于胰島素抵抗有一定的調整降低效果，代謝值逐漸升高會對應的降低體質量，這也是對利拉魯肽藥物治療后效果相對較差的原因。同時，在臨床上對合并肥胖的2型糖尿病患者應用利拉魯肽治療還存在有其他多種機制[9-10]：胰島β細胞中的相關肽被直接激活并加快胰島素分泌、合成速度；讓胃部排空所需時間相對更長從而達到降低患者食欲的目的；抑制胰高血糖素分泌速度來改善機體血糖指標。利拉魯肽在治療中不會對血管造成明顯傷害，對于改善動脈粥樣硬化和降低心血管疾病不良事件發揮積極保護作用。

綜上所述，應用利拉魯肽藥物治療早期2型糖尿病患者可取得良好的干預改善效果，其中CNR1基因1260G＞A位點表達為GA型、AA型患者，其基因表達可能對藥物療效產生影響，但本研究仍存在一定的局限性，還需進一步研究以得到更明確的結論。