曾彩輝,黃燎盧
1 中山大學附屬第三醫(yī)院生物治療中心(廣東廣州 510700);2 廣州計量檢測技術研究院醫(yī)光部(廣東廣州 510620)
流式細胞分選技術是現階段最熱門的細胞分離純化技術,被廣泛應用于生物醫(yī)學領域中。通過利用流式細胞分選儀,以高能量激光照射高速流動狀態(tài)下被熒光標記的目標細胞或微粒,檢測和分析其發(fā)射的熒光強度,可對細胞或微粒進行定性或定量檢測[1-2]。MOFLO EQ 超速流式分選儀是一款于空氣中激發(fā)的六路分選系統,采用了增強的雙前向角散射光檢測技術,可同時對直徑為200 nm~30 μm 的微粒執(zhí)行檢測和分選任務[3]。現總結MOFLO EQ 超速流式分選儀的常規(guī)維護措施及常見故障分析6例,以供同行參考。
流路維護是MOFLO EQ 超速流式分選儀日常維護的主要內容之一,應按使用規(guī)程執(zhí)行開、關機清洗程序,以避免堵塞或造成管路污染。日常使用的鞘液應保證無菌,否則易造成流路污染;平時注意鞘液桶的清洗維護,建議選用75%的乙醇或濃度為1%~3%的次氯酸溶液進行清洗,必要時可采用高溫高壓的方式進行消毒[4]。
具備一定技術能力和經驗的臨床工程師應每年對MOFLO EQ 超高速流式分選儀進行年度大保養(yǎng),對儀器的管路系統進行必要的更換和清洗,目的在于保持流路穩(wěn)定和避免造成污染;技術能力尚不成熟的臨床工程師或無條件的醫(yī)院需在廠家工程師的現場指導下進行年度大保養(yǎng),定期更換相應的過濾器、上樣管和進樣針配件。
MOFLO EQ 超高速流式分選儀的光路維護主要是調校液流,包含更換噴嘴后的液流調校,由于該設備采用高精度的激光光纖進行傳輸,一般情況下只需調校液流即可保證光路性能穩(wěn)定,無需對激光進行調校。光路維護需要平時對液流照明倉進行清潔,當噴嘴堵塞后,應第一時間關閉液流,更換噴嘴或使用注射器疏通噴嘴,若有液流濺在液流照明倉的光學濾鏡上,可使用干凈無絮的棉簽和純水沿一個方向擦拭清潔。
2.1.1 故障現象
噴嘴堵塞。
2.1.2 故障分析與排除
正常情況下,從MOFLO EQ 超高速流式分選儀噴嘴噴出來的液流是垂直且穩(wěn)定的,液流相機上可以看到邊界清晰的穩(wěn)定液流,見圖1;噴嘴堵塞的主要表現是后液流傾斜或不穩(wěn)定,液流相機上表現為邊界不規(guī)則或上下粗細不均勻等。噴嘴堵塞后可以嘗試使用清洗液或濃度為1%~3%的次氯酸溶液進行反抽;噴嘴堵塞嚴重時,一般可拆下噴嘴,使用注射器沖洗噴嘴,清洗完畢后重新裝回調試即可。

圖1 正常液流圖
2.2.1 故障現象
上樣管路堵塞。
2.2.2 故障分析與排除
正常情況下,上樣的流式是比較穩(wěn)定的,造成上樣管路堵塞的原因是流速波動較大,特別是突然明顯降低。發(fā)生上樣管路堵塞故障時,切勿加大上樣壓力,應立即停止上樣,反復執(zhí)行“backflush(反沖洗)”幾次,重新檢查混勻樣品,重新上樣即可排除故障。
2.3.1 故障現象
Summit 軟件不能聯機,處于“OFFLINE(脫機)”模式。
2.3.2 故障分析與維護
若Summit 軟件不能聯機,處于“OFFLINE”模式,新建數據庫,打開需要的實驗方案即可。
2.4.1 故障現象
液流不偏轉。
2.4.2 故障分析與維護
根據經驗,造成液流不偏轉的主要原因有兩點:一是Nozzle ASSY(流動池)有氣泡,僅需執(zhí)行幾次排氣泡即可排除故障;二是偏轉板固定不好,需重新安裝偏轉板,安裝完成后擦掉偏轉板上面的水或結晶。
2.5.1 故障現象
鞘液桶壓力不正常。
2.5.2 故障分析與維護
鞘液桶壓力不正常表現在鞘液桶壓力不能正常加壓或負壓桶沒有負壓,主要是因為桶蓋未蓋好導致漏氣。注意桶的密封圈保持清潔,可以用清水清洗,必要時予以更換。
2.6.1 故障現象
Intellisort(智能分選)報警。
2.6.2 故障分析與維護
MOFLO EQ 超高速流式分選儀的智能分選需要扣除相機的背景。若分選相機透光窗上面有結晶,則會導致Intellisort 報警,結晶可能是由噴嘴堵塞,液流傾斜后濺起所致;當發(fā)生Intellisort 報警時,應使用清水擦拭分選相機透光窗;若報警時間較長,背景本身可能發(fā)生變化,需要重新執(zhí)行扣除背景步驟。
MOFLO EQ 超高速流式分選儀是貝克曼庫爾特公司生產的最新一代流式分選儀,是我院生物治療中心的主要精密貴重儀器之一。MOFLO EQ 超高速流式分選儀的性能和使用壽命受環(huán)境溫度、濕度及清潔度等方面的影響,故十分必要保障本機工作在適當的溫、濕度環(huán)境中[5]。該機的最佳環(huán)境溫度范圍為18~22 ℃,且運行期間溫度變化應<2 ℃;最佳濕度范圍為40%~60%。臨床工程師和使用人員應加強對儀器的預防性維護保養(yǎng)工作,在日常工作中注意分析儀器出現故障的原因,總結排除故障的維修經驗,最大限度使儀器在最佳狀態(tài)工作,以提高利用率,減少故障,延長使用壽命,提高醫(yī)院的社會效益和經濟效益[6]。