C型產氣莢膜梭菌生產用菌種種子批的建立與鑒定

劉澤文，袁芳艷，劉 威，高 婷，周丹娜，楊克禮，郭 銳，李 暢，田永祥

（湖北省農業科學院畜牧獸醫研究所/農業農村部畜禽細菌病防治制劑創制重點實驗室/畜禽病原微生物學湖北省重點實驗室，武漢 430064）

仔豬C 型產氣莢膜梭菌病又叫仔豬紅痢，是由C 型產氣莢膜梭菌引起的初生仔豬急性傳染病［1］，該病主要發生于3日齡以內的新生仔豬，主要臨床表現為排出淺紅或紅褐色稀糞，發病急劇，病程短促，發病率可達40%～50%，死亡率可高達100%。由于該病發病急、死亡快，疫苗免疫預防是防治該病的最好辦法之一。研究表明，將C 型產氣莢膜梭菌外毒素抗原經過脫毒、滅活，然后制成滅活疫苗，免疫昆明小鼠和家兔后，用產氣莢膜梭菌毒素對其進行攻毒，結果顯示滅活疫苗具有良好的免疫效果［2］。為研制仔豬C 型產氣莢膜梭菌病滅活疫苗，必須建立C 型產氣莢膜梭菌生產用菌種種子批。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌種 C 型產氣莢膜梭菌C59-2 第2 代基礎種子，定義為F0代，作為原始種子，由中國獸醫藥品監察所保存和供應。

1.1.2 培養基及試劑 普通肉湯、厭氣肉肝湯、肉肝胃酶消化湯、普通瓊脂斜面、石蕊牛乳、葡萄糖鮮血瓊脂、厭氧菌糖發酵管、生化試驗管及相關試劑，均購自青島海博生物技術有限公司。產氣莢膜梭菌A、B、C、D 定型血清，均由中國獸醫藥品監察所提供。C 型產氣莢膜梭菌凍干毒素（批號2007D），由湖北省農業科學院畜牧獸醫研究所制備、鑒定和保存。

1.1.3 試驗動物 16～20 g 昆明小鼠，購自湖北省實驗動物研究中心；……