一例少見施氏假單胞菌引起的傷口感染

□張 艷 黃紅衛

施氏假單胞菌隸屬于假單胞菌科假單胞菌屬，是一類具有單極性鞭毛的革蘭陰性桿菌，臨床上極為罕見[1～3]。近十年來，國內僅報道2例由該菌引起的感染。湘南學院附屬醫院檢驗中心微生物室于2019年8月從一例外傷患者傷口膿汁中分離出一株施氏假單胞菌，現報告如下。

一、臨床資料

患者，男，30歲。因車禍致右小腿外傷，術后皮膚壞死、脛骨及內固定外露十余天，2019年8月25日轉至湘南學院附屬醫院。既往二十余年前有右下肢燙傷手術史，現遺留廣泛肢體瘢痕。入院查體：體溫36.6℃，脈搏90次/分，呼吸19次/分，血壓110/77mmHg。右腿皮膚組織檢查：右小腿上段內側可見一大小約25*8cm的創面，創緣部分皮膚顏色暗，血運差，部分皮膚顏色發黑，血運無，傷口周圍稍紅腫，皮溫稍高，創面可見部分壞死組織，創口內可見脛骨外露，外露骨質顏色發暗，血運差，同時可見鋼板及鋼絲外露，創面外側可見一長約8cm的手術縫合傷口，傷口緣部分皮膚顏色暗，血運差。

實驗室檢查：紅細胞(RBC)3.56X1012/L，血紅蛋白(HGB)99g/L，總蛋白(TP)62.8g/L，清蛋白(ALB)32.7g/L，球蛋白(GLB)30.1g/L，血沉及凝血功能未見異常。

圖1 患者傷口圖

二、儀器與試劑

普通營養瓊脂培養基、血瓊脂培養基、麥康凱瓊脂培養基、梅里埃VITEK 2 Compact全自動細菌鑒定及藥敏分析系統、VITEK MS全自動快速微生物質譜檢測系統、ABI3730XL測序儀。

三、分離、培養及鑒定

(一)標本采集。用滅菌生理鹽水擦洗傷口表面，用無菌棉拭子采取傷口膿汁分泌物，置于無菌試管內送檢。

(二)分離培養。將傷口膿汁分泌物通過平板劃線方法接種于血瓊脂培養基、普通營養瓊脂培養基和弱選擇性培養基麥康凱瓊脂培養基，37℃恒溫需氧培養。24小時后取出平板觀察菌落特征。同一平板上可見顏色、形狀、大小等性狀相同或接近的菌落。經革蘭染色，細菌均呈紅色桿菌，初步判定為同一種菌。

(三)分純及生化鑒定。挑取單個菌落于血平板進行分純培養，后取純培養物于專用比濁管中調至濃度為0.5麥氏比濁度菌懸液，經Compact VITEK2(AST-GN09)系統對該菌進行種類鑒定和耐藥性分析。

(四)質譜鑒定。運用MALDI-TOF原理，由VITEK MS全自動快速微生物質譜檢測系統進行鑒定。

(五)基因測序。委托北京睿博興科生物技術有限公司進行基因測序。

四、結果

該菌經涂片染色為革蘭陰性桿菌，無芽孢、無莢膜，有單鞭毛。血平板培養48h后，菌落呈現粗糙、干燥、扁平、皺折、堅韌而粘附平板狀。普通平板上，菌落呈現出淡黃色。VITEK2(AST-GN09)鑒定為施氏假單胞菌，藥敏試驗結果顯示該菌對哌拉西林，替卡西林/克拉維酸，第三代頭孢菌素，亞胺培南，氮唑烷，去甲沙星，環丙沙星和氨基糖苷敏感，對氨芐西林，阿莫西林/克拉維酸，頭孢噻吩，頭孢西汀和復方新諾明耐藥。VITEK MS質譜鑒定結果為施氏假單胞菌，與VITEK2鑒定結果一致。基因測序結果為施氏假單胞菌，與VITEK2鑒定結果、VITEK MS質譜鑒定結果一致。

圖2 血瓊脂平板菌落 圖3 質譜鑒定結果

圖4 基因測序結果

五、討論

根據伯杰分類手冊第1卷，按照rRNA同源性分類，施氏假單胞菌隸屬于rRNAI群，與銅綠假單胞菌同屬1群。該菌廣泛存在于土壤、水、糞便及肥料中，人類呼吸道及泌尿道均可存在。屬于條件致病菌，當人體抵抗力降低時可引起感染，主要引起機會感染或醫院內感染。該菌臨床感染率較低，臨床案例研究報道少。文獻研究多集中于施氏假單胞菌在農業領域的應用。經檢索中國知網(CNKI)、中文生物醫學期刊文獻數據庫(CMCC)、Medline等數據庫，僅有2篇關于該菌引起臨床感染的報道。2012年，董政等報道了從患者壞死皮膚組織中分離出1例施氏假單胞菌。2016年，王亞煒等報道了燒傷傷口分泌物中一株施氏假單胞菌的分離與鑒定。此次，也從患者傷口膿汁中分離出該菌，提示該菌可存在于自然環境或人體皮膚表面。當機體防御功能減弱，機體免疫力下降時，應重視由該菌引起的臨床感染。該菌是否好發于外傷傷口中，引起傷口感染，仍值得進一步探討。該菌菌落呈粗糙、干燥、扁平、皺折、堅韌而粘附平板狀，特征較為典型，培養遇此類菌落時，應高度懷疑此菌，并對病原體進行鑒定。藥敏試驗結果提示該菌對部分藥物耐藥明顯，提示臨床用藥應在藥敏試驗結果指導下進行，臨床醫生不可單憑經驗用藥。