ABO-HDN患兒輸血前采用微柱凝膠技術檢驗的臨床價值

徐曉玲,殷明剛,劉智勇（.四川省自貢市第三人民醫院,四川 自貢 64020;2.四川省自貢市第一人民醫院,四川 自貢 64000;.四川省攀枝花市中心醫院,四川 攀枝花 67067）

新生兒溶血病（HDN）主要是母嬰間血型不合所致同族血型免疫反應，胎兒遺傳母體缺少的紅細胞血型抗原，抗原經胎盤侵入母體，刺激母體出現免疫抗體，抗體經胎盤絨毛進入胎兒血循環，可導致出現免疫應答反應，對紅細胞造成破壞，引發溶血病[1-2]。ABO-HDN是一種常見HDN類型，通常母親血型為O型，患兒血型為A或B型[3-4]。輸血為臨床常用ABO-HDN治療方法，為防止輸血時血型不恰當導致溶血反應加重，需在輸血前加強交叉配血檢測[5]。目前，臨床常用交叉配血方法包括MPT、MGT，但臨床就其在ABO-HDN患兒輸血前交叉配血中作用研究仍較少。本研究選擇156例ABO-HDN患兒，重點分析輸血前采用MPT、MGT進行交叉配血的效果，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機抽樣法選取2015年1月-2019年6月本院156例ABO-HDN患兒。納入標準：①符合《新編兒科疾病臨床診療學》[6]中ABO-HDN診斷標準，經溶血三項[改良直接抗人球蛋白試驗（DAT）、游離抗體試驗、抗體釋放試驗]檢查確診；②血清間接膽紅素水平異常升高；③Rh D血型陽性；④家屬知情同意。排除標準：①孕婦合并嚴重肝腎功能不全；②自身免疫性溶血性疾病或其他原因所致各種溶血病；③家屬不愿參與本研究。本組患兒中，男90例，女66例；日齡1-5d，平均（2.69±0.79）d；體質量2.5-3.7kg，平均（3.16±0.37）kg。

1.2 方法 取患兒血樣，2000r/min離心，持續10min，分離血清、紅細胞。紅細胞以0.9%氯化鈉注射液洗滌，配制3%細胞懸液。取1mL紅細胞懸液，加入等體積0.9%氯化鈉注射液，水浴7min，56℃下，2000r/min離心，持續3min，收集放散液。分別采用MPT、MGT進行主側交叉配血。MPT：取試管1只，加入血清2滴或紅細胞放散液2滴，配型紅細胞懸液1滴。以0.7mL低離子介質混勻，加入2滴凝聚胺溶液。專用離心機離心，持續10s，棄上清液，試管輕輕搖動，紅細胞凝集后，加入2滴重懸液，混勻，觀察結果。MGT：收集血樣，準備微柱凝膠試劑卡，分別將血樣置入凝膠試管內，專用離心機離心，900r/min，持續2min，1500r/min，持續3min，共5min。取出，觀察結果。

1.3 觀察指標 ①分析MPT、MGT進行交叉配血與溶血三項試驗結果，計算不合格率；②分析直抗類型與血清、放散液交叉配血結果，計算MPT、MGT檢測不合格率；③采用Kappa一致性檢驗評估血清及放散液中MPT、MGT配血結果一致性。

1.4 統計學分析 以SPSS20.0軟件分析。計數資料以“n，%”表示，以χ2檢驗。計量資料以（±s）表示。P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清、放散液交叉配血與溶血三項試驗結果 本組采用MPT、MGT進行主側游離血清及紅細胞放散液交叉配血次數為480次。MGT檢測不合格率為70.83%（340/480），高于MPT的11.25%（54/480），差異有統計學意義（χ2=352.119，P=0.000）。見表1。

表1 血清交叉配血與溶血三項試驗結果對比（n）

2.2 直抗類型與血清交叉配血結果 直抗陽性患兒MGT檢測不合格率為59.82%（134/224），高于MPT的19.20%（43/224），差異有統計學意義（χ2=77.342，P=0.000）；直抗陰性患兒M G T檢測不合格率為4 6.0 9%（1 1 8/2 5 6），高于M P T的3.91%（10/256），差異有統計學意義（χ2=121.500，P=0.000）。見表2。

表2 直抗類型與血清交叉配血結果分析（n）

2.3 直抗類型與放散液交叉配血結果 直抗陽性患兒MGT檢測不合格率為48.21%（108/224），高于MPT的17.86%（40/224），差異有統計學意義（χ2=46.656，P=0.000）；直抗陰性患兒MGT檢測不合格率為35.94%（92/256），高于MPT的2.34%（6/256），差異有統計學意義（χ2=93.334，P=0.000）。見表3。

表3 直抗類型與放散液交叉配血結果分析（n）

2.4 血清MPT、MGT配血結果 血清MPT檢測陽性者MGT檢測結果均為陽性，Kappa值為0.225，P＜0.05，兩種技術配血結果一致性較差。見表4。

表4 血清MPT、MGT配血結果分析（n）

2.5 放散液MPT、MGT配血結果 放散液MPT檢測陽性者MGT檢測結果均為陽性，Kappa值為0.303，P＜0.05，兩種技術配血結果一致性較差。見表5。

表5 放散液MPT、MGT配血結果分析（n）

3 討論

ABO-HDN在臨床上較為常見，病情復雜，且危險因素較多，包括孕婦妊娠次數、妊娠年齡、血型抗體效價等[7-10]。ABO-HDN可導致出現貧血、黃疸等癥狀，部分患兒還可繼發膽紅素腦病，危害性較大，需加強早期診治[11-13]。此類患兒體內存在母源溶血性免疫球蛋白抗體，部分與紅細胞結合，故臨床多采用溶血三項（DAT、游離抗體試驗、抗體釋放試驗）診斷[14-15]。輸血為ABO-HDN常用治療方法，但輸血時血型不適，可影響輸血效果，導致出現較多嚴重并發癥，不利于康復，故需在輸血前加強交叉配血[16-17]。既往臨床多采用酶法、鹽水法等傳統交叉配血方法，但這些方法也存在較大局限性，影響檢驗準確性。近年來，隨著醫學技術快速發展，一些新型交叉配血檢驗方法在臨床上得到應用，如MPT、MGT等。其中，MPT具有操作簡單、方便快捷、檢測迅速等特點，效果確切，但該方法應用時也存在一定不足之處，如抗體濃度偏低時易出現假陽性，影響檢驗準確性、有效性。

而MGT除操作簡單、方便快捷等特性外，還具有所需標本少、特異性高、敏感度高等優勢，在臨床交叉配血中發揮越來越重要作用[18-19]。具體來說，MGT原理為將符合條件的稀釋液配制為凝膠，實施微管柱灌注，以專用離心機離心，通過微柱內凝膠顆粒的分子篩，對凝集的紅細胞進行截留，獲得凝集反應結果[20-21]。而且，MGT具有較好重復性，檢測結果較穩定，可直接觀察，無需顯微鏡，對儀器設備要求較低，可在基層醫院開展。但MGT應用也存在一定不足之處，如操作耗時較長、較難準確識別紅細胞的不完全抗體等[22-24]。本研究重點分析了ABO-HDN患兒輸血前MGT進行交叉配血檢驗的效果，并對比MPT。調查發現，MGT檢測不合格率為70.83%，MPT檢測不合格率11.25%，差異顯著（P＜0.05）。而且，自表2、表3可以看出，直抗陽性患兒血清、放散液中MGT檢測不合格率分別為59.82%、48.21%，明顯高于MPT的19.20%、17.86%（P＜0.05），直抗陰性患兒血清、放散液中MGT檢測不合格率分別為46.09%、35.94%，明顯高于MPT的3.91%、2.34%（P＜0.05）。這說明ABO-HDN患兒輸血前采用MGT進行交叉配血，可獲得較MPT檢驗更為理想的效果，可提升不合格檢出率，有效發現體內可溶性抗體。但MGT中仍存在陰性，考慮是因為患兒紅細胞抗原表達強度不同，機體代謝變化存在差異，在一定程度干擾了交叉配血結果準確性。這同時也說明，ABO-HDN患兒輸血方案制定中不能單一以交叉配血陰性為標準，需配合其他檢查方法進行綜合評估，最終確定輸血方案。此外，本組患兒血清及放散液中MPT、MGT配血結果一致性較差（Kappa值分別為0.225、0.303），這說明MGT可作為ABO-HDN患兒輸血前交叉配血有效手段應用于臨床。

綜上所述，ABO-HDN患兒輸血前采用MGT進行交叉配血的效果理想，有利于提升交叉配血有效性、安全性，值得進行深入研究。