血清胱抑素C和尿液腎損傷分子-1檢測對妊娠期高血壓患者早期腎損傷的診斷價值

王金英

(汝南縣人民醫院 醫學檢驗科，河南 駐馬店 463300)

妊娠期高血壓病(HDCP) 是妊娠期一類特有疾病，疾病出現與全身的細小動脈痙攣，引起內皮受損從而導致局部缺血有關。隨著我國高齡產婦基數的增長，加之群眾對妊娠期間營養干預、作息方式的認知欠科學，導致一些常見產科合并癥，如妊娠期高血壓疾病近年來的發病趨勢顯著提升。HDCP 在孕20 周后孕婦中較為多見，主要表現為高血壓、水腫以及蛋白尿等，結束分娩之后癥狀可消失，部分患者出現抽搐、臟器功能衰竭與昏迷等嚴重情況，對母嬰健康產生嚴重影響。腎損傷屬于HDCP 患者一類常見病理生理改變，近年來妊娠有關急性腎損傷患病人數不斷增多，常見原因包含大出血、先兆子癇和敗血癥等。早期腎損傷未及時得到診斷和治療，患者病情繼續加重，產生少尿和腎功能衰竭等癥狀，甚至引發腎實質受損，若伴隨腎皮質壞死，則腎功能受損無法逆轉。因此，HDCP 患者的腎損傷需早期得到診斷后及時治療，以改善其預后。當前，臨床診斷HDCP患者的腎損傷主要依靠實驗室檢查，以往采取血清肌酐、尿酸以及尿素氮靈敏度不高，尿白蛋白檢測結果易受到較多因素影響，需積極探索出更為可靠的腎損傷診斷標志物[1]。基于上述背景，本研究對2019年3月至2021年3月汝南縣人民醫院收治的HDCP 患者及正常孕婦進行對照觀察，通過對正常妊娠孕婦和HDCP 孕婦血清SCys C、UKIM-1 水平的檢測，分析血清SCys C、UKIM-1 水平與妊娠期高血壓早期腎損傷的相關性，具體內容如下：

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取2019年3月至2021年3月本院收治的110 例HDCP 伴早期腎損傷患者為腎損傷組，另選取同時間段內收治的100 例無腎損傷HDCP 患者為非腎損傷組、100 例正常妊娠孕婦為對照組。本研究經過本院醫學倫理學審批。

納入標準：①腎損傷組和無腎損傷組患者均與《婦產科學》第7 版[2]中有關HDCP 的診斷標準相符，且腎損傷組24 h 尿蛋白定量在0.3 ～2.0 g；②腎損傷組與無腎損傷組患者均是初次前往醫院就診，既往無HDCP 治療史；③對照組均為體檢無任何異常的孕婦；④具備正常的認知能力，可配合完成研究。

排除標準：①妊娠前已經確定存在腎實質疾病者；②伴糖尿病等能使腎臟出現病變的各類疾病者；③泌尿生殖系統感染或者出血者；④伴心力衰竭者；⑤伴胎膜破裂者；⑥甲狀腺功能處在低下狀態者；⑦拒絕或者中途退出此次研究者。

1.2 方法

1.2.1 儀器和試劑

雙人超凈工作臺( 蘇州凈化SW-CJ-2FD 型)；產自德國Eppendorf Centrifuge 5415R 的低溫高速離心機； -80℃立式低溫冰箱存放實驗標本Thermo(美國)；-20℃ 立式冰箱存放實驗標本( 中國海爾公司PW-25L262)；日立7600 生化分析儀( 國食藥監械( 進) 字2011 第2401157 號)；美國雷杜RT-3100 洗板機；酶標免疫檢測儀( 廠商：深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司；粵械注準：20192220393；型號：MR-96A)；北京九強生物技術公司生產的SCys C、UKIM-1 檢測試劑盒；上海躍進生產的恒溫水浴箱；GC-1200γ 放射免疫計數器(中國科大創新股份有限公司) 。

1.2.2 標本采集

入院后禁止研究對象劇烈運動及過量飲食，用生化促凝管采集研究對象清晨空腹8 h 狀態下肘靜脈血3 mL，離心5 min，取上清液備用；另囑咐受試者留取晨尿及任意中段尿5 mL，于1 500 r/min 離心機中離心5 min 后取上清液，將上清液置于-80℃冰箱中保存備用。排空膀胱后開始計時留24 h 尿液。

1.2.3 檢測方法

SCys C 檢測：抽取受檢者清晨空腹狀態下的靜脈血液3 ～4 mL，以3 500 r/min 離心10min 分離得到血清，采取免疫比濁法對血清內的SCys C 含量開展檢測，將標本加入緩沖液稀釋后，針對各個小試管做好標記，將試劑37 ℃保溫5 min 后分別加入蒸餾水管、標準品管及樣品血清管，混勻后37 ℃保溫10 min，利用全自動分析儀在波長340 nm 和700 nm 出測定免疫復合物濁度，根據吸光度增加量得出血清中胱抑素C 的含量。操作者嚴格依據說明書中有關內容開展操作。

UKIM-1 檢測：將試劑盒從4 ℃冰箱中取出，平衡室溫30 min，經酶聯免疫吸附方法開展檢測，操作嚴格依據試劑盒中說明書進行。將標準品濃度對數值當作橫坐標，其相對應的OD 值是縱坐標，采取Excel 進行標準曲線繪制，再結合樣本OD 值計算出UKIM-1 水平。

血肌酐(Scr) 及尿素氮(BUN) 均采用全自動生化分析儀檢測。

1.3 觀察指標

①比較各組孕婦的基線資料，包括年齡、確診時孕周、體重指數、孕次、產次、分娩經歷、文化程度、家庭人均月收入、醫療費用付費方式、職業等；②比較各組孕婦的血清CysC、尿KIM-1 和Scr、BUN 水平；③分析血清CysC、尿KIM-1 及Scr、BUN 之間的相關性。④分析血清CysC、尿β2-MG 和Scr、BUN 關于診斷妊娠期高血壓疾病早期腎損傷的敏感度、特異度、準確度及診斷界值，同時將SCys C 及UKIM-1 帶入Logistic 回歸方程計算，分析早期腎損傷的影響因素。

1.4 統計學方法

經SPSS23.0 統計軟件處理數據，計數資料以n(%)表示，行χ2檢驗；符合正態分布的計量資料以±s表示，行t檢驗，多組間計量資料對比采取方差分析，采用Pearson 相關性分析法檢驗兩變量間的相關性，采取Logistic 回歸方法分析早期腎損傷影響因素，將P＜0.05作為評定存在差異的標準。

2 結 果

2.1 三組基線資料對比

三組年齡、確診時孕周、體重指數、孕次、產次、分娩經歷、文化程度、家庭人均月收入、醫療費用付費方式、職業等基線資料對比，差異無統計學意義(P＞0.05)，詳見表1。

表1 三組基線資料對比結果(± s )Table 1 Comparative results of three groups of baseline data(± s )

表1 三組基線資料對比結果(± s )Table 1 Comparative results of three groups of baseline data(± s )

一般資料 腎損傷組(n=110) 非腎損傷組(n=100) 對照組(n=100) χ2/t P年齡/歲 28.14±4.18 28.05±4.26 28.34±4.60 0.050 0.960確診時孕周/周 35.45±5.12 35.16±5.08 35.24±5.26 0.634 0.528體重指數/(kg/m2) 23.45±0.54 23.50±0.58 23.28±0.67 0.368 0.714孕次/次 2.38±0.45 2.26±0.50 2.30±0.54 1.600 0.400產次/次 1.48±0.32 1.50±0.28 1.46±0.35 0.203 0.674分娩經歷/例 0.060 0.806初產婦 66 62 60經產婦 44 38 40文化程度/例 0.026 0.979初中及以下 25 22 20高中及中專 58 53 51大專及以上 27 25 29家庭人均月收入/元 0.575 0.565＜2 500 25 22 25 2 500 ～5 000 48 49 47＞5 000 37 29 28醫療費用付費方式/例 0.059 0.808自費 25 20 19社保 85 80 81職業/例 0.069 0.945自由職業 32 29 28工人 15 18 16農民 10 11 12干部 19 17 16職員 24 16 18其他 10 9 10

2.2 三組SCys C 及UKlM-1 水平對比

三組SCys C 及UKIM-1 水平對比，差異有統計學意義(P＜0.05)；腎損傷組的SCys C 及UKIM-1、BUN 水平均高于非腎損傷組及對照組(P＜0.05)，Scr 水平低于非腎損傷組及對照組(P＜0.05)，非腎損傷組和對照組的SCys C 及UKIM-1、BUN、Scr 水平對比，差異無統計學意義(P＞0.05)，詳見表2。

表2 三組SCys C 及UKIM-1 水平對比(± s )Table 2 Comparative results of SCys C and UKIM-1 levels in three groups(± s )

表2 三組SCys C 及UKIM-1 水平對比(± s )Table 2 Comparative results of SCys C and UKIM-1 levels in three groups(± s )

注：和非腎損傷組及對照組對比，①P ＜0.05；和對照組對比，②P ＞0.05。

組別 例數 SCys C/(mg/L) UKIM-1/(μg/L) BUN/(mmol/L) Scr/(μmol/L)腎損傷組 110 1.50±0.34① 1.55±0.50① 6.28±2.35 63.95±125.36非腎損傷組 100 1.05±0.28② 0.61±0.20② 4.75±3.86② 72.75±130.28②對照組 100 0.98±0.30 0.58±0.14 4.20±2.64 70.95±125.36 F 88.820 299.910 3.449 0.063 P 0.001 0.001 0.001 0.942

2.3 血清SCys C 與KlM-1、BUN、Scr 的相關性分析

經Pearson 相關分析顯示，血清SCys C 與KIM-1、BUN、Scr 均呈正相關，相關系數分別0.756、0.537、0.485。UKIM-1 與BUN、Scr 均呈正相關，相關系數分別0.628、0.634，BUN 與Scr 呈正相關，相關系數為0.497(P＜0.05)，詳見表3。

表3 血清SCys C 與KIM-1、BUN、Scr 的相關性分析Table 3 Correlation analysis of serum SCys C with KIM-1, BUN, and Scr

2.4 早期腎損傷出現的Logistic 回歸分析結果

將SCys C、UKIM-1 帶入Logistic 回歸方程計算，發現SCys C、UKIM-1 均是判斷早期腎損傷出現的預測因子，OR＞1，詳見表4。

表4 早期腎損傷出現的Logistic 回歸分析結果Table 4 Logistic regression analysis of early renal injury

2.5 血清CysC、尿液KlM-1 預測妊娠期高血壓孕婦早期腎損傷的ROC 曲線分析結果

血清CysC 預測妊娠期高血壓孕婦早期腎損傷的ROC曲線下面積(AUC) 為0.769 (95%CI 0.528 ～0.804)，以0.79 mg/L 為截斷值時，其靈敏度為86.67% ，特異 度 為68.61%; 尿 液KIM-1 的AUC 為0.864 (95%CI 0.713 ～0.925)，以3.24 μg/L 為截斷值時，其靈敏度為89.99%，特異度為85.71%。

3 討 論

HDCP 作為妊娠階段女性一類常見疾病，是指發生于妊娠期間的高血壓疾病。該病的發病與營養、遺傳、免疫調節、血管內皮損傷等因素相關。病情惡性進展下，該病會對產婦的腎臟、心臟等器官造成損傷，甚至會誘發腦水腫、抽搐、腦出血等問題，嚴重威脅孕婦和胎兒生命健康。HDCP 和產科出血以及心臟病是孕婦的三大主要死因[3]。伴孕周增加，子宮動脈血液供應相應增多，血管阻力降低，發生HDCP 的機率上升。一項流行病學調查發現[4]，妊娠期高血壓的發病率達6.5%，好發年齡段為25 ～29 歲，其中單胎妊娠的患者占比更是高達82.1%，提示該妊娠期合并癥在產科較為常見，HDCP 作為產科一類重要的并發癥，已經成為醫學研究中的熱點問題。HDCP 能引發腎小球擴張和內皮細胞腫脹，血肌酐與尿素氮水平迅速增高，腎小球濾過率降低[5]。早期無法及時有效診斷并采取合理治療措施，能引起嚴重不良后果。因此積極尋找到特殊、敏感的早期標志物有著重要意義。

UKIM-1 屬于早期腎功能受損一個重要的預警指標，其屬于跨膜蛋白，在腎臟出現毒性受損或者缺血期間，去極化近端小管細胞能過度表達出UKIM-1。當前，UKIM-1 已在多項研究中被確定和腎功能受損程度相關，當血清中的UKIM-1 水平≥3.25 μg/L 代表孕婦存在HDCP 風險，同時需重視孕婦的腎功能。據有關研究發現[6]，UKIM-1 于缺血性腎受損中尤為敏感，于其他臟器內表達較少。血清UKIM-1 水平上升，腎小球濾過率迅速降低，為UKIM-1 早期預警HDCP 患者的腎損傷帶來可靠依據。SCys C 屬于一類半胱氨酸蛋白酶抑制劑，其分子量較低，可以通過腎小球自由濾過，并且完全被腎小管上皮細胞吸收分解，從而清楚地表達腎小球濾過率的變化，是當前唯一一種代謝途徑[7]。BUN 是血漿中除蛋白質外的一種含氮化合物，可直接通過腎小球濾過途徑排出體外，并且在患者發生腎功能不全失代償表現時可直接呈高表達狀態，從而反映人體腎小球濾過功能；而Scr 屬于一種肌肉代謝產物，可通過尿液排出體外，在腎小球濾過功能降低時，人體Scr 水平會明顯上升，進而一直被視為反映腎功能的常見指標[8]。據有關研究顯示[9]，SCys C 能被用于腎功能評估，其特異度和敏感度較高，能評定急性腎臟損傷患者的病情及預后，且該項指標水平不會受性別、年齡、體質量以及種族影響。

本次研究發現， 腎損傷組SCys C 及UKIM-1、BUN、Scr 水平較非腎損傷組及對照組高(P＜0.05)，非腎損傷組和對照組SCys C 及UKIM-1、BUN、Scr 水平對比，差異無統計學意義(P＞0.05)，提示HDCP 患者的SCys C 及UKIM-1 水平存在異常升高。除BUN、Scr 兩項目前已被臨床認可的指標外，SCys C 及UKIM-1同樣值得應用于HDCP 患者的早期腎損傷篩查中。此外，經Pearson 相關分析顯示，血清SCys C 與KIM-1、BUN、Scr 均呈正相關，相關系數分別0.756、0.537、0.485。UKIM-1 與BUN、Scr 均呈正相關，相關系數分別0.628、0.634，BUN 與Scr 呈正相關，相關系數為0.497(P＜0.05)。由本研究結果可以看出血清CysC、尿KIM-1 是檢測妊娠期高血壓疾病早期腎損傷的理想指標，診斷界值分別為0.79 mg/L、3.24 μg/L，當檢測結果高于界值水平時，考慮患有妊娠期高血壓伴腎損傷的可能性較大。這和陳素萍[10]研究中提出對照組和HDCP組SCys C 與KIM-1 水平存在正相關(r=0.12，P=0.022;r=0.30，P=0.514)。SCys C 與KIM-1 曲線下面積分別為0.739 和0.551，診斷的靈敏度和特異性較好的結論相一致，佐證本研究并非偶然。但本文與之不同之處在于，我們將根據孕婦是否出現腎損傷進行二次分組，充分展示上述指標在是否合并腎損傷患者中的差異性。值得注意的是，血清CysC 的敏感度及特異度較低，易受某些外在因素影響，在診斷過程中存在一定的假陽性率和假陰性率，因此，我們建議臨床診斷中不可單純依靠某一種指標盲目檢測，多項指標聯合檢測才能明顯提高妊娠期高血壓疾病及早期腎損傷的診斷效能[11]。此外，本次研究的創新之處在于觀察了早期腎損傷的影響因素，最終發現，SCys C、UKIM-1 均是判斷HDCP 患者早期腎損傷出現的預測因子，OR值＞1，提示兩項指標對HDCP患者的早期腎損傷發生均有著一定預測價值。

綜上所述，血清SCys C、 尿液UKIM-1 在診斷HDCP患者的早期腎損傷中有著重要價值，能為臨床評定患者病情和制定后續治療方案提供重要參考依據。但本次研究中仍存在一定不足，如納入的樣本數不多，且研究時間不長，未對HDCP 伴早期腎損傷患者的遠期預后開展統計分析等，這些均需在日后研究中加以完善，以得到更為全面、客觀的研究結果，更好地指導臨床實踐。