甲功五項化學發光免疫分析的基質效應對臨床測值的影響

李妮 柴琳

摘要：目的：分析甲功五項化學發光免疫分析的基質效應對臨床測值的影響。方法：選取甲狀腺功能五項高值血清，觀察T3、T4、FT3、FT4、TSH項目牛血清、馬血清、山羊血清、水解明膠、BSA、PBS、生理鹽水、正常人血清、甲減人血清的基質效應對于臨床測試值的影響。結果：T3項目牛血清、水解明膠基質、BSA基質有明顯的基質效應;T4項目牛血清、馬血清、水解明膠基質、BSA基質、PBS、生理鹽水有明顯的基質效應;FT3項目牛血清、水解明膠基質、BAS基質、PBS、生理鹽水有明顯的基質效應;FT4項目牛血清、馬血清、水解明膠基質、BSA基質、PBS、生理鹽水有明顯的基質效應。THS項目牛血清、馬血清、山羊血清、水解明膠基質、BSA基質、PBS、生理鹽水、正常人血清、甲減人血清無基質效應。結論：使用甲減人的血清對于T3、T4、FT3、FT4、TSH項目高值血清進行稀釋，甲亢人血清在促甲狀腺激素稀釋中具有比較理想的稀釋效果。

關鍵詞：甲功五項;化學發光免疫分析;基質效應;臨床檢測

血清中甲狀腺激素水平是甲狀腺疾病診斷的重要依據，化學發光免疫分析能夠對臨床樣本進行比較準確的檢測，但是在臨床檢驗工作中，會遇到特殊患者的某個血清樣本濃度測值超過了診斷試劑盒檢測線性范圍上限。為了得到準確結果一般會將這些樣本進行稀釋后再進行檢測，但有些樣本倍比稀釋后的結果明顯不成比例，這主要是由于基質效應引起的差異[1]。本研究主要分析甲功五項化學發光免疫分析的基質效應對臨床測值的影響。現報道如下：

1資料與方法

1.1 樣本及試劑

樣本為馬血清、牛血清、水解明膠、山羊血清、牛血清白蛋白BSA。試劑為2H2O、KH2PO4、Na2PHO4、12H2O、KCL、NaCL

1.2 檢測方法

選取2020年我院門診以及住院部接受治療的100例甲狀腺或疑似甲狀腺患者，在空腹狀態下抽取患者的靜脈血，對血液進行離心處理，吸取上層血清。將馬血清、牛血清、山羊血清、甲亢人血清、正常人血清以及甲減人血清均置于56℃的環境中進行滅活，滅活時間為30 min。嚴格按照T3、T4、FT3、FT4、TSH說明書進行稀釋。

1.3 數據處理

所有數據均納入chemclin3.2版發光分析軟件進行處理。

2結果

2.1 T3項目高值血清不同稀釋基質液的基質效應情況

T3項目牛血清、水解明膠、BSA有明顯的基質效應，正常人血清、甲減人血清無基質效應。見表1。

2.2 T4項目高值血清不同稀釋基質液的基質效應情況

T4項目牛血清、馬血清、水解明膠、BSA、PBS、生理鹽水有明顯的基質效應，正常人血清、甲減人血清無基質效應。見表2。

2.3 FT3項目高值血清不同稀釋基質液的基質效應情況

FT3項目牛血清、水解明膠、BAS、PBS、生理鹽水有明顯的基質效應，正常人血清、甲減人血清無基質效應。見表3。

2.4 FT4項目高值血清不同稀釋基質液的基質效應情況

FT4項目牛血清、馬血清、水解明膠、BSA、PBS、生理鹽水有明顯的基質效應，正常人血清、甲減人血清無基質效應。見表4。

2.5 THS項目高值血清不同稀釋基質液的基質效應情況

THS項目牛血清、馬血清、山羊血清、水解明膠、BSA、PBS、生理鹽水、正常人血清、甲減人血清無基質效應。見表5。

3討論

臨床生物化學檢測分析基質效應已經受到廣泛重視，最早是在酶活力測定中用人工制備的參考物質時發現的。基質效應幾乎存在所有的樣品之中，測定樣品中任何一個分析物質時，都不可避免地受到基質效應的影響。多年以來，基質效應一直是影響實驗室檢測的一個重要因素。在酶法分析以及化學分析中，普遍存在檢測準確性的問題。基質效應與檢測方法以及校準品的選取有著密切的關系，會直接導致定標后測定結果出現偏差[2]。

甲狀腺功能異常是一種臨床常見的內分泌疾病。甲狀腺分泌的兩種主要激素為T3和T4，其中T3的分子量為651D，T4的分子量為770D。血循環中的T3有80%來自游離T4，通過酶的作用下在外周組織脫去一個碘原子而成，直接來自甲狀腺的T3僅為20%。血液中的T3和T4有99.7%與甲狀腺結合球蛋白、甲狀腺結合前蛋白以及白蛋白等結合，只有少部分呈游離狀態形成FT3、FT4[3]。與甲狀腺結合球蛋白等結合的T3、T4無生物活性，只有游離的甲狀腺激素才能通過細胞膜進入細胞，與細胞內受體結合，從而發揮相應的生理作用。甲狀腺功能狀態取決于FT3和FT4的濃度[4]。T3、T4、FT3和FT4均是小分子物質，一般測定試劑的方法原理為競爭法，使用T3/T4抗體作為固相捕獲抗體，標志物對T3/T4抗原與血清中的T3/T4競爭，檢測信號與T3/T4濃度呈反比。在本研究中，T3、T4、FT3、FT4均存在基質效應。分析原因為，在動物血清中的T3/T4與人血清中的T3/T4結構完全一致，動物血清本身的T3/T4含量就對人血清T3/T4測值產生影響。另外動物血清蛋白成分和含量與人血清不同，在兩者進行混合的過程中，會破壞人血清內部原有的結合激素與游離激素的平衡，產生基質效應。生理鹽水以及緩沖液在稀釋過程中改變了TGB等含量，同樣會破壞人血清內部原有的結合激素與游離激素的平衡，產生基質效應，4種激素指標內含量不同，動態平衡的系數也存在明顯的差異，反映出了基質效應的差異[5]。TSH是調節甲狀腺功能的主要激素，從本次的檢查結果來看，9種基質對于TSH項目幾乎沒有基質效應，可能是牛血清、馬血清以及山羊血清等動物血清的TSH結構與人類不同[6]。

綜上所述，使用甲減人的血清對T3、T4、FT3、FT4、TSH項目高值血清進行稀釋，甲亢人血清在促甲狀腺激素稀釋中可具有比較理想的稀釋效果。

參考文獻

[1]Negro R，Formoso G，Mangieri T，Pezzarossa A，et al.Levothyroxine treatment in euthyroid Pregnant women with autoimmune thyroid disease： effects on obstetrical comPlications[J].J Clin Endocrinol Metab，2006，91（7）：2587-2591.

[2]郭立民.化學發光免疫分析甲功五項的基質效應及臨床意義[J].世界最新醫學信息文摘，2015，15（1）：130，135.

[3]Ye JM.The effects of matrix and calibration mode on the measurement of chloride electrode[J].Shanghai J of Med Lab Sci，2017，17（1）：16-18.

[4]Wu ZR.Changes of Myocardial Enzymes in Patients with Primary HyPothyroidism amd HyPerthyroid[J].Labeled Immunoassays Clinical Medicine，2019，16（6）：353-355.

[5]張堅，劉永太.甲功五項化學發光免疫分析的基質效應對臨床測值的影響[J].臨床檢驗雜志：電子版，2019，9（3）：41-42.

[6]余江.甲功五項化學發光免疫分析的基質效應對臨床測值的影響[J].臨床醫學，2019（3）：332-333.