胸苷激酶1在痛風性關節(jié)炎、類風濕性關節(jié)炎和骨關節(jié)炎中的表達差異及臨床意義*

陳 剛，謝文光，周京國，黨萬太

成都醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院 風濕免疫科(成都 610500)

胸腺嘧啶核苷激酶 (thymidine kinase，TK)表達與DNA合成和細胞增殖密切相關[1]，其形式有細胞質胸苷激酶1 (thymidine kinase 1,TK1) 和線粒體胸苷激酶2 (thymidine kinase 2,TK2)兩種。TK1與細胞增殖有關，而線粒體DNA前體合成需要TK2，TK1表達量在細胞周期G1-S期快速增加，然后在G2期迅速下降[2]。20世紀90年代，TK1作為一種細胞增殖標志物被提出[3]，血清高水平TK1蛋白已作為診斷和分類多種癌癥類型的生物標記物。C反應蛋白(C-reactive protein, CRP)主要在肝臟中產生，是一種有效的全身炎癥指標。CRP與炎癥刺激的嚴重程度和持續(xù)時間有關，不局限于某種特定疾病產生，在與全身炎癥相關的各種疾病中都發(fā)現(xiàn)了血清高CRP濃度[4]。痛風被認為是一種自發(fā)炎性疾病，尿酸單鈉晶體(monosodium urate，MSU)的產生會刺激Nod樣受體熱蛋白結構域相關蛋白3(NLR family pyrin domain containing 3，NLRP3)炎癥體的激活，導致IL-1β和IL-18等促炎性細胞因子釋放，引起急性炎癥反應[5]。在類風濕性關節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)中，血清CRP水平一直被認為是疾病活動的客觀衡量標準，持續(xù)升高的CRP水平不僅對RA具有預測價值，也是臨床檢測治療效果的重要指標[6]。骨關節(jié)炎(osteoarthritis，OA)通常被認為是“非炎性”關節(jié)病。研究[7]表明，局部炎癥在其發(fā)病機制中起到一定作用。本研究通過檢測痛風性關節(jié)炎(gouty arthritis，GA)、RA和OA患者的TK1、血尿酸水平(uric acid，UA)、CRP、紅細胞沉降(erythrocyte sedimentation rate，SR)、白細胞計數(shù)(white blood cell，WBC)、紅細胞計數(shù)(red blood cell，RBC)和血小板計數(shù)(platelet，PLT)，探討TK1在GA、RA和OA中的表達差異及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2018年6月至2019年6月成都醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院風濕免疫科住院患者233例為研究對象。GA診斷標準依據(jù)1977年ACR痛風診斷標準[8]；RA診斷標準依據(jù)2015年ACR/EULAR診斷標準[9]；OA診斷標準依據(jù)2009年EULAR診斷標準[10]。納入標準：符合GA、RA、OA診斷標準患者。排除標準：嚴重的肝臟、腎臟、血液系統(tǒng)疾病；其他類型免疫疾病；糖尿病、高血壓、高血脂、心腦血管疾病及藥物、放療等引起的繼發(fā)性痛風。其中，GA組101例，男88例，女13例，年齡(58.4±14.9)歲；RA組56例，男18例，女38例，年齡(58.2±10.5)歲；OA組76例，男19例，女57例，年齡(56.7±12.3)歲。3組患者在性別、年齡方面比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

所有入選對象均晨起空腹抽取靜脈血液樣本進行檢測，通過DxC800全自動生化分析儀儀器(美國貝克曼公司)檢測UA(酶法測定)、CRP(化學發(fā)光法測定)、SR(魏多法測定)；CIS-2化學發(fā)光數(shù)字成像(中國華瑞同康公司)分析儀檢測TK1(酶聯(lián)免疫吸附試驗法測定)；sysmex XN-9000全自動血液分析儀(日本神戶公司)檢測WBC、RBC、PLT(直流檢測方法測定)。

1.3 統(tǒng)計學方法

2 結果

2.1 3組患者實驗室指標的比較

3組患者中，UA、CRP、SR、TK1、WBC、RBC、PLT水平比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；組間兩兩比較發(fā)現(xiàn)，GA組UA、CRP、WBC高于RA組和OA組(P<0.05)；GA組和RA組SR、TK1高于OA組(P<0.05)；GA組RBC高于RA組(P<0.05)；RA組PLT高于GA組和OA組(表1)。

表1 3組患者各項指標的比較

2.2 相關性分析

通過Spearman相關性分析發(fā)現(xiàn)，3組患者UA與CRP、WBC、RBC均呈正相關(P<0.05)；CRP與SR、TK1、WBC、PLT表達呈正相關(P<0.05)；SR與TK1、WBC、PLT呈正相關(P<0.05)，而與RBC呈負相關(P<0.05)；TK1水平與PLT呈正相關(P<0.05)；WBC與PLT呈正相關(P<0.05)(表2)。RA組患者中，TK1與CPR、SR呈正相關(P<0.05)；OA組患者中，TK1與CPR呈正相關(P<0.05)(表3)。

表2 3組患者中各項指標相關性分析

表3 TK1與3組患者中各項指標相關性分析

3 討論

GA、RA、OA是風濕免疫科常見的炎性關節(jié)病，發(fā)病過程均存在不同程度炎癥反應。痛風是嘌呤代謝紊亂或尿酸排泄障礙引起UA增高， MSU結晶析出并沉積在關節(jié)及組織的臨床綜合征[11]。MSU形成能夠激活NLRP3炎性體，導致IL-1β、IL-18等促炎性細胞因子的釋放，炎性因子和蛋白酶等促使白細胞趨化，致使更多吞噬了MSU的白細胞聚集、破裂，釋放炎性成份，導致炎癥呈瀑布式級聯(lián)放大[11]。RA是一種全身炎癥的自身免疫性疾病，特征是持續(xù)性滑膜炎、全身炎癥反應和特異性自身抗體的產生[12]。OA曾被定義為一種非炎癥性關節(jié)病，但目前公認的是，炎癥反應也是該疾病的一個重要組成部分，除了滑膜細胞外，關節(jié)軟骨細胞和其他關節(jié)細胞也能表達炎癥介質[13]。本研究中，GA組UA水平明顯高于RA和OA組，且其均值水平(514 μmol/L)高于正常人群UA值參考上限(420 μmol/L)，表明GA組UA水平呈增高狀態(tài)，這與痛風發(fā)病特征相吻合。在GA、RA、OA組患者中，CRP、SR水平均明顯高于健康人群CRP參考上限(3 mg/L)和SR參考上限(15 mm/h)，表明3組患者中存在不同程度炎癥反應，GA組患者中CRP和SR水平均高于OA組，提示痛風患者炎癥反應程度可能較OA患者更加劇烈。

TK1 是一種與細胞 DNA 合成和細胞增殖密切相關的激酶，作為腫瘤標志物之一，已大量應用于國內外臨床和科研中，對腫瘤患者的病情評估具有重要的參考價值[14]。Tajima等[15]發(fā)現(xiàn)，急性結節(jié)性炎癥患者中TK1水平明顯升高，而在通過糖皮質激素抗炎治療后TK1水平下降；Grobman等[16]發(fā)現(xiàn)，在呼吸系統(tǒng)炎癥患者中，血清 TK1水平較呼吸系統(tǒng)腫瘤患者和健康人群明顯增高，且與CRP水平高度相關,表明TK1的異常表達可能與炎癥反應密切相關。本研究通過對比GA、RA、OA患者中TK1水平，發(fā)現(xiàn)TK1表達在GA、RA中高于OA患者，提示TK1水平可能與患者體內炎癥反應相關。進一步通過Spearman相關性發(fā)現(xiàn)，TK1水平與CRP、PLT均呈正相關。和CRP相似，血小板不僅在凝血過程中必不可少，在炎癥反應中也發(fā)揮重要作用，血小板能夠聚集在損傷部位，招募炎性細胞釋放抗炎因子來調節(jié)炎癥反應，在許多傳染病以及無菌性炎癥(包括動脈粥樣硬化、血管再狹窄、急性肺損傷和移植排斥反應)中，血小板激活和積累可以調控免疫激活，增強病原體清除，減輕嚴重炎癥期間的間接組織損傷[17]。本研究中，RA患者的PLT水平高于GA、OA患者，與TK1、CRP、SR、WBC均呈正相關，表明TK1和PLT可以作為一項判斷炎癥反應發(fā)生的檢測指標。

綜上所述，在GA、RA、OA中，TK1與CRP、SR、PLT等炎癥指標密切相關，TK1可能是炎癥反應的一個重要指標。