怒江2 種漆樹籽不同部位及提取方法對漆油脂肪酸的影響

解 麗 ，趙 歆 ，吳少雄 ，劉 鵬 ，周建于

（1）昆明醫科大學公共衛生學院；2）藥學院;云南 昆明 650500）

中國是漆樹（Toxicodendron verniciflua）的原產地，在云南省怒江州各少數民族獨特的飲食習俗中，積淀了豐富的漆樹文化內涵，當地居民常以漆樹籽制作各種生活美食和治療藥物[1?2]。漆樹籽分為外果皮、中果皮和果核3 層，外果皮和中果皮組成籽殼，占全果40%；中果皮可提取漆蠟，含量高達60%以上。果核由內果皮及果仁構成，占全果重60%，果核可榨取漆油，含漆油25%～40%。傳統工藝對漆籽油脂的提取均未將漆蠟和漆油進行完全分離。怒江漆蠟（油）在當地稱作“碧乃金”，被認為具有食、藥保健功能。對分娩后的產婦有恢復體能、提神補氣、催乳、補血、止血、消炎、止痛、舒筋活血、提高機體免疫力的功效。根據漆籽的果皮類型可分為白漆籽與黑漆籽，分別可榨出白漆樹油與黑漆樹油[3?4]。目前對于怒江漆油這種地方特色油脂的營養成分和保健功能研究較少，白漆油和黑漆油的肪酸組成及含量的區別尚不清楚。

本研究以經過不同原料壓榨得到的白漆樹籽油與黑漆樹籽油為實驗材料，采用氣相色譜-質譜法（gas chromatography-mass spectrometry,GCMS），對它們的脂肪酸成分進行初步分析，為怒江漆樹種籽油的研究和系統開發提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

白漆樹籽、黑漆樹籽：購買于云南怒江大型農貿市場，瀘水市、福貢縣、蘭坪縣各1 份，每份2000～3000 g；市售食用白漆樹籽油、市售食用黑漆樹籽油：市售食用漆油是經傳統壓榨方法壓榨而得，購買于瀘水市、福貢縣、蘭坪縣各1 份，每份1000～2000 g，固態。乙醚：國藥集團；石油醚（30 ℃～60 ℃）：西隴科學股份有限公司；氫氧化鈉：上海試四赫維化工有限公司；氫氧化鉀：上海申博化工有限公司。

1.2 儀器與設備

氣相色譜質譜聯用儀Nexis GC-2030s：島津國際貿易（上海）有限公司；電熱恒溫水浴鍋：上海森信實驗儀器有限公司；電熱鼓風干燥箱DHG-9240A：上海鴻都科技有限公司；電子分析天平：鄭州萬博儀器設備有限公司；HCD-1820-Ⅰ型純水機：重慶恒諾水處理設備有限公司；1000 克搖擺式萬能高速粉碎機：上海比朗儀器有限公司；索式提取器：實驗室組裝.

1.3 方法

1.3.1 樣品處理采集的3 份白漆樹籽與黑漆樹籽樣品各取200 g 混合，用石磨、鑷子將果皮、果核分離，洗凈風干，粉碎后干燥密封備用。

采集的3 份市售食用白漆樹籽油、市售食用黑漆樹籽油樣品各取500 g 混合，儲存于通風干燥處。

1.3.2 漆油的提取取處理好的上述樣品15 g，用濾紙扎緊放入索式提取器加入石油醚后，在一定條件下水浴回流熱提，提取完畢后蒸發溶劑，冷卻后得到漆油。（1）漆籽仁油：采用果仁提取；（2）漆籽油：由整顆漆籽果皮和果核提取，含有漆油和部分漆蠟；（3）市售食用漆籽油：由整顆漆籽包括果皮和果核，經粉碎、機械壓榨加工而成，含有漆油和部分漆蠟,購買時已經是成品。

1.3.3 漆油油脂的指標測定總脂肪含量測定。（1）參照GB 5009.6—2016[5]食品中脂肪的測定中索氏提取法提取。（2）脂肪酸組成分析。脂肪酸甲酯化：參照國家標準GB 5009.168—2016 要求[6]，將白漆籽仁油、黑漆籽仁油、白漆籽油，黑漆籽油、市售食用白漆樹籽油、市售食用黑漆樹籽油6 種油脂各稱取0.3 g 樣品于5 mL 刻度試管中，加入2 mL 石油醚-苯（1∶1）0.4 mol/L 氫氧化鉀-甲醇溶液后搖勻，靜置10 分鐘，加入蒸餾水至刻度，靜置分層后取上層清液進行GC-MS 分析。每個樣測定3 次，取平均值。

氣相色譜條件：色譜柱：30 m×0.25 mm×0.25 μm 的DB-5MS 石英毛細管柱；程序升溫：50 ℃保持5 min，以5 ℃/min 的速率升至190 ℃，保持5 min，以10 ℃/min 的速率升至280 ℃，保持15 min。進樣口溫度：230 ℃；進樣模式：載氣為高純氦，柱流量為1 mL/min；掃吹流量：3 mL/min；分流比：100∶1；進樣量：1 μL。

質譜條件：電離方式為EI；離子源溫度280 ℃；電子能量：70 eV；溶劑延遲：1.5 min；采集方式：scan；質量掃描范圍：40～550 amu。

1.4 統計學處理

GC-MS 檢索庫：NIST；采用峰面積歸一化法定量。實驗數據所有數據均為3 組平行實驗，采用均數±標準差（）表示，使用SPSS 21.0 統計軟件進行單因素方差分析，以P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3 種白漆樹籽油的脂肪酸組成

對不同原料和提取方法獲得的3 種白漆樹種子油樣品色譜圖中主要峰進行全面質譜掃描分析，由GC-MS 譜圖（圖1～圖3）以及表1 可知，白漆籽仁與白漆籽總脂肪平均含量分別為7.57 g/100 g和19.93 g/100 g，均含有肉豆蔻酸等13 種脂肪酸。其中白漆籽仁油中飽和脂肪酸6 種，占脂肪酸總量20.20%，以棕櫚酸（16.73%）和硬脂酸（2.94%）為主。不飽和脂肪酸7 種，占79.78%，其中單不飽和脂肪酸4 中，以油酸含量最高（14.77%）；多不飽和脂肪酸3 種，以亞油酸（63.2%）和亞麻酸（1.11%）含量較高。

表1 不同漆籽油的脂肪酸組成的測定結果（n=3，）Tab.1 The determination results of fatty acid composition of different lacquer seed oils

表1 不同漆籽油的脂肪酸組成的測定結果（n=3，）Tab.1 The determination results of fatty acid composition of different lacquer seed oils

注：表1中僅列入了已確定的脂肪酸組分，而尚未確定的脂肪酸尚未列入其中；“－”為未檢出；同行字母不同代表差異有統計學意義（P <0.05）。

圖1 白漆籽仁油氣質聯用圖譜Fig.1 GC-MS chromatogram of white lacquer kernel oil

圖2 白漆籽油氣質聯用圖譜Fig.2 GC-MS chromatogram of white lacquer seed

圖3 市售食用白漆籽油氣質聯用圖譜Fig.3 GC-MS chromatogram of edible white paint sold in the market

白漆籽油中飽和脂肪酸6 種，占71.29%，以棕櫚酸（65.8%）和硬脂酸（4.76%）為主。不飽和脂肪酸7 種，總含量為28.72%；其中單不飽和脂肪酸4 中，以油酸含量最高（15.77%）；多不飽和脂肪酸3 種，以亞油酸（12.3%）含量最高。

而市售食用白漆籽油中檢測的飽和脂肪酸主要為棕櫚酸（64.63%）和硬脂酸（5.65%）；單不飽和脂肪酸為油酸（19.33%），多不飽和脂肪酸主要是亞油酸（7.38%）。此外，市售食用白漆油中十六烯酸、1，3－二硬脂酸甘油酯、十六碳二酸、二十烷二酸、十七酸、三反油酸甘油酯等6 種脂肪酸，總含量占比約2%左右。

2.2 3 種黑漆樹籽油的脂肪酸組成

對3 種黑漆樹種子油樣品色譜圖中主要峰進行全面質譜掃描分析，由GC-MS 譜圖（圖4-圖6）和表1 可知，黑漆籽仁與黑漆籽總脂肪平均含量分別為11.60 g/100 g 和42.67 g/100 g，黑漆籽仁油中含14 種脂肪酸，比黑漆籽油多了一種二十三碳酸。其中黑漆籽仁油中飽和脂肪酸6 種，總含量為24.86%，以棕櫚酸（20.97%）和硬脂酸（3.14%）為主。不飽和脂肪酸8 種，總含量為75.10%；其中單不飽和脂肪酸4 中，以油酸含量最高（13.23%）；多不飽和脂肪酸4 種，以亞油酸（58.67%）和亞麻酸（1.55%）含量較高。

圖4 黑漆籽仁油氣質聯用圖譜Fig.4 GC-MS chromatogram of black lacquer kernel oil

圖5 黑漆籽油氣質聯用圖譜Fig.5 GC-MS chromatogram of black lacquer seed

圖6 市售食用黑漆籽油氣質聯用圖譜Fig.6 GC-MS chromatogram of edible black lacquer oil sold in the market

黑漆籽油中飽和脂肪酸6 種，總含量為76.08%，以棕櫚酸（70.5%）和硬脂酸（4.06%）為主。不飽和脂肪酸7 種，總含量為23.90%；其中單不飽和脂肪酸4 中，以油酸含量最高（18.0%），棕櫚一烯酸（1.25%）；多不飽和脂肪酸3 種，以亞油酸（4.23%）含量最高。

市售食用黑漆籽油飽和脂肪酸主要為棕櫚酸（70.47%）和硬脂酸（5.31%）；單不飽和脂肪酸為油酸（16.97%），多不飽和脂肪酸主要是亞油酸（1.25%）。市售食用黑漆油中十六烯酸、1，3-二硬脂酸甘油酯、十六碳二酸、二十烷二酸、14-甲基十六烷酸、順式-十八烷酸、山崳酸、十六酸乙烯酯等8 種脂肪酸成分，與黑漆籽和黑漆仁油成分不盡相同。總含量約3%左右。

2.3 黑、白2 種漆樹籽油的脂肪酸組成比較

以同樣原料和提取方法得到的黑、白兩種漆籽油，它們的脂肪酸組成和含量相似。6 種不同的油脂不飽和脂肪酸均以棕櫚酸和硬脂酸為主，以完整原料提取的漆籽油棕櫚酸含量更高，而僅以果仁提取的漆籽仁油棕櫚酸含量較少（P<0.05），見表1。對于單不飽和脂肪酸，6 種油脂以油酸含量最高，含量由多到少分別為：市售食用白漆油 >黑漆籽 >市售食用黑漆油 >白漆籽 >黑漆籽仁油 >白漆籽仁油（P<0.05），見表1，圖1～圖6，黑漆籽油中還含有較為豐富的棕櫚一烯酸；而多不飽和脂肪酸以亞油酸含量最高，從果仁中提取的漆籽仁油不飽和脂肪酸含量更豐富，亞油酸含量排序：白漆籽仁油 >黑漆籽仁油 >白漆籽 >市售食用白漆油 >黑漆籽 >市售食用黑漆油（P<0.05），不同漆油中亞麻酸含量：黑漆籽 >白漆籽 >白漆籽仁油 >黑漆籽仁油（P<0.05），見表1，圖1～圖6。

3 討論

從脂肪酸種類來看，市售食用漆籽油檢測的脂肪酸種類少于漆籽仁油和漆籽油，脂肪酸以飽和脂肪為主，含量占70%以上，又以棕櫚酸含量最高，而不飽和脂肪酸種類較少，亞麻酸未檢出。這個結果與李浩成等研究怒江州4 個主要產地及不同加工方式漆油成分分析一致[7]。漆籽油以整顆漆樹籽為原料，索氏提取后進行脂肪酸測定，檢出脂肪酸種類多于市售漆籽油，但含量仍以棕櫚酸占主導的飽和脂肪為主。不飽和脂肪酸含量較少，以油酸為主，占比15%～18%。這個結果可能與原料選擇、提取壓榨和貯存條件有關。市售食用漆籽油采用傳統工藝，將整個漆樹籽粉碎后進行機械壓榨，原料中包含有果皮和果核，含有漆油和部分漆蠟，因此成品呈固態，當地居民不做任何包裝就進行貯存，產品極易被氧化，因此營養價值損失較大。漆籽油提取原料與市售食用漆籽油一致，因此主要成分含量較為相似。但由于沒有長時間暴露于空氣貯存，因此不飽和脂肪酸種類較多。此外，市售食用白漆油與市售食用黑漆油均含有十六碳二酸、二十烷二酸兩種二元酸。值得注意的是，當地少部分居民食用傳統工藝獲得的漆油，會出現過敏性皮炎 皮疹等癥狀[8?9]，可能與果皮也參與其中進行壓榨，含有漆酚等化學成分有關。

漆籽仁油提取原料為最核心的果仁部分，提取方式為索氏提取，成分以漆油為主。因此，脂肪酸種類豐富，并以不飽和脂肪酸為主，含量達70%以上，亞油酸含量高達60%左右。這與王佳等對怒江地區4 種類型漆樹的漆樹籽油和蠟的脂肪酸成分分析結果一致[10]。多不飽和脂肪酸被認為是調節人類健康和發展的關鍵營養素[11]，其中亞油酸和亞麻酸不能自身合成，必須從食物中獲取，所以被稱為必需脂肪酸[12?13]。亞油酸具有防癌抗癌，抗粥狀動脈硬化，參與脂肪分解與新陳代謝，增強機體免疫能力，促進骨組織的代謝等作用[13?15]。其中檢測出含量較高的單不飽和脂肪酸為油酸，含量與漆籽油和市售食用漆籽油相當，對降低人體膽固醇有重要作用[16]。因此，以果仁提取的漆籽油在三種類型的油脂中營養價值最高。

白漆籽仁油與黑漆籽仁油相比，前者的油酸、亞油酸的含量高于后者，而亞麻酸含量則是黑漆籽仁油較高（P<0.05）。黑漆籽油還有一個特點，棕櫚一烯酸含量高于白漆籽油，達1%左右。棕櫚烯酸存在于人體皮膚真皮層中，是我們皮脂中的一種必須脂肪酸，因此它具有天然的親膚性，而且在動植物油中鮮有存在。

綜上所述，漆油提取原料和壓榨工藝的選擇對所獲得的油脂脂肪酸組成和營養價值有較大影響。以果仁部分為原料提取的漆籽仁油不飽和脂肪酸含量最高，營養保健價值最優，適合于作為食用油脂。以整個漆籽（包括果皮和果仁）為原料提取的漆樹籽油，含有漆油和部分漆蠟，飽和脂肪含量高，因此營養價值被減弱，但可以作為潤膚劑、表面活性劑、洗滌劑等用于食品、藥品和化妝品中。本研究為漆籽資源的開發利用提供科學依據和數據參考。