孕期各階段脂溶性維生素對(duì)妊娠高血壓綜合征的預(yù)測(cè)價(jià)值

金飛華，祁可娜，潘麗，宓志鋒

（海寧市婦幼保健院，浙江 海寧 314400）

妊娠期高血壓綜合征（以下稱(chēng)“妊高征”）的診斷多依據(jù)病史、血壓動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)結(jié)果、尿蛋白水平及伴隨癥狀，但該疾病在孕20周前常無(wú)明顯自覺(jué)癥狀，當(dāng)癥狀出現(xiàn)時(shí)已形成相關(guān)的病理改變。因此，量化的、高敏感的輔助診斷指標(biāo)對(duì)該病的二級(jí)預(yù)防意義重大[1]。脂溶性維生素主要包括維生素A、維生素D、維生素E、維生素K，參與脂質(zhì)吸收、合成、分解、轉(zhuǎn)化等多個(gè)過(guò)程，對(duì)母體與胎兒新陳代謝具有重要的調(diào)節(jié)作用。相關(guān)研究顯示，早期妊娠血脂代謝異常、尤其是甘油三酯血癥和膽固醇血癥異常與子癇前期發(fā)生與發(fā)展關(guān)系密切[2]，本研究以血清脂溶性維生素作為評(píng)估變量，參考“子癇前期病因‘六階段模式’[3-4]中胎盤(pán)發(fā)生關(guān)鍵期（孕8-18周）”的理論，結(jié)合孕檢規(guī)律分為三個(gè)階段（孕8-12周、孕 13-16周和孕17-20周）采集血樣，檢測(cè)胎盤(pán)發(fā)生關(guān)鍵期三個(gè)階段的血清脂溶性維生素水平，并探討其對(duì)妊高征的預(yù)測(cè)價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機(jī)選擇2019年1月-2020年12月本院孕檢的孕婦445例進(jìn)行前瞻性隨訪監(jiān)測(cè)，納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）單胎妊娠；（2）隨訪檢測(cè)至少完成一次血清維生素測(cè)定；（3）最終隨訪確診妊娠期高血壓樣本病理診斷符合《妊娠期高血壓疾病診治指南（2020）》中的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)[5]。 排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并重大器質(zhì)性疾??；（2）未完成相關(guān)孕期檢測(cè)、提前終止妊娠、無(wú)隨訪記錄。最終確定妊高征組46例（妊娠期高血壓17例、子癇前期20例、子癇1例、妊娠合并慢性高血壓病8例），年齡23-39歲；對(duì)照組399例，年齡23-38歲。兩組樣本年齡、三個(gè)階段孕周差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。詳見(jiàn)表1。

表1 兩組年齡和三個(gè)階段的孕周比較（±s）

表1 兩組年齡和三個(gè)階段的孕周比較（±s）

組別 n 年齡（歲）第一階段（周）第二階段（周）第三階段（周）妊高征組 46 29.06±4.01 9.53±1.50 14.53±1.12 18.41±1.18對(duì)照組 399 29.91±3.74 9.79±1.40 14.68±1.00 18.84±1.07

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑 （1）儀器：超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀（Waters ACQUITY UPLC，京科瑞達(dá)）；（2）試劑：維生素A標(biāo)準(zhǔn)品（CAS號(hào):68-26-8，品牌Supelco， 純度：HPLC≥98%），25 （OH）D2/D3標(biāo)準(zhǔn)品（CMS-CH62028，純度≥98.0%），維生素 E標(biāo)準(zhǔn)品（CAS號(hào):30999-06-5，純度≥99.0%），維生素K1（CAS號(hào):84-80-0，純度≥97.0%）。

1.2.2 脂溶性維生素測(cè)定 （1）血清采集：采集孕婦外周血2mL搖勻并入4℃冰箱避光靜置30分鐘，采用4°C離心機(jī)于4000rpm/min離心10分鐘，取上清液轉(zhuǎn)移至干凈的EP管中立即凍存于-20°C冰箱中待處理，避免樣本反復(fù)凍融。（2）檢測(cè)：按照①→④步驟進(jìn)行測(cè)定。①空白血清基質(zhì)與標(biāo)準(zhǔn)溶液工作液制備；②標(biāo)準(zhǔn)曲線制備、色譜和質(zhì)譜條件選??；③檢測(cè)與Targetlynx軟件行質(zhì)譜數(shù)據(jù)定量分析，并于260nm最大吸收度時(shí)記錄各脂溶性維生素水平；④回收率與精密度評(píng)估。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用（±s）表示，正態(tài)、方差齊性的數(shù)據(jù)采用t檢驗(yàn)；采用ROC曲線分析孕期三個(gè)階段脂溶性維生素對(duì)妊娠期高血壓的預(yù)測(cè)價(jià)值。

2 結(jié)果

2.1 不同孕期脂溶性維生素水平 第一階段妊高征組維生素 A、25-（OH）D3、維生素 K1水平與對(duì)照組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；第二階段妊高征組維生素 A、25-（OH）D3、維生素 K1水平均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或 P＜0.01）；第三階段妊高征組維生素A、25-（OH）D3、維生素E、維生素K1水平均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05 或 P＜0.01）。 詳見(jiàn)表 2。

表2 不同階段兩組間脂溶性維生素水平比較（±s）

表2 不同階段兩組間脂溶性維生素水平比較（±s）

維生素K1（nmol/L）妊高征組 46 456.73±119.62 5.82±1.71 26.44±8.31 2.72±0.86對(duì)照組 399 509.82±130.52 6.57±1.72 28.96±7.78 3.08±0.87組別 n images/BZ_63_1455_653_1480_689.png第一階段維生素A（mg/L）維生素D（nmol/L）維生素E（nmol/L）

續(xù)表2

續(xù)表2

2.2 脂溶性維生素對(duì)妊高征的預(yù)測(cè)價(jià)值 根據(jù)表2結(jié)果，以差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的第二、第三階段各維生素水平為評(píng)估變量，對(duì)妊高征血壓進(jìn)行預(yù)測(cè)。結(jié)果顯示，第二階段中維生素 A、25-（OH）D3、維生素K1對(duì)妊高征有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值，第三階段中四種維生素對(duì)妊高征均有一定的預(yù)測(cè)診斷價(jià)值，特別是血清維生素A和25-（OH）D3，ROC曲線下面積與第二階段相比有較大的增加。詳見(jiàn)表3。

表3 孕期第二、三階段血清脂溶性維生素對(duì)妊高征的預(yù)測(cè)價(jià)值

3 討論

脂質(zhì)代謝異常作為妊娠期高血壓的危險(xiǎn)因素之一已被廣泛證實(shí)[6-7]。與妊娠期母胎脂質(zhì)代謝息息相關(guān)的脂溶性維生素，擔(dān)負(fù)物質(zhì)轉(zhuǎn)換、能量代謝、器官系統(tǒng)機(jī)能調(diào)節(jié)等多種生理職能[8-9]，其指標(biāo)水平對(duì)妊高征具有一定的提示作用[10]。維生素A調(diào)節(jié)基因表達(dá)、細(xì)胞分化與增殖，對(duì)胎盤(pán)生長(zhǎng)、胎兒發(fā)育及免疫系統(tǒng)形成均密切相關(guān)；維生素A、E具有抗氧化能力，其缺乏與氧化應(yīng)激損傷的發(fā)生相關(guān)[11]；25-羥維生素D3作為固醇類(lèi)衍生物具有調(diào)節(jié)鈣磷代謝、促進(jìn)骨骼發(fā)育的作用，其缺乏將導(dǎo)致血管再生、鈣磷調(diào)節(jié)等能力降低，血管壓力增加，出現(xiàn)子癇前期樣改變[12]；維生素K1參與肝臟凝血酶原表達(dá)，主要包括凝血因子Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ的合成，并在骨代謝中發(fā)揮一定的調(diào)節(jié)功能。

本研究以維生素 A、25-（OH）D3、維生素 E、維生素K1作為脂溶性維生素的研究指標(biāo)，對(duì)孕期三個(gè)階段進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示，孕期第二階段中維生素 A、25-（OH）D3、維生素 K1對(duì)妊高征有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值，第三階段中四種維生素對(duì)妊高征均有一定的預(yù)測(cè)診斷價(jià)值。其中，第二階段維生素A、25-（OH）D3、維生素K1的ROC曲線下面積較小，均為0.65左右；而第三階段血清維生素A、25-（OH）D3的ROC曲線下面積分別為0.732和0.710，有較大的提高，維生素K1的ROC曲線下面積提高不明顯。由此可知，血清脂溶性維生素對(duì)妊高征的預(yù)測(cè)價(jià)值在孕13周開(kāi)始體現(xiàn)，但預(yù)測(cè)價(jià)值不高，其預(yù)測(cè)價(jià)值于孕17-20周呈上升趨勢(shì)，特別是血清維生素A、25-（OH）D3。適當(dāng)參考孕期不同階段孕婦血清脂溶性維生素水平可為妊高征的二級(jí)預(yù)防提供依據(jù)。