血細胞參數在IgM抗體陽性兒童支原體肺炎中的應用

朱松濤，鄒旭美，楊華瑩，陸焱，劉鴻生

（南京醫科大學附屬無錫人民醫院醫學檢驗科，江蘇 無錫214023）

肺炎支原體（mycoplasmap neumonia，MP）是社區獲得性呼吸道感染的常見原因，可引起上、下呼吸道感染，并在全球范圍內引發流行性感染。國外有報道[1]稱，MP可導致特定時期4%～8%社區獲得性細菌性肺炎（community-acquired bacterial pneumonias，CABP）的發生，在疾病流行期間可導致一般人群中高達20%～40%的CABP，甚至在封閉人群中上升至70%。肺炎支原體肺炎（mycoplasma pneumonia pneumonia，MPP）因年齡而異，學齡兒童和青少年是最常見的受感染年齡組，且占＞5歲兒童肺炎病例的40%[2]。由于缺乏典型的臨床特征、胸部X線表現和快速、特異的實驗室技術，及該病原體在實驗室培養方面的困難，因此，大多數情況下只能憑經驗診斷，更因其表現形式常與其他原因的支氣管炎、肺炎相似而易導致誤診。常見的檢測方法包括顆粒凝集試驗、免疫熒光法及核酸擴增技術等，但血清學方法應用最廣，即酶免疫分析法檢測抗肺炎支原體的免疫球蛋白M（immunoglobulin M，IgM）、IgG和IgA抗體[3]。IgM抗體陽性，發生于免疫早期防御階段，對MPP患兒的病情輕重及預后情況判斷起重要的作用[4]，而血常規作為臨床上最常用的檢測項目，可詳細反映外周血成分變化。同樣，外周血細胞參數的異常對MPP的病程發展有一定的提示作用。伴隨肺炎支原體IgM抗體的產生，血液中具體哪些細胞參數發生變化及發生何種變化，還缺乏全面的實際研究。基于此，本研究旨在探討血細胞參數在IgM抗體陽性兒童肺炎支原體感染中的應用價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料選取2020年9月1日—30日于無錫市兒童醫院就診的52例肺炎支原體IgM抗體陽性患兒作為病例組，其中男21例，女31例；年齡1～12歲，平均（3.7±3.6）歲。另選取同期年齡、性別相匹配的59名健康體檢兒童作為對照組，其中男23例，女36例；年齡1～12歲，平均（4.1±3.3）歲。兩組性別、年齡比較差異無統計學意義，具有可比性。本研究方案經無錫市兒童醫院醫學倫理委員會審核通過，兩組兒童監護人均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 納入及排除標準納入標準：病例組依據《兒童肺炎支原體肺炎中西醫結合診治專家共識》（2017）[5]，符合以下條件：有咳嗽伴或不伴發熱等呼吸道表現，有呼吸音減低，局部出現干濕啰音、喘鳴音等；臨床表現輕且與影像學的顯著表現不一致；影像學提示肺部有大葉性浸潤改變、小葉性點片狀浸潤或間質性改變等，胸部CT常見的征象為伴有支氣管充氣征的大片實變影、結節狀或小斑片狀氣腔實變影、磨玻璃樣陰影；單次MP-IgM抗體滴度≥1∶160。對照組均經臨床檢查排除MPP，無肺部基礎疾病（肺結核、氣管軟化癥等），無其他系統性疾病。排除標準：免疫缺陷患兒；有肺部基礎疾病患兒；合并其他病原感染患兒。

1.3 方法采集兩組空腹外周靜脈血樣本2～3 mL，乙二胺四乙酸二鉀抗凝混合，15 min內采用Sysmex XN-9000全自動血細胞分析儀及其配套試劑檢測外周血白細胞（WBC）、嗜酸粒細胞（EO）、淋巴細胞（LY）、中性粒細胞（NE）、紅細胞分布寬度（RDW）、血紅蛋白（Hb）、血小板（PLT）、血小板壓積（PCT）、血小板分布寬度（FL）、C反應蛋白（CRP）等血細胞參數指標并記錄結果。

1.4 觀察指標比較兩組外周血細胞參數指標及其在診斷兒童支原體肺炎中的價值。

1.5 統計學方法采用IBM SPSS Statistics 23統計軟件、Excel進行數據分析。服從正態分布的計量資料采用“±s”表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗，計數資料以百分率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。外周血細胞參數指標診斷效能采用受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC曲線）進行分析，以曲線下面積（area under curve，AUC）作為衡量依據，取約登指數最大值對應的數值作為臨界值（Cut-off值），并計算靈敏度和特異度。

2 結果

2.1 兩組外周血細胞參數指標比較病例組WBC、NE、NE#、LY#、RDW、CRP水平均明顯高于對照組，LY、EO、EO#、PLT、PCT、Hb水平均明顯低于對照組（P＜0.05）；兩組PDW比較差異無統計學意義，見表1。

表1 兩組血細胞參數指標比較（±s）Table 1 Comparison of blood cell parameters between the two groups(±s)

表1 兩組血細胞參數指標比較（±s）Table 1 Comparison of blood cell parameters between the two groups(±s)

注：WBC，白細胞；NE#，中性粒細胞計數；NE，中性粒細胞比例；LY#，淋巴細胞計數；LY，淋巴細胞比例；EO，嗜酸粒細胞比例；EO#，嗜酸粒細胞計數；PLT，血小板計數；PDW，血小板分布寬度；PCT，血小板壓積；Hb，血紅蛋白；RDW，紅細胞分布寬度；CRP，C反應蛋白

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2.2 血細胞參數指標在診斷兒童支原體肺炎中的價值WBC、NE、NE#、CRP、RDW、EO、EO#、LY、Hb、PCT、PLT在診斷兒童MPP中的AUC差異有統計學意義（P＜0.05）。ROC曲線分析結果顯示，EO、RDW、PCT的AUC分別為0.806、0.797、0.78，具有最佳的診斷效能。在Cut-off取值下，EO、PCT的診斷靈敏度（0.731）最高，WBC的診斷特異度（0.966）最高，見表2、圖1。

圖1 血細胞參數指標診斷兒童支原體肺炎的ROC曲線Figure 1 The ROC curve of blood cell parameters in the diagnosis of Mycoplasma pneumonia in children

表2 血細胞參數指標在診斷兒童支原體肺炎中的價值Table 2 Value of blood cell parameters in the diagnosis of MPP in children

3 討論

肺炎支原體感染后導致機體發生一系列免疫應答，首先是B淋巴細胞通過免疫球蛋白介導的體液免疫。有研究[6]顯示，豬感染MPP 28 d后，肺泡灌洗液和肺實質中B細胞數量增加25倍。MP感染后，正常兒童的IgM水平明顯升高，通常發生在感染后7～14 d，在第3～4周達到高峰，并持續數月[7]。IgM水平升高被認為是6個月以上兒童近期感染的診斷指標，這些兒童不會經歷反復支原體感染，但隨著時間的推移，再感染可能導致IgM反應減弱，在成人中最典型[1]。MP誘導體液免疫、抗體應答是肺炎支原體感染應答的基礎，因此，IgM水平升高是肺炎支原體感染的特征性表現。其次，T淋巴細胞通過細胞因子參與的細胞免疫及MP直接侵犯肺部和支氣管組織，并激發機體產生過度炎性反應，而WBC及中性粒細胞水平升高與其密切相關。除中性粒細胞直接粘附和吞噬肺炎支原體外，聚合酶鏈反應分析表明，在BALB/C大鼠發生原發性MP肺炎感染后，腫瘤壞死因子-α（TNF-α），白細胞介素-1β（IL-1β）及肺組織中IL-6的mRNA表達水平明顯增加[8-9]。據報道[10]，MP可誘導IL-1β的產生，廣泛參與多種類型的損傷，包括組織破壞和水腫形成。

本研究結果表明，病例組CRP水平明顯高于對照組（P＜0.05），說明炎癥因子與支原體肺炎密切相關。有調查[11]顯示，在全血計數、電解質、肝功能和腎功能正常的支原體肺炎輕度感染疾病患者中，患者的實驗室評估通常是非診斷性的，CRP可能輕度升高；在病情較重的患者，尤其是原發性非典型肺炎患者中，炎癥標志物（CRP和血沉）可明顯升高。同時，PLT、PCT水平明顯低于正常對照組，說明MP初期感染可能伴隨著凝血狀態的改變。PLT對于止血、血栓形成、肺免疫防御和炎癥反應至關重要[9]。有資料[12]顯示，嚴重的支原體肺炎感染會伴隨血栓形成，急性期血管損傷部位形成PLT-Fn復合物，導致PLT消耗量的增加。此外，炎癥標志物CRP可能通過促進血管重塑、內皮功能障礙和原位血栓形成而導致近端肺動脈的持續阻塞，使孤立性動脈血栓形成原位血栓，這可能是癥狀輕微的原因之一[13]。

本研究結果顯示，病例組血紅蛋白含量低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），推測除受感染導致機體營養素流失外，MP可通過改變紅細胞膜的抗原性，并誘導針對紅細胞膜I抗原的自身抗體，即紅細胞的冷凝集素，從而誘導自身免疫性溶血性貧血[14]。同時，RDW的顯著增加也提示造血異常，有發生貧血的可能。關于EO#及其比例EO的問題，雖然EO具有最佳的診斷效能，但需與EO#及臨床相結合。一般嗜酸性粒細胞計數降低無較大臨床意義，主要是感染導致的一種癥狀，例如感冒、發燒、咳嗽、肺炎等應激狀態，且治療時使用腎皮質激素也會導致EO#降低。但與此相反的是，MP感染可導致血清中總IgE水平升高，而速發型和遲發性過敏反應可作為一種即時反應和延遲相反應或雙相反應誘發哮喘，從而誘發IgE介導的氣道炎癥和氣道高反應性[15]。但無直接證據表明MPP是引發哮喘的直接原因。

綜上所述，支原體肺炎患兒血細胞參數表現為EO、RDW、PCT指標的顯著異常，WBC有最大診斷特異度，但因EO結果無較大臨床意義或需進一步證實，因此，除EO外均可作為輔助診斷支原體肺炎的潛在指標，但具體機制有待進一步研究證實。