一例豬肺疫疫情的診斷體會

于泓

（山東省平邑縣畜牧獸醫局保太畜牧獸醫站 273300）

豬肺疫是由豬多殺性巴氏桿菌引起的一種嚴重危害生豬養殖業的惡性傳染病，又被稱為豬巴氏桿菌病或豬出血性敗血癥，民間常稱為“鎖喉風”。該病發病率較高，可達40%，而死亡率不高僅為5%左右，在我國呈現散發性地方性流行，隨著我國規模化養殖業的大規模發展，該病的發病率逐年升高。2020年11月底，某生豬養殖場突然爆發由豬多殺性巴氏桿菌所引起的豬肺疫疫情，發病豬以最急性型和急性型病例為主，部分病豬在發病后24～48h內便死亡。經獸醫站專業工作人員診斷并及時診斷治療，雖仍然有部分病情嚴重病豬死亡，其他癥狀較輕病豬均痊愈恢復，疫情得到有效控制，以下將對此次疫病的診治過程進行逐一介紹。

1 發病情況

2020年11月底某個育有1000頭左右生豬的生豬養殖場內突然出現6只發病豬，發病豬的臨床癥狀主要表現為精神沉郁、體溫升高、呼吸困難且咳嗽，呼吸方式呈腹式或犬坐呼吸。雖飼養人員及時發現病情并將患病豬群隔離，同時對圈舍及使用器械進行緊急消毒。但第二天仍然有13頭生豬表現出類似癥狀，且隔離的病豬開始出現死亡。養殖場場主察覺異常后，及時與基層獸醫站的專業技術人員聯系，經病原學檢測后確定為豬多殺性巴氏桿菌引起的豬肺疫疫病，經及時診斷與治療，19頭發病豬病死7頭，治愈12頭。

2 臨床表現

最初發病的病豬主要表現為最急性型的臨床癥狀，患豬突然發病，呼吸困難，體溫升高可達41～42℃，食欲飲欲下降，并在發病后24h內死亡。而后續發病的病豬主要表現為急性型臨床癥狀，體溫升高，呼吸困難，發病初期主要表現為干咳，隨著病情的延長轉變為濕咳。豬咳嗽時有明顯的疼痛感，聽診時有啰音和摩擦音，隨著病程的進一步發展，患豬呼吸狀況更加嚴重，表現為犬式呼吸或腹式呼吸，可視黏膜因缺氧、發紺。

3 解剖變化

對病死的生豬進行剖檢可發現最急性型的死亡病豬全身黏膜、漿膜、皮下有散在的點狀出血；全身淋巴結頜下淋巴結、頸上淋巴結、腸系膜淋巴結等出血、切面呈紅色，肺臟充血水腫；急性型病死豬因病情較長，炎癥反應較為明顯，剖檢可觀察到明顯的纖維素性壞死性肺炎、心包炎和胸膜炎等。全身的黏膜、漿膜及實質器官和淋巴結等有明顯的敗血癥病變[1]。

4 病原鑒定

無菌采集發病死亡生豬的腹腔液或實質臟器、淋巴結組織進行觸片檢測，使用革蘭氏、瑞氏和印度墨汁等染色液進行染色鏡檢，革蘭氏染色結果發現大量陰性、大小不一的球桿菌；瑞氏染色結果發現兩極呈明顯濃染，符合巴氏桿菌的染色特性；印度墨汁染色結果顯示，短桿菌周圍有明顯的莢膜。將培養物接種于鮮血瓊脂培養基進行純化培養，結果發現，該菌在血平板上生長情況旺盛，形成圓形微隆起的半透明灰白色露珠樣菌落。為了對病原進行進一步檢測和針對性治療，將純培養物接種于液體培養基，然后進行PCR檢測、生化鑒定和藥敏學檢測。

5 生化鑒定

為了對分離的病原微生物進行生化鑒定，將培養好的病原純培養物接種于各類生化培養基，生化鑒定結果為甘露醇+、葡萄糖+、乳糖+、阿拉伯糖+、山梨醇+、麥芽糖+、木糖+、蔗糖+、果糖+、H2S試驗+、MR-、還原性硝酸鹽試驗-、明膠液化-，將純培養的生化鑒定結果與伯杰氏手冊進行對照，發現結果符合巴氏桿菌的生化鑒定結果，可初步確定本次疫情是由豬巴氏桿菌所引起，但具體亞型還需進一步鑒定。

6 分子生物學檢測

為了對巴氏桿菌亞型進一步鑒定，利用商品化的細菌基因組提取試劑盒提取分離培養物的基因組DNA，參考文獻并設計合成了針對性巴氏桿菌16SrRNA的同樣引物和多殺性巴氏桿菌Kmt1基因的鑒定引物進行PCR擴增。將擴增結果進行核酸電泳檢測，結果發現，16SrRNA引物擴增出大小為1500bp左右的特異性條帶，kmt1引物擴增出450bp大小左右的特異性條帶，將PCR產物送至生物科技公司進行測序并將測序結構在NCBI數據庫中進行Blast比對分析發現，引起此次疫情的病原為多殺性巴氏桿菌，且kmt1基因可以作為快速診斷該病原的特異性基因。

7 藥敏試驗

為了能針對性地選擇治療本次疫病的有效藥物，防止細菌耐藥性的產生，筆者采用K-B紙片法對本次分離的病原微生物進行藥敏檢測，藥敏試驗采用含5%馬血清的TSA固體培養基，培養時間、操作方法和判定標準依照于臨床實驗室標準化協會制定的CLSIM100的最新參考標準[2]。藥敏試驗結果發現，本次分離到的豬多殺性巴氏桿菌分離株對環丙沙星、諾氟沙星和氧氟沙星高度敏感，對多西環素、紅霉素、阿奇霉素中度敏感，對包含桿菌肽、氯霉素、多粘菌素、卡那霉素、呋喃妥因、青霉素、四環素、克林霉素、利福平、頭孢吡虧等多種抗生素耐藥，為一株耐藥譜廣泛的高度耐藥菌株，這一定程度上增大了治療難度，也凸顯出藥敏試驗篩選有效藥物的重要性。

8 防治方法

當發現豬群有可疑病例時，需及時將疑似發病生豬和健康生豬進行隔離，并對圈舍、飲水用具、運輸工具等相關物品使用過氧乙酸或氯制劑進行嚴格消毒，消毒需每天1次，連續7d，直到疫情不再發生。本次疫情發生后飼養人員雖及時將發病生豬和健康豬群進行隔離，但仍未能阻止疫情的進一步蔓延，這可能是由于消毒不徹底或疫情發現不及時導致的。

根據本次疫情的分離菌株的藥敏結果，使用環丙沙星、諾氟沙星和氧氟沙星等抗生素對發病豬群進行聯合給藥和交替給藥，以防細菌產生耐藥性，視發病豬群的痊愈情況進行給藥3～5d，也可以使用多西環素、紅霉素、阿奇霉素等中度敏感性藥物進行輔助治療，同時應加強飼養管理，以提高豬群的基礎免疫力。

對未死亡的奶牛進行緊急免疫豬多殺性巴氏桿菌滅活疫苗，每頭2～3ml。

經過本次合理有效的緊急防控與治療，除最急性型病豬因病程較短，死亡較快全部死亡外，急性型病豬僅死亡1頭，其余病豬全部治愈，有效控制了本次疫情并挽回企業的損失。

9 體會

豬肺疫病原豬多殺性巴氏桿菌是一種條件性致病菌，其可以寄生于健康豬群的咽喉等器官內，當動物免疫能力下降時引起動物發病。本次疫病發生的最主要原因可能是秋冬季節氣溫驟變，導致動物應激，同時由于飼養管理不當，消毒不徹底等多方面原因。所以，飼養人員在平時飼養時要加強飼養管理，保證充足合理的飲食飲水，注意通風、保暖、干燥以減少動物應激[3]。

在對發病豬群進行治療時，選擇對本次分離株高度敏感的環丙沙星、諾氟沙星和氧氟沙星等抗生素進行聯合給藥和交替給藥，因此，在藥物治療后發病豬群病情有明顯好轉，且大部分病豬痊愈，這提示我們進行藥敏檢測篩選合理藥物的重要性。