犬細小病毒病的診斷與防控

孫華博 韓雨童 宮冉冉 曹珂煒 國桂海 韓照清

（山東省臨沂市臨沂大學 276000）

1 犬細小病毒病的病原分析

1.1 犬細小病毒的發現

犬細小病毒病的病原為犬細小病毒(Canine Parvovirus,CPV)。最早在1977年，Eugster和Nairn在美國通過電鏡觀察患有出血性腹瀉犬的糞便發現了CPV粒子。1978年，Thomson和Kelly在腸炎癥狀的犬中分離出該病毒。1982年，由中國人民解放軍獸醫大學首次在國內分離出CPV。

1.2 犬細小病毒的生物學特性

該病毒屬于犬細小病毒科細小病毒屬，基因組含有大約5323個核苷酸。CPV粒子有VP1、VP2和VP33種多肽，其中VP2基因為衣殼蛋白的主要編碼基因，占編碼基因總量的90%，其編碼的衣殼蛋白可誘導機體產生中和抗體。VP2蛋白中的主要抗原位點的變異可能導致該病毒的抗原特性和宿主范圍發生改變。因此，VP2基因常是CPV分子流行病學調查的主要靶基因[1]。該病毒對多種理化因素和常用消毒劑具有較強的抵抗力，室溫可存活3個月；60℃下可存活1h；在低溫條件下仍具有侵染性；常用消毒劑酒精、乙醚、氯仿等不能使其滅活，但次氯酸鈉、-丙內酯可以殺死該病毒[2]。

2 犬細小病毒病的發病特點

2.1 流行時間

犬細小病毒病一年四季都可發病，以冬季春季為高發季節。寒冷、潮濕、擁擠等能引發動物機體的應激反應，或飼養管理方式突然改變、衛生條件差等其他因素會導致動物機體免疫力下降都能促使動物更易發病。

2.2 易感犬類和傳染源

研究表明，犬細小病毒感染與品種關系不大，但也有統計表明，純種犬及外來犬比土種犬發病率高。幼犬和老年犬為易感群體，發病率和死亡率高。病犬排泄物、嘔吐物和唾液中都含有病毒，病毒能通過污染的食物和環境等造成傳染?？祻腿募S尿中長期帶有病毒，且能在糞便中存在數年，隱性感染的犬也帶有病毒，都屬于危險的傳染源。除此之外，有研究表明，人、蒼蠅、蟑螂及一些犬的寄生蟲都能作為犬細小病毒的攜帶者。

2.3 癥狀表現

在臨床上，犬細小病毒感染的病犬分為腸炎型和心肌炎型，潛伏期為1～2周。

2.3.1 腸炎型

腸炎型患病犬多見于6～12月齡的幼犬，病初表現為發熱(40℃以上)、精神萎靡、食欲不振、嘔吐、眼結膜潮紅、鼻鏡干燥，發病1d后開始出現腹瀉癥狀。病情初期表現糞便較軟，顏色呈咖啡色、灰色、番茄醬色或乳白色。隨病程的發展，排便次數增加，糞便中帶有血液，并有惡臭味[3]。出現血便數小時患病犬表現為嚴重脫水、體重減輕。腸道出血嚴重的病例，如果不能及時糾正脫水癥狀會造成死亡。

2.3.2 心肌炎型

多見于28～42日齡幼犬，該病例的病程較短，病犬先兆性癥狀并不明顯。病犬開始沒有表現明顯的癥狀，輕度腹瀉，個別的突然呼吸困難，心力衰弱或心律不齊，短時間死亡，治愈率極低。

3 犬細小病毒病的病理變化

犬細小病毒病感染是由犬細小病毒侵入機體所導致，細小病毒感染是全身性感染，病毒的侵入主要是由血流傳播到各個器官，后出現病毒血癥，病毒侵入機體后主要攻擊腸上皮細胞和心肌細胞，但腸炎病癥較為明顯，病毒感染腸引窩胚上皮組織，導致上皮組織破壞，使得腸絨毛變短，細胞更新受損。病毒導致心肌細胞受損，細胞變細、變長，使得肌纖維疏松，出現斷裂。心肌與心內膜出現心肌變薄，心臟擴張，出現化膿性壞死灶，有出血斑紋。心肌毛細血管擴張出現出血、充血的現象[4]。

4 犬細小病毒病的診斷

4.1 臨床診斷

在臨床上，該病毒的診斷癥狀分為出血性腸炎和非化膿性心肌炎，感染前期（2個月左右)的病犬以出血性腸炎為突出特征，常延遲發病，表現為嘔吐、腹瀉、厭食、發熱和糞便帶血等臨床癥狀。采集病犬的血液分析可見白細胞計數減少，需及時治療以防病情加重。發病中期，病犬嘔吐頻率增加，腹瀉加重，排泄物帶血，病犬抵抗力降低[5]。發病后期，病犬失水嚴重，電解質失衡，甚至出現機體酸中毒。

4.2 快速診斷

犬細小病毒的快速診斷方法常使用CPV膠體快速檢測試紙，該方法檢測速度快，操作簡便快捷，而且準確率高。具體操作為取犬少量糞便，用生理鹽水均勻混合，吸取1～2滴混合液滴入試紙，5～10min后試紙的顏色發生變化，若出現1條色線，說明檢測為陽性；出現2條色線，說明檢測為陰性。

4.3 實驗室診斷

常用的實驗室檢測方法如下。（1)PCR檢查：PCR檢查技術是在DNA水平上對病毒和細菌等病原微生物進行診斷的方法[6]。PCR檢測的敏感度高且特異性強，特別是隨著PCR技術逐漸成熟，PCR診斷試劑盒、套式PCR、特異等位基因PCR等應用使得病毒的檢測更加準確。（2)血凝試驗（HA)和血凝抑制試驗（HI)：可以簡單快速地診斷糞便和組織樣品中的病毒[7]。該方法是取病犬新鮮糞便或病死犬腸內容物，按照病毒分離的方法獲得病毒懸液，再進行HA和HI試驗。（3)病毒分離：可從CPV誘導的心肌炎和腸炎中分離出病毒，進行鑒定。（4)酶聯免疫吸附試驗（ELISA)：這種檢測方式既可以檢測抗體也可以檢測抗原，具有便捷、敏感、特異性強等優點。雙抗體加心ELISA法是一種迅速、簡單、靈敏、適用于犬糞便CPV抗原檢測的診斷試驗方法。（5)免疫層析方法：近年來，市場上有出售的免疫層析（Immunochromatography,IC)試紙條，因其使用靶向不同表位的單克隆抗體作捕獲和檢測抗體，所以價格較高。而使用CPV重組截短VP2蛋白產生兔多克隆抗體作捕獲抗體和單克隆抗體做檢測抗體，組裝成新的試紙條，其靈敏度與特異性和商用的試紙條相似。單克隆抗體和兔多克隆抗體組合的方法降低了成本，為檢測CPV抗原提供了可接受的替代方案[8]。

5 犬細小病毒病的防治

5.1 預防

犬細小病毒對外界的抵抗力強，存活時間較長，傳染性極強。確診后應立即將病犬進行隔離飼養。防止病犬與健康犬直接或間接接觸傳染，犬舍及場地用0.5%的過氧乙酸等反復消毒，排泄物和嘔吐物應及時處理干凈，并對病犬的飼料用具消毒。消毒液中84和杜邦-衛可均是有效消毒劑。日常做好防疫消毒工作，主要是對犬舍內外進行嚴格的徹底消毒，至少每周一次。為防止疫病的發生，應嚴格做好免疫接種。目前多次接種疫苗是預防本病的根本措施。幼犬應在6～8周齡開始接種疫苗，每隔2～4周免疫一次，持續到16～18周齡；16周齡以上未接種過疫苗的可以每隔2～4周免疫一次；配種前的母犬應在兩周前免疫一次，提高幼犬母源抗體水平[9]。做好犬細小病毒病的診斷，注意與細菌性腸炎、出血性胃腸炎、中毒性腸炎、傳染性肝炎、犬瘟熱等疾病進行區別診斷。

5.2 治療

（1)對病犬初期首先實施隔離，應配合使用單克隆抗體和高免血清治療，提高治愈率。另外，應用廣譜抗多病免疫球蛋白、干擾素α或巨力肽等藥物治療早期使用都有良好效果。目前有試驗表明，使用母體血或康復犬血治療效果明顯。

（2)補液療法：對病犬禁止直接飲食飲水，病犬脫水較輕，無嘔吐且有飲欲時可以口服補充鹽液。病犬脫水嚴重時應通過輸液等方式進行補水，如使用5%葡萄糖鹽水加入5%碳酸氫鈉注射液給予靜脈注射?？筛鶕撍某潭葲Q定補液量的多少，糾正病犬的電解質平衡，防止機體嚴重脫水、器官功能降低、體內酸堿失調，導致機體死亡[10]。

（3)止血：可以選用腎上腺素、維生素K等。止吐，持續性嘔吐可以使用阿托品或氯丙嗪等藥物或使用地塞米松和慶大霉素1:4混合一次灌入直腸。止瀉：嚴重的持續性腹瀉可使用呋喃唑酮、水楊酸鉍等。防止繼發性感染：可以使用慶大霉素、氨芐西林、頭孢曲松鈉等。通常細小病毒病的治療不能使用地塞米松藥物，容易引起嚴重的拉血癥狀。

（4)痊愈后對犬的飲食要注意控制，避免喂食肉類等不易消化的食物。可以口服酵母片來輔助恢復腸胃。

（5)對于病死犬應作無害化處理，將病死犬消毒深埋或焚燒處理，對病死犬的環境徹底消毒。