基于網(wǎng)絡藥理學和分子對接研究化濕行瘀清熱方治療口腔扁平苔蘚的作用機制※

鄧倩瀾 路月亭 路華林 靳睿哲 許彥枝 劉鐵軍 趙 乾

(河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院口腔科，河北 石家莊 050019)

口腔扁平苔蘚是一種病因不明的自身免疫性炎癥疾病，據(jù)統(tǒng)計其發(fā)病率在0.5%～1.5%，多見于中年女性患者[1]?？谇槐馄教μ\多發(fā)生于頰、舌部位，臨床表現(xiàn)以網(wǎng)狀、萎縮、糜爛型常見[2]?？谇槐馄教μ\有癌變潛能，被世界衛(wèi)生組織(WHO)定義為“癌前狀態(tài)”，惡性轉化率為0.5%～2%[3]?，F(xiàn)代醫(yī)學主要采取西藥、手術、物理治療方式控制該病進展，但部分患者療效不甚理想。中醫(yī)藥在口腔扁平苔蘚的預防治療中發(fā)揮了重要作用。中醫(yī)學將口腔扁平苔蘚歸為口瘡、口糜范疇，為熱毒與濕積聚、氣血失和、濕熱循經(jīng)上逆熏蒸于口舌所致，以化濕醒脾、清熱降火、活血化瘀為原則，形成了化濕行瘀清熱方，在長期臨床治療中取得了較好療效[4]?；瘽裥叙銮鍩岱接牲S柏、佩蘭、砂仁、薏苡仁、茯苓、赤芍、紅花、牡丹皮、甘草、白鮮皮、金銀花11味藥組成，然而其治療口腔扁平苔蘚的具體機制尚未闡明。

目前，網(wǎng)絡藥理學已成為一項成熟的技術，其基于系統(tǒng)生物學、生物信息學及多向藥理學方法，系統(tǒng)研究藥物靶點與疾病基因之間復雜多樣的關系，從整體角度闡明各種藥物有效成分的藥理作用機制[5]。本研究采用網(wǎng)絡藥理學方法，預測化濕行瘀清熱方治療口腔扁平苔蘚的有效活性成分、潛在靶點及相關信號通路，探究其治療作用機制，并且通過分子對接對分析結果進行驗證。

1 資料與方法

1.1 化濕行瘀清熱方的活性成分及其作用靶點挖掘 使用TCMSP數(shù)據(jù)庫[6](http://tcmspw.com/tcmsp.php) 和BATMAN-TCM數(shù)據(jù)庫[7](http://bionet.ncpsb.org/batman-tcm/)獲得化濕行瘀清熱方劑中各組分的有效成分，以口服生物利用度(oral bioavailability，OB)≥30%，藥物相似度(drug likeness，DL)≥0.18為條件，篩選有效成分對應的作用靶點。TCMSP是一個系統(tǒng)的藥理學數(shù)據(jù)庫和分析平臺，整合了藥物的化學成分和靶點、相關疾病的靶點及相互作用網(wǎng)絡，有利于分析中藥的作用機制。BATMAN-TCM數(shù)據(jù)庫是一種中藥分子機制生物信息學分析工具，該數(shù)據(jù)庫基于中藥成分的靶點預測和后續(xù)的網(wǎng)絡藥理學分析。OB用于描述藥物的劑量進入人體循環(huán)的比例；DL指化合物與已知藥物的相似性。使用UniProt數(shù)據(jù)庫(http://www.uniprot.org/)和PERL編程語言(https://www.perl.org/，版本：5.30.1)獲得藥物有效成分靶點對應的基因符號。

1.2 口腔扁平苔蘚相關靶點的獲取 在GeneCards數(shù)據(jù)庫(http://www.genecards.org)中，輸入關鍵詞“口腔扁平苔蘚”，獲得疾病靶點。

1.3 藥物-疾病共同靶標篩選 將化濕行瘀清熱方有效成分對應靶點的基因符號及疾病靶點導入到Venny2.1.0(https://bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/)在線工具，得到藥物和疾病的共同靶點，交集部分認為是化濕行瘀清熱方治療口腔扁平苔蘚的關鍵靶點(藥效靶點)。

1.4 藥物-疾病調(diào)控網(wǎng)絡的構建 使用PERL編程語言(https://www.perl.org/ver.5.30.1)，篩選得到藥效靶點對應的藥物活性成分。將藥效靶點與其對應的藥物活性成分共同導入Cytoscape軟件(http://cytoscape.org/，版本：3.7.2)，構建化濕行瘀清熱方活性成分與靶點的調(diào)控網(wǎng)絡。

1.5 構建蛋白互作網(wǎng)絡(PPI) 將藥物-疾病共同靶點導入String 數(shù)據(jù)庫(https://string-db.org/)構建PPI，限定物種為“人”，結果以TSV文件格式保存。將結果導入Cytoscape 軟件繪制蛋白互作網(wǎng)絡相互作用圖，并使用“Network Analyzer”功能對網(wǎng)絡進行分析，得到核心靶點。使用6個參數(shù)來評估蛋白互作網(wǎng)絡的拓撲性質：自由度(Degree，DC)，介度(Betweenness Centrality，BC)，中心性(Closeness Centrality，CC)，特征向量中心(Eigenvector Centrality，EC)，基于局部平均連接的方法中心性(Local Average Connectivity-based method Centrality，LAC)和網(wǎng)絡中心(Network Centrality，NC)。首先選擇蛋白互作網(wǎng)絡中6個參數(shù)值均大于中值的節(jié)點構建子網(wǎng)絡；生成的子網(wǎng)絡再通過“6個參數(shù)值均大于或等于中值”這一條件再次進行篩選，并構建核心蛋白互作網(wǎng)絡。

1.6 基因本體論(GO)和京都基因和基因組百科全書(KEGG)富集分析 利用R軟件中Bioconductor 安裝包(http://www.bioconductor.org)的功能對藥物-疾病共同靶點進行進行GO基因功能富集分析和KEGG通路分析。篩選條件為P<0.05，Q<0.05，以便進一步分析。

1.7 分子對接 分子對接是一種評價藥物活性成分與藥物靶點結合能力的方法。從PubChem數(shù)據(jù)庫(http://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/)中下載靶點位于前4位的藥物有效成分2D結構，并通過ChemOffice軟件將2D結構轉換為3D結構。在PDB(http://www.rcsb.org/)數(shù)據(jù)庫中下載核心蛋白互作網(wǎng)絡中的蛋白三維結構，通過PyMol軟件，將蛋白中的水分子和小分子配體刪除。利用AutoDock1.5.6軟件將藥物有效成分和核心蛋白的PDB格式轉換為PDBQT格式，并尋找活性口袋。最后運行Vina進行分子對接。

2 結果

2.1 化濕行瘀清熱方有效成分及潛在靶點 根據(jù)OB和DL (OB≥30%，DL≥0.18)的篩選條件，從化濕行瘀清熱方中共獲得169個不重復有效成分及260個相關靶點，其中有效成分白鮮皮18個，赤芍29個，茯苓15個，甘草92個，紅花22個，黃柏37個，金銀花23個，牡丹皮11個，佩蘭11個，砂仁10個，薏苡仁9個，見圖1。由于每種中藥組分中含有效成分有重復部位，我們繪制韋恩圖對每種組分中所含有效成分進行歸納，見圖2，在化濕行瘀清熱方中各組分分布范圍較廣的有效成分是豆甾醇、谷固醇、槲皮素、谷甾醇、木樨草素、山奈酚。圖2中左側柱狀圖代表化濕行瘀清熱方各藥物組分及所包含活性成分數(shù)目，上方柱狀圖代表藥物共有的活性成分數(shù)量，中間黑色圓點代表含有此種活性成分的每種藥物組分。

圖1 化濕行瘀清熱方各組分所含有效成分所占比例情況

圖2 化濕行瘀清熱方各組分所含有效成分分布韋恩圖

2.2 口腔扁平苔蘚相關靶點 在GeneCards數(shù)據(jù)庫中以“口腔扁平苔蘚”為關鍵詞進行搜索，經(jīng)過檢索共獲得了387個疾病靶基因。

2.3 藥物-疾病共同靶基因 利用R軟件和Venny2.1.0在線工具對260個藥物靶點和387個疾病靶點取交集，兩者相交后，共獲得了58個藥物-疾病共同靶點，用于后續(xù)的網(wǎng)絡藥理學分析。

2.4 構建并分析藥物有效成分-疾病靶點網(wǎng)絡 應用PERL語言，我們共獲得了58個疾病藥物共同靶基因和對應的136個有效成分，通過Cytoscape軟件構建藥物有效成分-疾病靶點網(wǎng)絡圖，該網(wǎng)絡共有194個節(jié)點，497條邊，見圖3，中心矩形代表藥物的活性成分，外圍矩形代表藥物治療疾病的靶點。白色矩形代表白鮮皮的有效成分，棕色代表赤芍，橙色代表茯苓，綠色代表甘草，紅色代表紅花，粉色代表黃柏，黃色代表金銀花，深藍色代表佩蘭，灰色代表薏苡仁，淡粉色代表化濕行瘀清熱方劑中2種或2種以上成分的共同成分。對靶點不低于5的有效成分信息進行整理，見表1?；瘽裥叙銮鍩岱街邪悬c最多的化合物為槲皮素(MOL000098)，其他依次為：木犀草素(MOL000006)、漢黃芩素(MOL000173)、山奈酚(MOL000422)等。槲皮素中有49個靶點，木犀草素中有29個靶點，漢黃芩素中有17個靶點，山奈酚中有16個靶點，表明它們在治療口腔扁平苔蘚中發(fā)揮更大的作用，可能是關鍵的有效活性成分。

圖3 活性化合物和疾病共同靶點的網(wǎng)絡

表1 化濕行瘀清熱方中有效成分信息

2.5 蛋白互作網(wǎng)絡(PPI) 原始PPI (圖4A)通過DC、BC、CC、EC、LAC和NC的值進行2次篩選，最終得到核心蛋白互作網(wǎng)絡。核心PPI由14個節(jié)點和168條邊組成，如圖4C所示。根據(jù)PPI的拓撲分析結果，圖4A網(wǎng)絡中各節(jié)點連接度的中位數(shù)為31，介度的中位數(shù)為16.741，緊密度的中位數(shù)為 0.683，特征向量中心為0.135，基于局部平均連接的方法中心性為24.151，網(wǎng)絡中心為26.057，6個參數(shù)均超過中位數(shù)的靶點有25個，見圖4B。圖4B網(wǎng)絡中各節(jié)點連接度的中位數(shù)為31，介度的中位數(shù)為24，緊密度的中位數(shù)為 1，特征向量中心為0.207，基于局部平均連接的方法中心性為22，網(wǎng)絡中心為24，6個參數(shù)均超過中位數(shù)的靶點有14個，如圖4C所示，推測這些靶點可能是化濕行瘀清熱方治療口腔扁平苔蘚的關鍵靶點。

圖4 核心PPI的構建過程

2.6 GO和KEGG富集分析 以P<0.05和Q<0.05為篩選條件，對這58個共同靶點基因進行GO富集分析，這些基因包括BP、CC和MF，最后我們得到了2169個GO項目。結果(圖5)顯示，化濕行瘀清熱方通過調(diào)節(jié)多種生物過程(BP)發(fā)揮重要作用。主要5種是細胞對化學應激的反應(GO： 0062197)，對金屬離子的反應(GO：0010038)，對脂多糖的反應(GO：0032496)，對細菌來源分子的反應(GO：0002237)，對輻射的反應(GO：0009314)。前五大細胞成分(CC)項(P<0.05)為：膜筏(GO：0045121)，膜微區(qū)(GO：0098857)，膜區(qū)(GO：0098589)，細胞周期蛋白依賴性蛋白激酶全酶復合物(GO：0000307)，質膜外側(GO：0009897)。而主要的5個分子功能(MF)項(P<0.05)為：細胞因子受體結合(GO：0005126)，細胞因子活性(GO：0005125)，受體配體活性(GO：0048018)，信號受體激活劑活性(GO：0030546)，蛋白磷酸酶結合(GO：0019903)。通過運行R語言，對58個藥物-疾病共同靶點進行KEGG通路富集分析，共獲得131條KEGG通路。KEGG途徑富集分析基于P< 0.05，結果(圖6)顯示排名前30的信號通路。根據(jù)P值大小、富集靶基因多少和治療口腔扁平苔蘚的相關性，認為重要的信號通路包括IL-17信號通路(hsa04657)和腫瘤壞死因子(TNF)信號通路(hsa04668)。為分析化濕行瘀清熱方治療靶點在白細胞介素17(IL-17)信號通路、TNF信號通路的作用，利用R語言，得到IL-17信號通路和TNF信號通路的模式圖，見圖7、8。

圖5 58個藥物疾病共同基因的GO富集分析

圖6 58個藥物疾病共同基因的KEGG富集途徑

圖7 IL-17信號通路

2.7 分子對接結果 為進一步驗證化濕行瘀清熱方治療口腔扁平苔蘚的的分子機制，從PubChem數(shù)據(jù)庫中提取化濕行瘀清熱方的關鍵有效成分作為配體，從PDB數(shù)據(jù)庫中下載PPI核心網(wǎng)絡中的關鍵靶點作為受體，使用AutoDock Vina軟件進行分子對接。一般認為配體和受體結合的構象越穩(wěn)定，結合能越低，作用的可能性越大，以小于或等于-5.0 kcal/mol的結合能作為判斷標準。分子對接結果(表2)顯示，化濕行瘀清熱方的關鍵活性成分與關鍵靶點的結合能均小于-5.0 kcal/mol，表明化濕行瘀清熱方劑的關鍵活性成分與口腔扁平苔蘚治療的關鍵靶點具有良好的結合活性。其中山奈酚與核心靶蛋白結合情況最佳，蛋白激酶B1(Akt1)是化濕行瘀清熱方中關鍵化學成分結合活性最優(yōu)的靶蛋白。結合能最高的前4組對接情況如圖9所示，藍色代表藥物有效成分；綠色代表藥物活性成分靶點；黃色虛線代表藥物活性成分與靶點形成的氫鍵作用，其中Akt1通過氨基酸殘基ASP-274、VAL-271和ASN-204與山奈酚形成氫鍵作用；基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)通過氨基酸殘基ALA-189與槲皮素形成氫鍵作用，通過氨基酸殘基LEU-188與木犀草素形成氫鍵作用；TNF通過氨基酸殘基ILE-58與槲皮素形成氫鍵作用。

圖8 TNF信號通路

3 討論

目前，口腔扁平苔蘚的病因尚不清楚，大多數(shù)研究認為口腔扁平苔蘚是自身細胞毒性T淋巴細胞介導的免疫反應。中醫(yī)學將口腔扁平苔蘚歸為口瘡、口糜范疇，主要分為濕熱蘊結型、氣滯血瘀型、氣陰兩虛型和肝腎陰虛型，濕熱蘊結型和氣陰兩虛型較常見[8]。化濕行瘀清熱方以化濕醒脾、活血化瘀、清熱降火為原則，主要由黃柏、赤芍、佩蘭、甘草等11味中藥組成。方中黃柏、砂仁清熱燥濕，健脾化濕；佩蘭、茯苓、薏苡仁健脾利濕；赤芍、紅花、牡丹皮行氣活血化瘀；白鮮皮、金銀花清熱燥濕；甘草加強清熱益水之功。

現(xiàn)代藥理研究表明，赤芍可降低血管通透性，改善微循環(huán)，促進免疫功能，有利于黏膜上皮修復[9]；黃柏可抗炎抑菌，促進組織愈合[10]；佩蘭有抗炎、抗病原微生物作用[10]；甘草可保護、修復黏膜[4]。前期研究顯示，化濕行瘀清熱方具有調(diào)節(jié)免疫、炎性反應，改善患者臨床癥狀作用[4，8-12]。

本研究通過網(wǎng)絡藥理學，從化濕行瘀清熱方的11味中藥中提取了136種有效成分和對應的58個疾病靶點，并通過分子對接技術進行了驗證。根據(jù)分析，每種有效活性成分作用于至少一個靶基因，每個基因至少受一種活性成分的調(diào)控，表明化濕行瘀清熱方通過多組分、多靶點的方式作用于口腔扁平苔蘚。靶點數(shù)量最多的化濕行瘀清熱方活性成分為槲皮素(MOL000098)、木犀草素(MOL000006)、漢黃芩素(MOL000173)和山奈酚(MOL000422)，它們可能是化濕行瘀清熱方治療口腔扁平苔蘚的關鍵活性成分。槲皮素具有抗炎、抗病毒及鎮(zhèn)痛作用，用于各種炎癥[10-11]。槲皮素可抑制MMP-9產(chǎn)生，并通過阻斷核轉錄因子κB(NF-κB)信號通路，減少白細胞介素6(IL-6)、細胞間黏附分子-1(ICAM-1)等炎癥因子和趨化因子的產(chǎn)生[13]，還可減輕脂多糖誘導的人口腔角質形成細胞損傷[14]。木犀草素是一種天然類黃酮，具有很強的抗氧化和抗炎作用[15]。研究顯示木犀草素可能通過抑制NOD樣受體熱蛋白結構域相關蛋白3(NLRP3)/IL-1β信號通路，減輕牙周組織炎性反應、促進牙槽骨改建[16]；木犀草素明顯抑制人舌鱗癌細胞增殖，并且可通過抑制MMP-2和MMP-9的表達抑制人舌鱗癌細胞的侵襲和遷移[17]，此外它可預防非酒精性脂肪性肝炎[18]，抑制骨關節(jié)炎和神經(jīng)炎進展[19-20]。漢黃芩素具有多種藥理作用，包括抗炎、抑制腸道炎性反應和維持屏障功能。通過抗炎和抗氧化特性，漢黃芩素可減輕高血糖相關的心肌細胞損傷[21]。山奈酚屬于黃酮類苷元，具有較強的抗炎作用[22]，可降低牛皮癬皮膚損害中促炎性因子表達，包括IL-6、IL-17A 和腫瘤壞死因子α(TNF-α)[23]。本研究通過網(wǎng)絡藥理學對化濕行瘀清熱方治療口腔扁平苔蘚的關鍵活性化合物進行預測，部分已在文獻中報道，另外一些作用機制研究仍需進一步體內(nèi)外實驗驗證。

表2 中藥關鍵有效成分與核心靶點的結合能

圖9 山奈酚與Akt1(A)、槲皮素與MMP-9 (B)、木犀草素與MMP-9 (C)、槲皮素與TNF的分子對接模式圖

我們研究核心PPI發(fā)現(xiàn)，化濕行瘀清熱方的活性成分治療口腔扁平苔蘚的主要靶蛋白為Akt1、VEGFA、TNF、ICAM-1、MMP-9、CASP-3、MMP-2、EGF、EGFR、JUN、IL-4、CXCL-8、TP53、PTGS-2?？谇槐馄教μ\是一種慢性炎癥疾病。蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(Akt/mTOR)介導自噬反應可調(diào)節(jié)T淋巴細胞的免疫功能[24]，此外，Akt/mTOR信號通路失調(diào)，影響正常的T淋巴細胞與角質細胞功能，以及使細胞因子調(diào)控網(wǎng)絡失衡，影響口腔扁平苔蘚的發(fā)展[25]。血管內(nèi)皮生長因子A(VEGFA)經(jīng)基因芯片檢測，逆轉錄-聚合酶鏈式反應 (Reverse Transcription-Rolymerase Chain Reaction，RT-PCR)驗證，發(fā)現(xiàn)在口腔扁平苔蘚患者中表達增高[26]，并具有很強的促進血管生成作用，進而介導口腔扁平苔蘚慢性炎癥的進展。TNF是炎性反應的關鍵調(diào)節(jié)因子，其促炎作用可通過改變白細胞黏附分子、促炎因子和基質金屬蛋白酶的表達來體現(xiàn)[27-28]。細胞間黏附分子1(ICAM-1)不僅促進免疫和炎性反應，還可促進白細胞游離出血管[29]，免疫組化結果顯示，與正常皮膚相比，口腔扁平苔蘚患者TNF和ICAM-1的陽性表達率較高，且二者之間存在顯著相關性[30]，受炎性介質TNF誘導，MMP-9、VEGF、ICAM-1表達增加，導致基底細胞液化變性，口腔扁平苔蘚血管生成，以及淋巴細胞的浸潤到特定部位[30-31]。高表達的MMP-9和胱天蛋白酶3(CASP-3)可促進角質形成細胞的凋亡[32]，MMP-9和MMP-2與口腔扁平苔蘚的發(fā)生及癌變有關[33]。表皮細胞生長因子/表皮細胞生長因子受體(EGF/EGFR)影響細胞的增殖、分化和遷移[34]，糜爛型口腔扁平苔蘚中EGFR表達較網(wǎng)狀型及正常組織明顯增高，EGF/EGFR信號通路可能參與糜爛型口腔扁平苔蘚的癌變[35]。JUN屬于轉錄激活因子-1(AP-1)轉錄因子復合物，調(diào)節(jié)炎性過程以及細胞的增殖分化[36]，JUN與EGFR均是影響口腔扁平苔蘚發(fā)生發(fā)展的關鍵因子[37]，此外它們可能參與糜爛型口腔扁平苔蘚的癌變過程[35]。IL-4表達水平可作為反映口腔扁平苔蘚嚴重程度的標志物[38]，IL-25通過增強IL-4和趨化因子CXCL-8表達可促進輔助型T淋巴細胞2(Th2)在口腔扁平苔蘚疾病中的免疫反應[39]。前期臨床試驗表明，化濕行瘀清熱方能明顯降低患者唾液、血液中ICAM-1、MMP-9表達，改善患者臨床癥狀[9，40]。

為深入研究化濕行瘀清熱方治療口腔扁平苔蘚的作用機制，我們使用R語言對藥物-疾病共同靶點進行GO和KEGG富集分析。GO分析結果表明化濕行瘀清熱方治療口腔扁平苔蘚涉及的生物學過程主要是對細菌來源分子的反應，對脂多糖的反應及細胞因子活性、細胞因子受體結合、受體配體活性等分子生物學過程。KEGG富集分析結果表明，藥物-疾病共同靶點主要富集在炎癥免疫、病毒感染以及腫瘤相關通路，其中IL-17信號通路和TNF信號通路是化濕行瘀清熱方參與治療口腔扁平苔蘚的關鍵通路。前期使用基因芯片技術篩選出與口腔扁平苔蘚發(fā)病相關的8條通路，其中感染類疾病相關通路在口腔扁平苔蘚的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用，這與此次網(wǎng)絡藥理學分析結果一致[41]。IL-17由輔助性T淋巴細胞17(Th17)細胞分泌，并被證實參與炎癥、自身免疫等過程[42]，IL-17可誘導角化細胞釋放趨化因子配體20(CCL20)，促進炎性細胞向扁平苔蘚病損的遷徙和浸潤[43]，IL-23/IL-17通路的激活與MMP-9的高表達相關，并且參與了扁平苔蘚的發(fā)病[44]。在口腔扁平苔蘚中，NF-κB信號通路的激活，可促進TNF-α及IL-1β的高表達，口腔扁平苔蘚患者唾液中，NF-κB依賴因子TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8的高表達可用于診斷與治療口腔扁平苔蘚[45-46]。此外，復方甘草酸苷及養(yǎng)陰益氣、理氣活血中藥治療口腔扁平苔蘚、降低TNF表達已得到研究[47-50]。由此可見，化濕行瘀清熱方可能通過IL-17信號通路、TNF信號通路等發(fā)揮抗炎、抗感染作用，治療口腔扁平苔蘚。

分子對接結果表明，中藥關鍵有效成分槲皮素、木犀草素、漢黃芩素和山奈酚與Akt1、MMP-9和TNF等核心靶點結合親和力較強，說明化濕行瘀清熱方可與受體蛋白穩(wěn)定結合并發(fā)揮作用，作用機制多樣活躍，具有潛在的研究價值。

口腔扁平苔蘚是一種病因不明的免疫性炎癥性黏膜疾病，可能由多種基因和因素引起，中醫(yī)治療強調(diào)各種中草藥的組合，通過多方面、多角度的整體治療，通過網(wǎng)絡藥理學分析化濕行瘀清熱方治療口腔扁平苔蘚恰好證實這一點，然而中藥方劑成分復雜，需進一步研究來支持本研究結果。

化濕行瘀清熱方治療口腔扁平苔蘚在臨床中取得了較好的療效，本研究通過中藥網(wǎng)絡藥理學，構建了藥物疾病網(wǎng)絡，發(fā)現(xiàn)了化濕行瘀清熱方劑的主要活性成分和靶點并分析該藥物的作用機制，通過分子對接對結果進行了驗證，與前期研究及文獻報道治療口腔扁平苔蘚的機制一致。這表明化濕行瘀清熱方通過多成分、多靶點治療口腔扁平苔蘚，作用機制可能與IL-17信號通路和TNF信號通路相關。