血清REG4、CA199 水平與胃癌患者化療預后的相關性

張建立 王彥戈 魏慧娜 辛克北

（鄭州市第二人民醫院暨南大學附屬鄭州醫院消化內科，河南 鄭州 450000）

胃癌作為消化道常見惡性腫瘤，大部分患者就診時病情已進展至中晚期，多需要接受輔助化療治療，化療的實施主要通過抑制腫瘤細胞DNA復制，誘導腫瘤細胞凋亡，進而產生抗腫瘤之效，但因受多因素影響，部分胃癌患者化療效果不佳[1]。糖類抗原199（Carbohydrate antigen199，CA199）作為一種含黏液成分的大分子糖蛋白，多表達于腫瘤表面，同時有研究將CA199 用于消化道惡性腫瘤的診斷中獲益[2]。

血清再生基因4（Human regenerating gene Ⅳ，REG4）屬于依賴性凝聚素超家族之REG 表達產物，其在功能上類似于凝集素、抗凋亡因子或胰腺β 細胞和消化道上皮細胞的生長因子，與胃腸道細胞的增殖分化密切相關[3]。有研究指出，REG4 可選擇性表達胃腸道上皮和正常胰腺，在炎癥或腫瘤時可見REG4 原位或異位的高表達[4]。結合上述，猜測CA199、REG4 均可能會影響胃癌患者化療效果，可能與胃癌患者化療預后有一定關系?；诖耍狙芯繉⒅攸c觀察血清REG4、CA199 水平與胃癌患者化療預后的相關性?，F將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

前瞻納入2018 年6 月至2019 年9 月醫院收治的98 例胃癌患者作為研究對象。男66 例，女32 例；平均年齡59.38±6.67 歲；病理分期：Ⅲ期52 例，Ⅳ期46 例。

本研究的實施已獲得醫院倫理委員會批準，且患者及家屬均自愿簽署知情同意書。納入標準：①符合《內科學》[5]中關于胃癌的診斷標準；②無法接受手術治療或拒絕手術治療；③預計生存期＞3 個月。排除標準：①合并肝腎功能疾病、腫瘤病史；②有外傷、急性炎癥、嚴重血液系統疾病、潰瘍缺血性疾病及其他惡性腫瘤等可能影響REG4、CA199 水平；③既往接受過化療或距末次化療時間間隔在6 個月內。

1.2 方法

1.2.1 化療方案

均采用ECF 化療方案，第1d：靜脈滴注表柔比星（Ebewe Pharma Ges.m.b.H.Nfg.KG，批準文號H20181179，規格25ml:50mg）6.89×10-5g·kg-1，順鉑（Hospira Australia Pty Ltd，批準文號H20140372，規格50ml:50mg）2.22×10-4g·kg-1；第1～21d：靜脈滴注5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-FU ）0.015g·kg-1溶于5%葡萄糖溶液500ml 中，Qd，21 天為1 周期。至少完成3 個周期，并于3個周期后至少觀察1 個月。

1.2.2 預后評估方法

于化療3 個周期，參照《胃癌規范化診療指南(試行)》[6]中相關標準，完全緩解（complete response，CR）：腫瘤完全消失超過1 個月；部分緩解（partial response，PR）：腫瘤最大直徑及最大垂直直徑的乘積縮小50%，其他病變無增大，持續超過1 個月；病變穩定（stable disease，SD）：病變兩徑乘積縮小不超過50%，增大不超過25%，持續超過1 個月；病變進展（progressive disease，PD）：病變兩徑乘積增大超過25%。臨床控制率=（CR+PR）/總例數×100%，將CR、PR 患者示為預后良好，納入預后良好組，將SD、PD 患者示為預后不良，納入預后不良組。

1.2.3 基線資料統計方法

設計基線資料調查表，詳細記錄患者的一般資料，包括性別（男、女）、年齡、腫瘤部位（胃體、賁門）、病理分期（Ⅲ期、Ⅳ期，參照《美國癌癥聯合委員會（AJCC）修訂的腫瘤TNM 分期標準》[7]）、分化程度（低分化、中分化、高分化，參照《實用腫瘤內科治療》[8]中相關標準）、腫瘤大小。

1.2.4 血清指標檢測方法

治療前，取患者空腹靜脈血3 mL，3000r·min-1離心10min 后，分離上層血清，置于-70℃冰箱中保存，待測，采用酶聯免疫法測定CA199、血紅蛋白、REG4、CEA 水平，檢測試劑盒均購于上海酶聯生物科技有限公司。

1.3 統計學方法

采用SPSS 24.0 軟件進行數據處理，全部計量資料均經Shapiro-Wilk 正態性檢驗，符合正態分布以均數+標準差（±SD）表示，組間用t檢驗；計數資料用n（%）表示，采用χ2檢驗，等級資料采用秩和檢驗；采用Logistic 回歸分析檢驗血清REG4、CA199 水平與胃癌化療預后不良的關系；繪制ROC 曲線檢驗血清REG4、CA199 預測胃癌患者化療預后風險的價值，AUC＞0.7 具有預測性能；P＜0.05 為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 預后不良情況

經3 個周期化療且隨訪1 個月時，98 例胃癌患者中CR 9 例，PR 43 例，SD 24 例，PD 22 例。預后不良46 例，預后不良率為46.93%，預后良好52 例，預后良好率為53.06%。

2.2 預后不良與預后良好胃癌患者的基線資料比較

預后不良組血清REG4、CA199 高于預后良好組，差異有統計學意義（P＜0.05）；組間其他資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 預后不良與預后良好胃癌患者的基線資料比較

2.3 各主要指標與胃癌患者化療預后關系的Logistic 回歸分析

將化療后預后情況作為因變量（1=預后良好，0=預后不良），將2.2 基線資料中差異有統計學意義的變量作為自變量，逐個納入作單元Logistics回歸分析，后將P條件放寬至＜0.2，納入符合條件的變量（CEA、REG4、CA199）作為自變量（均為連續變量），結果顯示，胃癌患者化療前血清REG4、CA199、CEA 異常表達與化療預后有關，三者過表達均可能是胃癌患者化療預后不良的風險因子（OR＞1，P＜0.05）。見表2。

表2 各主要指標與胃癌患者化療預后關系的Logistic 回歸分析結果

2.4 胃癌患者化療前血清REG4、CA199 水平預測患者預后不良風險價值分析

將胃癌患者血清REG4、CA199 水平作為檢驗變量，經化療預后情況作為狀態變量（1=預后不良，0=預后良好），繪制ROC 曲線（見圖1）結果顯示，胃癌患者化療前血清REG4、CA199 水平預測患者化療3 個周期化療預后風險的AUC均＞0.70，有一定的預測價值，且以聯合檢測價值最佳。各指標對應最佳閾值、特異度、靈敏度及約登指數見表3。

圖1 血清REG4、CA199 水平預測胃癌患者化療預后不良風險的ROC 曲線圖

表3 胃癌患者化療前血清REG4、CA199 水平預測預后不良風險效能分析結果

3 討論

既往研究指出，表皮生長因子受體（Epiderma lgrowth factor receptor，EGFR）活化后通過PⅠ3K/AKT 通路和Ras-Raf-EGFR-MAPK 途徑將信號傳遞入核，而異常的EGFR 信號通路與腫瘤細胞的增殖、遷移、抗凋亡、血管生成等密切相關[9]。而REG4 可通過提高B 細胞淋巴瘤/白血病-x基因長片段（B-cell lymphoma/leukemia-x long，Bcl-xL）、B 細胞淋巴瘤/白血病-2（B-cell lymphoma/leukemia-2，Bcl-2）水平，來激活EGFR/Akt/AP-1 信號通路，繼而提高癌細胞存活率[10-11]。由此推測腫瘤患者的REG4 水平與EGFR密切相關二者之間的關系或可解釋REG4 表達與胃癌的關系。而CA199 為惡性腫瘤基因表達產物，與多種惡性腫瘤發生密切相關，如大腸癌、卵巢畸胎瘤等，在消化系統出現惡性腫瘤時，癌細胞產生的CA199 經胸導管進入血液循環，可使血清中的CA199 含量明顯升高[12-13]。相關報道將CA199 用于胃癌的診斷中獲得滿意的效果，并指出CA199 表達水平隨胃癌轉化及病變程度逐漸變化[14]。由此，推測血清REG4、CA199 異常表達不僅參與了胃癌的發生及發展，還可能與胃癌患者化療預后密切相關。

本研究結果顯示，預后不良組血清REG4、CA199 水平高于預后良好組，表明血清REG4、CA199 在胃癌預后不良患者中呈過表達，初步說明胃癌患者化療前血清REG4、CA199 水平的異常表達可能與患者的預后有關。簡單分析可能的原因，REG4 在胃腸道腫瘤中可能通過EGFR 信號通路發揮作用，當REG4 水平升高時，EGFR 被異常激活，并通過作用于細胞信號傳導、細胞增殖、細胞調控及血管生成等途徑，起到促進腫瘤的發生與發展的作用[15-16]。若化療藥物無法阻斷EGFR 信號通路，則難以阻止胃癌患者細胞增殖、血管生成等，因此會影響胃癌化療效果，這一結果又將反作用促進REG4 水平的升高，進一步增加胃癌患者預后不良風險[17]。而若化療前血清CA199 水平較高，說明腫瘤的惡性程度較為嚴重，腫瘤生物學行為較差，多表現為浸潤型生長，易侵犯漿膜，這將影響化療效果，增加化療預后不良風險[18]。

為進一步證實胃癌患者化療前血清REG4、CA199 水平與預后的關系，本研究作Logistic 回歸分析并繪制ROC 曲線，結果顯示，胃癌患者化療前血清REG4、CA199 水平預測患者化療3 個周期預后不良的AUC 均＞0.70，預測價值均較理想。上述結果證實，胃癌患者化療預后不良與治療前血清REG4、CA199 水平過表達有關，化療前檢測二者水平可用于胃癌患者化療預后風險評估預測，且若早期檢測胃癌患者血清REG4、CA199 水平過表達，建議可及時為患者調整用藥方案或增加其他治療方案，針對血清REG4、CA199 合理進行治療，或可對改善化療預后有一定價值。但同時血清REG4 在多種疾病中也呈異常過表達，因此在運用血清REG4 預測胃癌患者化療預后時，應排除影響血清REG4 水平的相關因素。

此外，本研究經Logistic 回歸分析還發現，胃癌患者化療前CEA 水平過表達與預后密切相關，分析其原因可能是CEA 為胃癌相關腫瘤標志物，CEA 水平過表達可能提示患者出現遠處轉移，易復發，增加化療后預后不良風險。

綜上所述，胃癌患者化療前血清REG4、CA199 水平異常表達與化療預后有一定聯系，二者過表達可能提示化療預后不良高風險，對預測胃癌患者預后不良風險有較高應用價值。