欖香烯對結直腸癌輔助化療患者免疫功能的影響

劉學軍 劉佳 董一帆

結直腸癌是消化系統腫瘤中最常見的惡性腫瘤之一，近年來隨著人們生活水平的提高及飲食習慣的改變，結直腸癌的患病率呈現出逐年上升的趨勢[1]。由于結直腸癌早期階段無明顯癥狀體征，當感到不適就醫時大多已至晚期。目前手術治療與輔助化療的結合是臨床治療結直腸癌的主要措施，但化療導致的消化道反應、骨髓抑制及免疫功能的損害降低了患者的生活質量[2]。因此，選取新藥物改善患者化療效果有重要意義。欖香烯是從姜科植物溫郁金中中提取出來的化合物，主要成分為β-欖香烯，對人體許多腫瘤如肺細胞癌、卵巢癌和胃癌等具有明顯的殺傷抑制作用，在臨床上有較為廣泛的應用價值[3]。據研究報道，β-欖香烯可促進卵巢癌細胞的凋亡，對卵巢癌的治療有促進作用[4]。也有報道肺癌患者在化療同時使用欖香烯注射液可顯著改善患者的免疫功能[5]。但欖香烯能否改善結直腸癌化療患者的免疫功能目前尚無定論。本研究擬探討結直腸癌患者在術后化療的同時給予欖香烯注射液對免疫功能的影響，具體如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機選取2018年1月至2020年6月于我院行結直腸癌根治性手術的患者70例為研究對象，年齡41～65歲，術后行病理活檢確診為結直腸癌，術前未接受放化療及免疫靶向等治療；存在肝腎功能不全、自身免疫系統疾病或患有其他部位腫瘤的患者未予納入。采用電子計算機獲得隨機數字的方法將70例患者分為研究組和對照組，每組35例。另納入同期體檢的健康者30例為正常對照組。研究組中男22例，女13例；年齡42～64歲；結腸癌27例，直腸癌8例;依據TNM 分期標準：Ⅰ期2例,Ⅱ期7例,Ⅲ期17例,Ⅳ期9例。對照組中男25例，女10例；年齡41～65歲；結腸癌21例，直腸癌14例; 依據TNM 分期標準：Ⅰ期3例,Ⅱ期5例,Ⅲ期20例,Ⅳ期7例。正常對照組中男15例，女15例；年齡40～65 歲；無心血管疾病、糖尿病或腫瘤病史。研究組和對照組患者的資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，而與正常對照組比較差異有統計學意義(P<0.05)。本研究已取得本院倫理委員會批準，所選取的患者均知情并簽署同意書。

1.2 術后輔助化療方案 結直腸癌根治術后研究組和對照組患者均行XELOX化療方案：第1天將100 mg/m2奧沙利鉑(江蘇恒瑞醫藥股份有限公司,國藥準字H20000337，商品名：艾恒) 溶于5%葡萄糖注射液中，2 h內靜脈滴注完畢；之后口服卡培他濱(上海羅氏制藥有限公司，國藥準字H20073024，商品名：希羅達)2 000 mg/m2，2次/d，1～14 d治療，休息7 d。其中研究組在行XELOX化療方案的同時給予欖香烯注射液400 mg，靜脈滴注，1次/d，1～14 d治療,休息7 d；而對照組行XELOX化療方案的同時給予等量的5%葡萄糖注射液，靜脈滴注，1次/d，1～14 d治療，休息7 d。2組均以21 d為1個治療周期，共行6～8個周期。

1.3 觀察指標 分別于化療前1 d和化療后1個月時用含有EDTA-Na2的采血管抽取各組患者晨起空腹的肘靜脈血3 ml，同時另用不含有抗凝劑的采血管抽取各組患者晨起空腹的肘靜脈血3 ml。

1.3.1 比較3組白細胞和血紅蛋白：將抽取的抗凝血中2 ml血液置于全自動血細胞分析儀中行血常規(白細胞和血紅蛋白)檢測。

1.3.3 比較3組體液免疫指標：待抽取的3 ml血液凝固后，上機離心常規分離血清，采用酶聯免疫吸附實驗法檢測各組TNF-α水平(ELISA試劑盒購自伊萊瑞特生物科技股份有限公司，嚴格按照說明書進行操作)，乳膠增強免疫散射比濁法檢測CRP含量。

1.3.4 比較3組結直腸癌的復發率和不良反應發生率：不良反應包括消化道反應、骨髓抑制和手足綜合征等。

2 結果

2.1 4組血常規情況 在化療前，研究組、病例組和對照組白細胞和血紅蛋白含量明顯低于正常對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；研究組、病例組和對照組之間差異無統計學意義(P>0.05)；化療后1個月，研究組白細胞的水平和血紅蛋白水平進一步下降，低于正常對照組，且研究組的白細胞水平和血紅蛋白水平下降較少，較對照組高，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 4組白細胞和血紅蛋白的檢測結果

2.2 4組體液免疫功能情況 在化療前，病例組、研究組和對照組血清TNF-α和CRP的水平明顯高于正常對照組，組與組之間的差異有統計學意義(P<0.05)，病例組、研究組和對照組間的差異無統計學意義(P>0.05)；化療后，研究組和對照組血清TNF-α和CRP的水平較化療前有所下降，而研究組下降更為明顯，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 4組血清炎性因子TNF-α和CRP水平比較

表3 4組血清細胞免疫指標水平比較

2.4 4組不良反應的發生率情況 研究組發生惡心、嘔吐、胃腸不適等消化道癥狀以及骨髓抑制、手足綜合征等不良反應的發生率[25.7%(9/35)]明顯低于對照組[51.4%(18/35)]，差異有統計學意義(χ2=4.814，P=0.028)。見表4。

表4 2組不良反應發生率 n=35,例(%)

3 討論

結直腸癌術后輔助化療是綜合治療的重要措施，對提高患者的治愈率、改善生存質量有重要意義[6-8]。但由于腫瘤細胞的浸潤、手術應激和化療藥物對機體的副反應等因素的影響，患者多出現抵抗力低下、免疫功能受損的表現[9]，嚴重影響術后康復及生存質量。因此，如何減輕化療反應、改善免疫功能的損害對改善結直腸癌患者的預后有非常重要的臨床意義。

欖香烯是從溫郁金中提出來的以β-欖香烯為主要成分的抗腫瘤化合物，β-欖香烯可通過影響腫瘤細胞的增殖、浸潤及腫瘤血管的形成而發揮對腫瘤組織的抑制殺傷作用，已被廣泛應用于臨床治療[10]，但β-欖香烯對結直腸癌作用的研究尚不充分。故本研究從免疫功能的角度設計實驗，觀察欖香烯對術后化療的結直腸癌患者免疫功能的影響。本研究中，研究組患者在接受XELOX方案化療的同時予以欖香烯注射液來觀察其對化療效果及免疫功能的影響。

選取白細胞和血紅蛋白為觀察指標來檢測患者骨髓抑制的情況；TNF-α和CRP為體液免疫檢測指標[11,12]，TNF-α是由單核巨噬細胞產生的炎性因子，通過誘導腫瘤細胞的凋亡、促進免疫應答進而發揮抗腫瘤的作用；CRP是由肝細胞分泌的急性時相蛋白，當機體發生炎性反應、損傷應激和腫瘤浸潤時可顯著大幅增高，可作為腫瘤治療情況及預后的敏感指標。

本研究一并觀察了欖香烯對結直腸癌患者的復發率和不良反應發生率的影響，結果顯示研究組明顯低于對照組，表明欖香烯注射液可改善結直腸癌患者的化療療效、減輕化療對機體的不良反應并提高免疫功能。近年來，已有報道證實，欖香烯化合物通過誘導肺癌、肝癌等癌細胞的凋亡，抑制腫瘤組織周邊血管的生成等環節來發揮明顯的抑制殺傷作用[14]。有研究通過體內動物實驗和體外細胞實驗的方法，將欖香烯加入到多柔比星組之后，發現腫瘤體積縮小，抑瘤率明顯提高，表明欖香烯和抗腫瘤藥有協同作用，可抑制腫瘤進展[15]。體外細胞實驗也發現胃癌細胞SGC7901可隨著β-欖香烯作用濃度的增加而加速腫瘤細胞的凋亡進而抑制其增殖[16]。還有研究通過在體外對人結腸癌細胞DLD-1的培養，應用不同濃度的β-欖香烯對人結腸癌細胞DLD-1進行干預，并檢測相關凋亡蛋白，結果顯示β-欖香烯可抑制DLD-1細胞的增殖并具有濃度依賴性，認為欖香烯可通過促進ROS及凋亡蛋白的形成來誘導DLD-1細胞的凋亡[17]。

為了更加全面系統的認識到β-欖香烯的藥理作用及臨床效應，本研究開展了β-欖香烯對結直腸癌患者化療后免疫功能影響的研究，與加用5%葡萄糖注射液的對照組相比，采用β-欖香烯注射液的研究組患者機體的免疫指標明顯得到改善，提高了體液免疫細胞的水平，同時降低了腫瘤的復發率和不良反應發生率，減弱了骨髓的抑制作用，這說明β-欖香烯對腫瘤患者是有效的，不僅增強了免疫功能，而且提高患者的治療效果和生存質量。

總之，結直腸癌患者術后進行輔助化療的同時加用β-欖香烯注射液可改善化療效果、減輕化療反應、提高機體的免疫功能并緩解骨髓的抑制情況，但尚不足的是本研究樣本量小，觀察周期短，β-欖香烯是否可以長期穩定的提高患者免疫功能并改善預后尚需進一步的隨訪。