13種農藥對甘肅定西和武威地區小菜蛾的毒力及藥效

金 晶，羅 寧，李金鴻，李惠霞，陳愛昌，楊順義

(1.甘肅農業大學 植物保護學院，甘肅省農作物病蟲害生物防治工程實驗室，蘭州 730070；2.定西市植保植檢站，甘肅定西 743000)

小菜蛾(Plutellaxylostella)是為害十字花科蔬菜的毀滅性害蟲。其生活周期短且適應能力強，嚴重影響農產品的產量和品質[1-2]。由于小菜蛾對十字花科蔬菜基本都有取食性，加之殺蟲劑的濫用及生活史的特殊性，使之成為當今最難防控的害蟲之一[3-4]。全球每年因小菜蛾造成經濟損失高達40～50億美元[5]。小菜蛾在中國各蔬菜種植區均有分布，每年經濟損失達7.7億美元，防治極其困難[6]。小菜蛾通過幼蟲取食造成減產，嚴重時達90%以上，甚至絕收，嚴重影響十字花科蔬菜生產安全性[4]。

小菜蛾防治措施主要有輪作、黑光燈誘殺和化學防治等，目前仍以化學藥劑為主，多數地區連年大量不合理使用化學藥劑，使小菜蛾長期生活在較高濃度的藥劑選擇壓力下，促進了小菜蛾抗藥性的產生和發展[7-9]。2014年首次發現小菜蛾田間種群對溴氰蟲酰胺的抗性[10]。在湖南省發現對茚蟲威、阿維菌素和高效氯氟氰菊酯產生高抗性[11]。總之，自1953年報道小菜蛾對DDT產生抗藥性以來，已對多數殺蟲劑產生不同程度抗性，幾乎涉及所有藥劑。研究表明，濫用化學藥劑極易誘導小菜蛾產生抗藥性，因此小菜蛾抗藥性治理是亟待解決的問題。

甘肅省是中國西北地區高原夏菜的主產區，2018年僅蘭州的種植面積就已達7.47萬hm2，年產量310萬t，種植面積在逐年擴大[12]。小菜蛾是高原夏菜安全生產中的主要害蟲，為害一直呈上升趨勢。目前，生產中小菜蛾的防治仍以大量使用化學藥劑為主，既增加農藥殘留又促進小菜蛾抗藥性的產生和發展。因此，減少化學藥劑的使用量，即“雙減”之一是中國當前生產中的迫切需求。本試驗選用市場上常用的包括吡啶類、多角體病毒類、多殺菌素類、半合成抗生素類、植物源類、微生物源類、惡二嗪類、菊酯類、硫脲類等9類13種殺蟲劑(其中吡啶類、病毒類、多殺菌素類等殺蟲劑在甘肅地區的抗性水平未見報道)，以定西和武威(為雙減項目在西北地區的試驗點)蔬菜產區小菜蛾種群為研究對象，結合室內和田間試驗，測定其對小菜蛾相對敏感及田間種群3齡幼蟲的毒力，并在此基礎上篩選毒力較高的藥劑開展田間藥效試驗，以期篩選出防治小菜蛾最佳的藥劑，為甘肅乃至西北高原夏菜小菜蛾的綜合防控提供依據。

1 材料與方法

1.1 材 料

1.1.1 供試昆蟲 小菜蛾相對敏感(RS)種群：相對敏感種群的選育參照韓招久等[13]的方法，將西北農林科技大學植物保護學院提供的敏感種群作為蟲源，在甘肅農業大學植物保護學院養蟲室飼養，飼料是昆蟲實驗室內育苗移栽的黃花芥藍，且在飼養期間取食未接觸任何農藥和化學藥劑的植物，作為相對敏感種群。飼養條件：溫度為(25±1)℃，相對濕度為(75±5)%，光周期(L∶D)為16 h∶8 h。

小菜蛾田間種群：采自定西市(D-R種群)和武威市(W-R種群)高原夏菜產區。采集3～4齡幼蟲，室內飼養1～2代后用于室內毒力測定。

1.1.2 飼養方法 將小菜蛾蛹放于養蟲籠中，待其羽化、產卵后收集卵。將所收集只有卵的葉片，放于塑料盒中飼養，一般3 d后孵化，每天更換補充新鮮葉片供其取食生長，直至化蛹，將蛹收集到培養皿中，保存于4 ℃冰箱中(時間不可超過1個月，否則會影響羽化后產卵)。在飼料充足的情況下，同一天收集足夠多的卵，讓其孵化生長，大量幼蟲相繼生長至3齡期，用于試驗研究。

1.1.3 供試藥劑 室內毒力測定：95%氯蟲苯甲酰胺原藥、97%溴氰蟲酰胺原藥、88%茚蟲威原藥(美國富生物科技有限公司)，5%苦參堿母藥(北京三浦百草綠色植物制劑有限公司)，95.6%高效氯氰菊酯原藥、77%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽原藥、97%高效氯氟氰菊酯原藥(南京紅太陽股份有限公司)，10%四氯蟲酰胺懸浮劑(沈陽科創化學品有限公司)，50%丁醚脲懸浮劑(東莞市瑞德豐生物科技有限公司)，1×109PIB/mL甘藍夜蛾核型多角體病毒懸浮劑(江西新龍生物科技股份有限公司)，25%乙基多殺菌素水分散粒劑(美國陶氏益農公司)，8 000 IU/μL蘇云金桿菌懸浮劑(山東魯抗生物農藥有限責任公司)，2×109PIB/mL棉鈴蟲核型多角體病毒懸浮劑(河南勇冠喬迪農業科技有限公司)。

田間藥效試驗：0.5%苦參堿水劑(北京三浦百草綠色植物制劑有限公司)，5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽微乳劑(深圳諾普信農化股份有限公司)，4.5%高效氯氰菊酯微乳劑(東莞市瑞德豐生物科技有限公司)，150 g/L茚蟲威乳油、10%溴氰蟲酰胺懸浮劑(美國富生物科技有限公司)，10%四氯蟲酰胺懸浮劑(沈陽科創化學品有限公司)，25%乙基多殺菌素水分散粒劑(美國陶氏益農公司)，8 000 IU/μL蘇云金桿菌懸浮劑(山東魯抗生物農藥有限責任公司)，5%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑(美國杜邦公司)，1×109PIB/mL甘藍夜蛾核型多角體病毒懸浮劑(江西新龍生物科技股份有限公司)，2×109PIB/mL棉鈴蟲核型多角體病毒懸浮劑(河南勇冠喬迪農業科技有限公司)。

1.1.4 試驗地概況 試驗地一：位于甘肅省定西市內官鎮邊家灣村，土質為沙壤土，面積為0.267 hm2，肥力中等，于2019年6月11日移栽甘藍(Brassicaoleracea)。試驗地二:位于武威市民勤縣蔡旗鄉月牙村，土質為沙壤土，面積為0.133 hm2，肥力中等，于2019年8月23日定植娃娃菜(Brassicacampestris)。

1.2 試驗方法

1.2.1 室內毒力測定 采用浸漬法，將原藥分別用二甲基甲酰胺(氯蟲苯甲酰胺)，二氯甲烷(高效氯氰菊酯、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、丁醚脲)，丙酮(茚蟲威、高效氯氟氰菊酯)，二甲基亞砜(苦參堿)，甲醇(溴氰蟲酰胺、乙基多殺菌素)和乙腈(四氯蟲酰胺)溶解，用含1‰吐溫80蒸餾水按濃度梯度稀釋藥劑，用相同濃度溶劑處理作為對照，制劑直接用水稀釋(濃度梯度按照最高濃度小菜蛾死亡率不超過80%，最低濃度死亡率不小于20%的原則，經過多次預試驗最終確定)。將直徑為 3 cm的新鮮甘藍葉餅于藥液中浸漬10 s、晾干、轉至培養皿中，每皿3個葉餅、10頭3齡幼蟲，每個處理重復3次，飼養條件同相對敏感種群。藥后48 h計算毒力回歸方程、LC50值及置信區間。

1.2.2 田間試驗藥劑處理 試驗地一設置11個處理，制劑用量分別為：0.5%苦參堿水劑1 500 mL/hm2，5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽微乳52.5 g/hm2，4.5%高效氯氰菊酯微乳劑750 g/hm2，150 g/L茚蟲威乳油210 mL/hm2，10%四氯蟲酰胺懸浮劑525 g/hm2，25%乙基多殺菌素水分散粒劑195 g/hm2，10%溴氰蟲酰胺懸浮劑270 mL/hm2，8 000 IU/μL蘇云金桿菌懸浮劑3 750 mL/hm2，5%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑637.5 mL/hm2，1×109PIB/mL甘藍夜蛾核型多角體病毒懸浮劑750 mL/hm2，2×109PIB/mL棉鈴蟲核型多角體病毒懸浮劑1 200 mL/hm2，用水量為450 L/hm2。于2019年6月28日采用背負式噴霧器均勻噴霧施藥。

試驗地二直接在試驗一藥劑篩選的基礎上共設置4個處理，制劑用量分別為：25%乙基多殺菌素水分散粒劑180 g/hm2，5%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑450 mL/hm2，1×109PIB/mL甘藍夜蛾核型多角體病毒懸浮劑750 mL/hm2，10%四氯蟲酰胺懸浮劑600 g/hm2，用水量為450 L/hm2。于2019-08-30采用背負式噴霧器均勻噴霧施藥。 每處理重復3次，小區面積為50 m2，以不施任何藥劑處理為對照，各小區隨機排列。

1.2.3 蟲口基數調查與統計 施藥前調查蟲口基數。采用五點取樣法，每點10株甘藍，每小區50株，定株定點標記，統計幼蟲數。施藥后1、3、 7 d統計各處理活蟲數。計算蟲口減退率和防治效果，公式為：

蟲口減退率=(施藥前小區蟲數-施藥后小區蟲數)/施藥前小區蟲數×100%

防治效果=(處理區蟲口減退率-對照區蟲口減退率)/(100-對照區蟲口減退率)×100%

1.2.4 數據分析 用Excel 2010和SPRS 22.0軟件進行統計分析，采用Duncan’s新復極差法及t檢驗法進行5%差異顯著性分析。

2 結果與分析

2.1 對小菜蛾RS種群及田間種群的毒力

13種殺蟲劑對小菜蛾RS種群室內毒力如表1所示，各類殺蟲劑對小菜蛾RS種群室內48 h毒力由大到小依次為多殺菌素類>吡啶類>微生物源類>半合成抗生素類>惡二嗪類>硫脲類>菊酯類>植物源類，多角體病毒類屬于昆蟲病毒生物農藥。其中，乙基多殺菌素在48 h時毒力最大，LC50為0.129 mg/L；四氯蟲酰胺次之，LC50為0.178 mg/L；苦參堿毒力最小，LC50為62.357 mg/L；甘藍夜蛾核型多角體病毒及棉鈴蟲核型多角體病毒的LC50分別為2.414×105PIB/mL和8.082×105PIB/mL 。

表1 對不同小菜蛾種群的毒力Table 1 Virulence test results of different Plutella xylostella populations

D-R種群對部分殺蟲劑產生不同程度的抗性。就毒力測定而言，四氯蟲酰胺對定西田間種群的室內48 h毒力最大，LC50為0.193 mg/L；其次為溴氰蟲酰胺，LC50為0.506 mg/L；高效氯氰菊酯最差，LC50為197.875 mg/L。根據毒力測定結果可看出，該種群對高效氯氰菊酯的毒力最低，與RS種群相比，抗性倍數達4.2以上，且對高效氯氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、丁醚脲和蘇云金桿菌均產生不同程度抗藥性，但抗性倍數不是很高，說明該種群幼蟲產生抗藥性的趨勢較緩慢。

9種殺蟲劑對W-R種群室內毒力由大到小依次為四氯蟲酰胺>乙基多殺菌素>氯蟲苯甲酰胺>甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽>茚蟲威>苦參堿>高效氯氟氰菊酯>高效氯氰菊酯，其LC50值分別為0.228、0.643、0.809、7.620、12.118、 62.427、116.531和193.564 mg/L，甘藍夜蛾核型多角體病毒的LC50值為7.564×105PIB/mL。與RS種群相比，對當地常用藥劑高效氯氟氰菊酯、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽和高效氯氰菊酯抗性倍數為3.105、4.243和4.160倍。

綜合3個種群毒力測定結果來看，四氯蟲酰胺對小菜蛾RS種群、D-R種群和W-R種群在 48 h內的毒力最大，LC50分別為0.178 、0.193、 0.228 mg/L；其次是乙基多殺菌素和氯蟲苯甲酰胺，LC50分別為0.129、0.558、0.462 mg/L和 0.260、0.631、0.809 mg/L。

2.2 不同殺蟲劑對小菜蛾田間種群的防治效果

2.2.1 D-R種群 由表2可見，所有藥劑處理的小菜蛾數量均不同程度減少，而未施任何藥劑的對照處理小菜蛾數量增加 ，說明所用13種藥劑均對小菜蛾有一定防治效果。其中1×109PIB/mL甘藍夜蛾核型多角體病毒懸浮劑750 mL/hm2防治效果最好，藥后1 d防效達 62.95%，與對照差異顯著。4.5%高效氯氰菊酯微乳劑750 g/hm2防治效果較差，防效僅為 29.03%，與其他處理差異顯著。藥后3 d，5%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑637.5 mL/hm2防治效果最好，防效為61.01%，4.5%高效氯氰菊酯微乳劑750 g/hm2和150 g/L茚蟲威乳油210 mL/hm2防治效果較差，防效為33.64%和 38.22%。藥后7 d，1×109PIB/mL甘藍夜蛾核型多角體病毒懸浮劑750 mL/hm2防治效果最好，為 84.28%;5%四氯蟲酰胺懸浮劑次之，為 77.96%。8 000 IU/μL蘇云金桿菌懸浮劑防效最差，為45.02%。結合所有藥劑處理組結果來看，1×109PIB/mL甘藍夜蛾核型多角體病毒、5%四氯蟲酰胺和5%氯蟲苯甲酰胺的防治效果最好，速效性優于其他藥劑。

表2 不同藥劑對D-R種群小菜蛾的防治效果Table 2 Control efficacy of different pesticides on Plutella xylostella of D-R population

2.2.2 W-R種群 25%乙基多殺菌素水分散粒劑180 g/hm2處理速效性最佳，藥后1 d防效達49.26%，與其他處理差異顯著。藥后3 d，25%乙基多殺菌素水分散粒劑、5%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑、1×109PIB/mL甘藍夜蛾核型多角體病毒懸浮劑和10%四氯蟲酰胺懸浮劑處理防效相對較高，均超過50%；25%乙基多殺菌素水分散粒劑防效達到57.80%，與其他處理差異顯著。藥后 7 d， 25%乙基多殺菌素水分散粒劑處理防效最高，為80.93%，其余處理防效均在76.93%以上(表3)。

表3 不同藥劑對W-R種群小菜蛾的防治效果Table 3 Control efficacy of different pesticides on Plutella xylostella of W-R population

綜上所述，D-R種群對高效氯氰菊酯的抗性最高， W-R種群對甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽的抗性最高。

3 結論與討論

小菜蛾是一種寡食性害蟲，也是對十字花科蔬菜具有毀滅性危害的害蟲。隨著全球氣候變暖，中國小菜蛾分布區域呈北移趨勢，近年來青海、甘肅及內蒙古等地區小菜蛾發生愈來愈嚴重[14]。為了減少農民用藥的盲目性，提高小菜蛾防治效率，增加十字花科蔬菜經濟效益，本試驗在甘肅高原夏菜主產區，測定13種不同藥劑處理對小菜蛾蟲口基數變化的影響，評價藥劑的防治效果。研究結果表明，13種試驗藥劑均抑制小菜蛾的繁殖。

通過室內毒力測定，明確了13種藥劑LC50大小。各類殺蟲劑對小菜蛾RS種群毒力由大到小依次為多殺菌素類>雙酰胺類>微生物源類>半合成抗生素類>惡二嗪類脲類>植物源類>菊酯類。其中，乙基多殺菌素的毒力最大，LC50為0.129 mg/L；苦參堿毒力最小，LC50為62.357 mg/L 。D-R種群對部分殺蟲劑產生不同程度的抗性。四氯蟲酰胺對D-R種群的毒力最大，LC50為0.193 mg/L；高效氯氰菊酯毒力最小，LC50為197.875 mg/L，與RS種群相比，抗性倍數達4.2以上，且對高效氯氟氰菊酯、丁醚脲和蘇云金桿菌均產生不同程度抗藥性。四氯蟲酰胺對W-R種群的室內毒力最大，LC50為0.228 mg/L；高效氯氰菊酯最小， LC50為193.564 mg/L。與RS種群相比，對當地常用藥劑高效氯氟氰菊酯、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽和高效氯氰菊酯抗性倍數分別為3.105、4.243和4.160倍。

本試驗毒力測定中，高效氯氰菊酯對RS種群的LC50為46.526 mg/L，略低于殷劭鑫等[15]的結果(49.574 5 mg/L)，遠低于呂銘瀟等[16]的結果(116.752 8 μg/mL)。因此，可保證本研究中所用小菜蛾RS種群的敏感性。實際上小菜蛾敏感種群的選育需根據普通遺傳學原理，通過雌性成蟲單獨配對，使其子代對殺蟲藥劑的敏感性狀發生分離，用藥劑的區分劑量測定其4齡幼蟲，選擇敏感性高的作為下一代蟲種，繼續單配選育。經過連續多代的汰選，直至對多數藥劑有較高的敏感性為止[16-17]。因而用抗性指數的大小來評價兩個小菜蛾種群的抗性監測結果具有一定的可靠性，但是該方法不適合早期抗性監測[18]。可結合聯合國糧農組織建議的區分劑量法也叫診斷劑量技術、神經電生理監測技術和生物化學檢測法等更準確地檢測小菜蛾的抗藥性[19]。

田間防效受溫度、降雨和天敵等的影響，但抗藥性是影響田間防效的主要因素。研究表明，金華地區小菜蛾田間種群對氯蟲苯甲酰胺的敏感性逐漸下降，柳州地區、佛山地區和華南地區小菜蛾田間種群對氯蟲苯甲酰胺表現分別為抵抗、中抗和高抗。海口地區小菜蛾種群對溴氰蟲酰胺產生抗性[20-22]。四氯蟲酰胺對商丘地區小菜蛾防效較好，未產生抗性[23]。本研究結果表明，1×109PIB/mL甘藍夜蛾核型多角體病毒懸浮劑對D-R種群防效最好，藥后1、3、7 d防效分別為 62.95%、65.42%和84.28%，其次是10%四氯蟲酰胺懸浮劑和5%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑，8 000 IU/μL蘇云金桿菌懸浮劑、4.5%高效氯氰菊酯微乳劑和0.5%苦參堿水劑對小菜蛾的田間防效相對較低，可能是該地區高頻率使用這3種藥劑所致。核型多角體病毒類和吡啶類殺蟲劑對的D-R種群防治效果最好，速效性優于其他藥劑處理組。25%乙基多殺菌素水分散粒劑和10%四氯蟲酰胺懸浮劑對W-R種群小菜蛾防效最好，藥后7 d防效分別為80.93%和80.07%。試驗中選用的殺蟲劑多為化學合成殺蟲劑，極易使小菜蛾產生抗藥性，可進一步擴大和加深生物源農藥的開發與應用。試驗所在區域氯蟲苯甲酰胺、溴氰蟲酰胺和四氯蟲酰胺未大量使用，無明顯抗藥性。兩種核型多角體病毒及乙基多殺菌素防效較好，對人畜和環境安全。因此，兩種核型多角體病毒、乙基多殺菌素及3種吡啶類殺蟲劑可在西北旱區蔬菜小菜蛾等鱗翅目害蟲的綜合防治中推廣應用，但需注意不同藥劑的輪換使用，以增長藥劑使用年限[24-25]。