uVEGF、α1-mG及β2-MG水平變化在DN患者中的意義

周樹萍,何 琴

流行病學(xué)研究表明，糖尿病腎病(DN)的發(fā)病率可超過869/1萬人左右[1]，在合并有基礎(chǔ)性高血壓或者高脂血癥的群體中，DN的發(fā)病率可進(jìn)一步上升[2]。臨床上DN的發(fā)生，不僅能夠?qū)е禄颊呱钯|(zhì)量的下降，同時(shí)還能夠增加遠(yuǎn)期腎功能衰竭或者多器官功能障礙的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。DN的早期診斷有重要的意義，其能夠在DN的早期臨床干預(yù)方面發(fā)揮作用。尿液細(xì)胞因子的分析能夠在DN的早期診斷過程中發(fā)揮作用。血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(uVEGF)是血管內(nèi)皮生長因子家族成員，其能夠通過誘導(dǎo)血管內(nèi)皮的損傷，加劇腎小球入球小動(dòng)脈的痙攣，加劇腎臟組織的缺血缺氧性損傷，促進(jìn)DN的發(fā)生[3]。α1微球蛋白(α1-mG)、β2微球蛋白(β2-MG)是紅細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞等有核細(xì)胞分泌的糖蛋白因子，在腎小球近端小管重吸收后被分解利用[4-5]。為了揭示uVEGF、α1-mG及β2-MG的表達(dá)與DN患者的病情關(guān)系，從而為臨床上DN的診療提供參考，本次研究選取我院確診的DN患者，探討了uVEGF、α1-mG及β2-MG的表達(dá)及其DN患者腎損害評(píng)估的臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取我院確診T2DM伴微量清蛋白尿患者90例(微量組)、T2DM伴大量清蛋白尿患者90例(大量組)、健康對(duì)象90例作為對(duì)照組。微量組患者年齡50～75歲，平均年齡(60.2±8.1)歲，男53例、女37例，BMI(23.3±2.2) kg/m2。大量組患者年齡52～79歲，平均年齡(61.4±7.5)歲，男50例、女40例，BMI (23.2±2.5)kg/m2。對(duì)照組年齡45～79歲，平均年齡(59.6±10.2)歲，男50例、女40例；，BMI(22.9±3.0)kg/m2。三組研究對(duì)象的年齡、性別、BMI比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.1.1 診斷及入選標(biāo)準(zhǔn)：①DN患者的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考中華醫(yī)學(xué)會(huì)制定的標(biāo)準(zhǔn)[6]：尿清蛋白排泄率≥20 μg/min可確診為DN，其中UAER20～200 μg/min為微量組、UAER≥200 μg/min為大量組；②對(duì)照組為健康體檢對(duì)象；③本研究符合《赫爾透辛基宣言》相關(guān)醫(yī)學(xué)倫理規(guī)定，經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.1.2 研究對(duì)象的排除標(biāo)準(zhǔn)：①惡性腫瘤患者；②腦血管疾病患者；③原發(fā)性腎臟疾病患者；④高血壓疾病患者；⑤長期應(yīng)用免疫性制劑的患者；⑥嚴(yán)重的肝腎功能疾病患者。

1.2 指標(biāo)檢測方法:采用一次性靜脈血采集器進(jìn)行肘部靜脈血采集，采集5 mL靜脈血后自然放置，取上清液體進(jìn)行檢測。采用杭州精密儀器公司生產(chǎn)的BIOSYS-2008全自動(dòng)生化檢測儀器進(jìn)行尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、空腹血糖(FPG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)檢測，配套試劑盒購自北京博奧森生物公司；采用一次性采集器清潔中段尿液5 mL自然放置，1 000 r/min離心10 min，取上清液體進(jìn)行檢測，采用貝克曼庫爾特公司UniCel DxI 800免疫發(fā)光儀器進(jìn)行α1-mG及β2-MG的檢測，配套試劑盒購自北京九強(qiáng)生物公司；采用ELISA法進(jìn)行uVEGF的檢測，配套儀器A4500酶標(biāo)儀購自羅氏檢測公司。

2 結(jié)果

2.1 3組研究對(duì)象的uVEGF、α1-mG及β2-MG水平比較:微量組和大量組的uVEGF、α1-mG及β2-MG顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；大量組的uVEGF、α1-mG及β2-MG顯著高于微量組(P<0.05)，見表1。

表1 3組研究對(duì)象的uVEGF、α1-mG及β2-MG水平比較

2.2 3組研究對(duì)象的血糖及腎功能指標(biāo)水平比較:微量組和大量組的BUN、Scr顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；大量組的BUN、Scr顯著高于微量組(P<0.05)；微量組和大量組的FPG及HbA1c顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，見表2。

表2 3組研究對(duì)象的血糖及腎功能指標(biāo)水平比較

2.3 uVEGF、α1-mG及β2-MG水平診斷DN的價(jià)值:uVEGF水平診斷DN的ROC曲線下面積(AUC值)為0.936，截?cái)嘀禐?4.08 mg/24h，靈敏度為88.24%(60/68)、特異度為86.36%(19/22)；α1-mG水平診斷DN的AUC值為0.866，截?cái)嘀禐?3.16 mg/L，靈敏度為84.29%(59/70)、特異度為85.00%(17/20)；β2-MG水平診斷DN的AUC值為0.844，截?cái)嘀禐?.38 mg/L，靈敏度為87.69%(57/65)、特異度為84.00%(21/25)，見圖1(目錄后)、表3。

表3 uVEGF、α1-mG及β2-MG水平診斷DN的價(jià)值

3 討論

臨床觀察發(fā)現(xiàn)，通過糖皮質(zhì)激素及免疫抑制劑等治療措施，能夠顯著改善DN患者的臨床結(jié)局，降低DN進(jìn)展為終末期腎功能衰竭的風(fēng)險(xiǎn)。半胱氨酸或者胱抑素C等指標(biāo)能夠在DN腎損害評(píng)估過程中發(fā)揮一定的早期參考價(jià)值。本次研究通過對(duì)DN患者尿液中uVEGF、α1-mG及β2-MG的表達(dá)分析研究，在揭示DN腎損害進(jìn)展機(jī)理的同時(shí)，也為臨床上DN腎損害診斷提供了理論方面的參考。

uVEGF是血管內(nèi)皮生長因子調(diào)控成員，其能夠通過誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡，加劇腎臟血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，進(jìn)而參與腎小球的損傷及腎單位的損傷過程。基礎(chǔ)方面的研究認(rèn)為，uVEGF的表達(dá)上升還能夠增加血管內(nèi)皮細(xì)胞的氧化應(yīng)激性損傷，影響到血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷修復(fù)能力[6]。α1-mG及β2-MG是有核細(xì)胞分泌的細(xì)胞外糖蛋白成分，在體細(xì)胞正常生理代謝的過程中，α1-mG及β2-MG可顯著釋放，并能夠通過腎小球進(jìn)行濾過和重吸收。在腎小球早期濾過功能損傷的過程中，α1-mG及β2-MG的漏出明顯增多，同時(shí)腎小球?qū)τ讦?-mG及β2-MG的重吸收明顯增加。部分研究者探討了微球蛋白的表達(dá)與DN的關(guān)系，認(rèn)為在DN患者中微球蛋白的表達(dá)濃度明顯上升[7]，但缺乏對(duì)于uVEGF的分析研究。

本次研究發(fā)現(xiàn)，在尿蛋白組患者中，uVEGF、α1-mG及β2-MG的表達(dá)濃度均明顯上升，特別是在大量尿蛋白組患者中，uVEGF、α1-mG及β2-MG的表達(dá)濃度的上升更為顯著，提示了uVEGF、α1-mG及β2-MG的高表達(dá)均能夠影響到DN腎損害進(jìn)程。分析其內(nèi)在的原理，可能與uVEGF、α1-mG及β2-MG的下列幾個(gè)方面的病理性作用有關(guān)[ 8]：①uVEGF的表達(dá)濃度的上升，能夠加劇腎小球入球小動(dòng)脈的痙攣程度，加劇腎臟血管的代償性纖維化改變，影響腎單位的血流灌注水平，進(jìn)而參與到DN腎損害進(jìn)展過程；②α1-mG及β2-MG的表達(dá)上升，主要是由于DN患者局部腎小球近端小管生理功能的下降，導(dǎo)致α1-mG及β2-MG的滅活分解減少，未經(jīng)吸收的α1-mG及β2-MG通過尿液排出體外，增加了尿液中α1-mG及β2-MG水平。劉利祥等[9]研究者也發(fā)現(xiàn)，在DN患者中，尿液β2-MG的表達(dá)濃度可上升30%～45%，同時(shí)在肌酐值上升較為明顯和腎小球?yàn)V過率下降顯著的患者中，β2-MG的表達(dá)濃度的上升更為顯著。BUN、Scr是反應(yīng)患者腎功能的指標(biāo)，F(xiàn)PG、HbA1c是反映患者體內(nèi)血糖控制程度的指標(biāo)，可以發(fā)現(xiàn)在尿蛋白組特別是大量蛋白組患者中，相關(guān)血糖及腎功能指標(biāo)的波動(dòng)較為顯著，提示大量組患者的腎功能損傷較為嚴(yán)重，同時(shí)其血糖控制情況較差。診斷學(xué)價(jià)值分析可見，uVEGF、α1-mG以及β2-MG水平診斷DN腎損害的AUC值、靈敏度、特異度均較高，提示uVEGF、α1-mG及β2-MG在DN腎損害評(píng)估中均具有一定的價(jià)值，臨床上對(duì)于uVEGF、α1-mG及β2-MG超過臨界值的患者，應(yīng)早期進(jìn)行臨床干預(yù)，進(jìn)而改善DN患者的臨床結(jié)局。