一例抗-Fya抗體的鑒定和輸血策略*

黎裕元 蔡葵 魏亞明 吳敏華 朱琳睿 陽雪新

Duffy抗原是位于細胞膜表面的糖蛋白，其相對分子質量為35 000～50 000，是一種趨化因子受體[1]，基因位于1號染色體上，該血型系統主要包含Fya、Fyb、Fy3、Fy4、Fy5、Fy6，這6種抗原。在人群中產生的表現型主要有Fy（a+b+）、Fy（a+b-）、Fy（a-b+）、Fy（a-b-），在我國Fya屬于高頻抗原，因此Fya（a-b+）屬于稀有血型。抗-Fya大多數由于輸血而產生，天然產生的抗-Fya抗體非常罕見。抗-Fya大多能夠引起輕微的遲緩性的溶血性輸血反應，也有嚴重的急性溶血反應的報道[2]。筆者在佛山市第一人民醫院工作期間，在1名消化道出血的患者中檢出抗-Fya抗體，其鑒定過程和輸血策略分析如下。

資料與方法

1 一般資料 譚某，女，6 4歲，漢族，廣東人，患者于1 0余天前無明顯誘因出現上腹部不適，有腹瀉2天，1 0余次/天，為柏油樣便，1天前出現發熱，最高體溫3 8.8℃。既往有手術史，有輸血史。孕產史：孕4產3。血常規結果為：血紅蛋白（H b）5 0 g/L，考慮患者有進行性出血，申請輸去白細胞懸浮紅細胞2 U。

2 試劑與儀器 抗A、抗B血型定型試劑（長春博德，批號：20190907）、標準A細胞、B細胞、O細胞（奧森多，批號：A382Z），R h分型卡（江陰力博，批號：202008012）、ABO及RhD血型微柱凝膠卡（奧森多，批號：ABR181J）、抗人球蛋白微柱凝膠卡（伯樂，批號：50531.58.10）、抗人球蛋白微柱凝膠卡（奧森多，批號：AHC161J）、抗體篩查細胞（奧森多，批號：3SS864Z）、抗體篩查細胞（上海血液中心，批號：20200731）、抗體鑒定細胞（Reagens，批號：732017）、IgG抗-Fya單克隆試劑（IMMUCOR）、IgG抗-Fya單克隆試劑（IMMUCOR）、全自動血庫系統（江陰力博）、全自動血型分析儀（奧森多AutoVision）、孵育箱（達亞美）、微柱凝膠卡離心機（達亞美）、BLISS液（奧森多，批號：280591）、樣本稀釋液（伯樂，批號：057610001）。

3 方法 ABO血型及Rh血型、Rh分型、交叉配血、抗體篩查均通過全自動血型分析儀，用微柱凝膠法進行檢測。抗體鑒定和Duffy血型測定則通過手工加卡的方法，通過微柱凝膠法進行檢測。所有的實驗均按照文獻[3]及試劑的說明書進行操作，所有的實驗都有質量保證措施。

結 果

1 血型鑒定 患者的血型為A型RhD陽性（表1），Rh分型的結果為CCDee（表2）。

表1 ABO及RhD血型鑒定結果

表2 Rh分型鑒定結果

2 抗體篩查 患者與奧森多廠家的抗體篩查細胞I、III細胞

反應陽性，強度為1+，與II號細胞反應陰性（表3）。與 上海血液中心的抗篩細胞I、II、III抗篩細胞反應陽性，強度均為1+（表4）。尚未能確定抗體的性質，未能排除抗-Fya、Jka、Leb、S、s、M、N、Dia等抗體，需要進一步進行抗體鑒定。

表3 與奧森多廠家的抗體篩查細胞反應的實驗結果

表4 與上海血液中心的抗體篩查細胞反應的實驗結果

3 抗體鑒定 采用Reagens廠家生產的1-11號抗體鑒定細胞在抗人球蛋白微柱凝膠卡中進行凝集反應，結果患者與3、4、8、10、11號細胞反應陽性，強度1+，其余細胞陰性（表5）。3、4、8、11號細胞的Fya抗原為純合子，1號、9號為雜合子，考慮患者體內抗體強度較低，僅能與Fya抗原為純合子的抗篩細胞反應，與雜合子不反應。綜合分析，患者產生抗-Fya抗體。

表5 抗體鑒定結果

4 Duffy血型鑒定 IgG抗-Fya、抗-Fyb單克隆抗體試劑在抗人球蛋白微柱凝膠卡中進行Duffy血型鑒定試驗，并設置陰性對照、陽性對照（表6）。患者的Duffy血型Fy（a-b+）。

表6 患者的Duffy血型鑒定

5 交叉配血 患者隨機選擇與多個Rh分型相合的獻血員在抗人球蛋白微柱凝膠卡中進行交叉配血實驗，結果均不相合。主側陽性1+，次側陰性。

6 輸血策略的制定

6.1 獻血源的尋找：在患者家系中，尋找同型的家屬作為獻血員。由于在中國人群Fya抗原屬于高頻抗原，有文獻報道我國部分地區中，Fya抗原頻率高達99.85%[4]。因此在隨機獻血員中，找到缺少Fya抗原的個體極其困難。只能通過患者的家系中尋找與患者Duffy血型系統相容的血液。筆者在患者家屬找到8位家屬，與患者的關系、配血結果及Duffy血型定型如下（表7）。僅有一位家屬（家屬1）與患者配血相合，經鑒定該家屬Duffy血型也為Fy（a-b+），但該家屬年齡超過法定獻血的最高年齡，無法進行采血。

表7 患者與其家屬配血的結果

6.2 尋找不同種族的獻血者：Duffy血型在不同種族人群中分布差異很大。在黑種人，尤其是非洲西部地區，大多數人的表型為Fy（a-b-）（67%），而在白種人（34%）中，不含Fya抗原的個體也明顯多于中國人[2]，因此尋找來自不同種族的獻血者能夠提高與患者配血相合的概率。但是今年由于疫情原因，在佛山地區，未能找到來自其他種族的獻血者。

6.3 求助稀有血型庫：在國內有不少地區通過對大量獻血者進行Fya、Fyb抗原測定將檢出的Fya陰性供者的信息錄入稀有血型庫[5]，已解決抗-Fya抗體引起的配血不相合的問題。筆者與廣州血液中心聯系，廣州血液中心已建立Fya陰性稀有血型庫，庫存有Fya陰性的冰凍紅細胞，因此立即將患者轉至廣州的醫院繼續治療，轉院后，患者輸注交叉配血“無溶血，無凝集”的紅細胞2次，于轉院后第5天輸3.5 U，于轉院后第10天輸2 U，血紅蛋白濃度由50 g/L提升至88 g/L后，順利出院。患者血紅蛋白濃度變化如圖1。

圖1 患者血紅蛋白（g/L）變化

討 論

抗-Fya抗體可能是由于懷孕的刺激引起，但絕大多數由于輸血而產生[6]。該患者Duffy血型為Fy（a-b+），于30年前有過3次懷孕史，于10年前在外院進行手術治療，并進行輸血，但當時并未出現配血困難。因此，可以推斷患者的抗-Fya抗體可能通過輸血免疫產生，而并非通過懷孕的刺激。該案例與國內外產生抗-Fya抗體的病例相似[7-8]，提示抗-Fya抗體在體內能夠長時間存在，這個可能與該抗原的免疫傾向于產生長壽漿細胞有關[9]。在我國Fya抗原陰性的個體極其罕見，本案例中，筆者只能通過在患者家系中、不同種族中尋找，求助稀有血型庫[7]等方式為病人篩選相合的血液。

由于Fya在國內屬于高頻抗原，國產的抗體篩選細胞和抗體鑒定的譜細胞多為Fya抗原陽性[10]，例如本案例中的上海血液中心生產的抗體鑒定細胞，會對抗-Fya抗體的鑒定造成一定程度的困難，對懷疑產生抗-Fya抗體時，應該應用進口的譜細胞進行抗體鑒定。此外還建議，輸血相容性實驗室應配備多個廠家，甚至不同地區生產的抗體篩選細胞和抗體鑒定細胞。

紅細胞膜上缺乏Fya和Fyb抗原的個體對間日瘧原蟲有天然免疫力[6]，因此在自然選擇的壓力下，在非洲，尤其是西部，大多數人的表現型為Fy（a-b-）。因此，為產生抗-Fya抗體的患者尋找相合的紅細胞時，求助來自非洲的獻血者，可以提高配血成功的機率。

稀有血型庫能夠對稀有血型患者及時安全用血有重要的意義，因此呼吁國內同行展開合作，不僅是針對Fya抗原陰性的供者庫，還應盡快建立針對其他血型系統的稀有血型庫。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突