延安產野生烏拉爾甘草品質鑒定

★ 曾云飛 李（.延安市中醫藥研究所 陜西 延安 76000；2.貴州醫科大學藥用植物功效與利用國家重點實驗室 貴陽 55004；3.貴州省中國科學院天然產物化學重點實驗室/貴州省天然藥物工程研究中心 貴陽 55004）

甘草為豆科（Leguminosae）蝶形花亞科（Papilionatae Taub.）甘草屬（Glycyrrhiza）多年生草本植物，該屬在全世界分布有29種6變種，我國約有18種3變種［1］。2005年版《中華人民共和國藥典》收載的藥用甘草，即烏拉爾甘草（Glycyrrhiza uralensisFisch）、脹 果 甘 草（Glycyrrhiza inflateBatal）和光果甘草（Glycyrrhiza glabraL.），藥用器官為其根，別名：國老、甜草、烏拉爾甘草、甜根子等。甘草是一種補益中草藥，味辛、甘，性溫，歸脾、胃經，氣微，味甜而特殊，具有補中益氣、清熱解毒、祛痰止咳、緩急止痛、緩和藥性等功效，功能主治清熱解毒、祛痰止咳等。甘草分布在中國西北、東北、華北地區，是干旱半干旱荒漠地區優良生態先鋒植物［2］。最新醫學研究表明，甘草中的甘草酸具有抑制HIV［3］、SAS冠狀病毒的作用［4］，甘草素和異甘草素有抗潰瘍和解痙作用，能抑制單胺氧化酶，可治療精神病［5-6］。除藥用外，甘草還廣泛用于畜牧業、食品、保健品、飲料、煙草、化妝品等工業領域中［7］。

我國對甘草的采集與藥用已有四千多年的歷史，《神農本草經》中將其列入上品，爾后歷代本草皆有記載，素有“十方九草”“眾藥之王”的美譽。甘草為常用大宗藥材，其藥性平和，通行十二經脈［8］，目前市場上流通的商品甘草以烏拉爾甘草為主流品種［9］。西北地區為甘草的主產區，內蒙古中、西部及寧夏地區所產烏拉爾甘草品質最好，被稱為“西草”。延安位于黃河中游，地處黃土高原，居陜西北部，面積為3.7萬平方公里，海拔約800～1 200米，多數地區覆蓋有深厚風成黃土。延安屬暖溫帶，年平均氣溫為7 ℃～10℃，全區無霜期在150～170 d左右，年平均降水量100 mm，每平方厘米的太陽年輻射為90～140千卡，日照時數為1 400～2 900 h。陜北黃土高原區地域寬廣，自然條件復雜，為各種植物的生存和多種植被類型的分布提供了優越的條件，植物和植被資源較為豐富，藥用植物資源尤為突出［10］。延安的野生甘草質地優、粉質大，被譽為“陜北的國老蓋三北”，但沒有相關文獻報道延安產烏拉爾甘草的品質。鑒于此，本實驗以不同產地的烏拉爾甘草作為研究對象，采用高效液相色譜檢測方法，對5個產地不同的甘草樣品進行分析，并以此為依據判定不同產地甘草樣品的優劣。本實驗的結果將客觀的判定陜北野生烏拉爾甘草的品質，為開發陜北藥材提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 樣品的采集 本實驗所用甘草樣品于2016年8月份采自陜西延安城北楊家嶺山上，直徑為2～3 mm，經延安市藥材公司技術人員鑒定為烏拉爾甘草，其他不同產地的烏拉爾甘草樣品均購自淘寶網。

1.2 試劑及儀器 Waters 2489高效液相色譜儀，Sartorius 1/10萬電子天平，FA2204B上海精科萬分之一電子天平。

甘草苷、甘草酸銨（成都標準品有限公司，純度＞98%，＞98%，批號分別為140723、141109）；色譜純甲醇，色譜純乙腈，超純水，其他試劑均為分析純。

1.3 測定方法 以甘草酸銨、甘草苷為評價指標，色譜條件和測定方法參照《中國藥典》（2015）甘草品質測定方法。

以甘草酸銨、甘草苷為評價指標，色譜條件和測定方法參照《中國藥典》（2020）甘草品質測定方法。

色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A，以0.05 %磷酸溶液為流動相B，按下表中的規定進行梯度洗脫；檢測波長為237 nm。理論板數按甘草苷峰計算應不低于5 000。

對照品溶液的制備 取甘草苷對照品、甘草酸銨對照品適量，精密稱定，加70 %乙醇分別制成每1 mL含甘草苷20 μg、甘草酸銨0.2 mg的溶液，即得（甘草酸重量=甘草酸銨重量/1.0207）。

供試品溶液的制備 取本品粉末（過三號篩）約0.2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70 %乙醇100 mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250 W，頻率40 kHz）30 min，放冷，再稱定重量，用70 %乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測定，即得。

本品按干燥品計算，含甘草苷（C21H22O9）不得少于0.50 %，甘草酸（C42H62O16）不得少于2.0 %。

2 結果

不同產地烏拉爾甘草根部及陜北烏拉爾甘草莖品質鑒定色譜圖見圖1（由本實驗室測定），結果見表1。依據《中國藥典》規定，甘草酸銨干燥品計算，甘草酸（C42H62O16）不得少于2.0 %，含甘草苷（C21H22O9）不得少于0.50 %。由表可知，甘肅產的甘草品質最差，其甘草酸和甘草苷的含量分別為1.947 0 %和0.383 9 %，均未達到甘草飲片的最低要求。寧夏和新疆產烏拉爾甘草中甘草酸和甘草苷的含量均高于《中國藥典》的規定，內蒙產烏拉爾甘草酸和甘草苷的含量分別為3.514 3 %和1.179 4 %，高于規定的最低值。所有的被測樣品中，延安產烏拉爾甘草根中甘草酸和甘草苷的含量最高，分別為6.627 7 %和2.493 9 %，高于藥典規定的最低值的3倍和6倍，遠遠高于其他產地的品質。另外，陜北產甘草莖中甘草酸和甘草苷的含量均很低，分別為0.246 5 %和0.026 9 %，不能達到甘草的最低要求。

表1 不同產地甘草品質鑒定結果

圖1 不同產地烏拉爾甘草HPLC圖

按貢濟宇等的甘草飲片等級評定（一等品：甘草苷質量分數＞1.10 %，甘草酸質量分數＞2.12 %，二等品：甘草苷質量分數＞0.74 %～1.10 %，甘草酸質量分數＞1.95 %～2.12 %，三等品：甘草苷＞0.65 %～0.74 %，甘草酸質量分數＞1.88 %～1.95 %，等外品：甘草苷質量分數＜0.65 %，甘草酸質量分數＜1.88 %）［10］，延安產和內蒙產甘草為一等品，寧夏和新疆產甘草的甘草酸含量均高于一等品的要求，但甘草苷的含量不能達到一等品的要求，甘肅產甘草甘草酸的含量達到了三等品，但甘草苷的含量為等外品。

3 討論

藥用植物是指醫學上用于防病、治病的植物，其植株的全部或部分供藥用或作為制藥工業的原料。野生藥用植物是指自然界生長、未經人工馴化栽培、具有藥用價值的一類植物，是極其寶貴的天然藥物種質資源庫。甘草是《中國藥典》規定的主要品種，我國甘草資源豐富、儲量高、品質優良，甘草酸及多種黃酮類化合物含量高，有極廣的臨床應用價值。然而，藥材產地不同、種類不同，品質也參差不齊。本實驗測定了西北不同產地的烏拉爾甘草的品質，測定結果顯示除甘肅產烏拉爾甘草不能達到國家規定的最低標準外，其余產地的烏拉爾甘草均超過了最低標準，而延安產烏拉爾甘草品質最佳，甘草酸和甘草苷的含量超過國家最低標準數倍。李成義等［11］報道了甘肅省金塔野生烏拉爾甘草（多年）中甘草酸和甘草苷的含量分別為6.85 %、4.39 %，栽培烏拉爾甘草（5年）甘草酸和甘草苷的含量分別為5.21 %和5.92 %。而本次測試中甘肅產烏拉爾甘草中甘草酸和甘草苷的含量卻僅為1.984 7 %和0.383 9 %，均沒有達到最低標準，可能是藥材并非出自甘肅，且生長年限不夠所致。張澤生等［12］報道了新疆產十年以上甘草根主干部分甘草酸的含量為2.4 %，而本文所測新疆產甘草甘草酸的含量為3.283 7 %，高于文獻報道。李成義等［13］報道了甘肅金塔、內蒙伊盟、寧夏靈武野生烏拉爾甘草中甘草酸的含量分別為6.85 %、4.80 %、1.80 %，甘草苷的含量分別為4.39 %、2.40 %、0.7 %，本次測試中內蒙產甘草的數值略低于文獻報道，而寧夏產甘草的數值略高于文獻報道。雖然本次實驗所用藥材除延安產烏拉爾甘草為本實驗室實地采摘，其余均購自網上，但除了甘肅產烏拉爾甘草外，其余產地的測試結果與文獻報道相差不大，故本次測試的結果應該是不同產地烏拉爾甘草的真實狀況。另外，甘草是以根入藥，本實驗測試了延安產烏拉爾甘草莖中甘草酸和甘草苷的含量，結果顯示遠遠低于國家的最低標準，故甘草莖不能作為甘草根的替代品。

近年來，隨著對甘草開發利用的不斷深入，甘草的市場需求量劇增，野生甘草資源遭受了嚴重的破壞。據統計資料表明，建國初期全國甘草儲量約為200～250萬噸，現有甘草儲量已下降到50～70萬噸［14］。由于近幾十年的濫采亂挖和大面積墾荒，甘草資源不僅蘊藏量逐年下降，經濟產量銳減，生態環境也遭到了極大的破壞，現存的野生甘草資源已無法滿足日益增長的市場需求。延安土地廣袤、日照充足、黃土層深厚、晝夜溫差大，其野生藥材產量大、品質好，有著極大的開發潛力，且延安十年退耕還林，生態環境明顯改善，植被也得到了很好的恢復。中藥材經濟的開發有利于改善延安的原有經濟模式，多方位、多角度、全面的調整延安的經濟產業結構，為延安的經濟快速、穩步、可持續的發展提供契機。另外，延安地區大多數處于黃土高原的山區，地區經濟發展很不平衡，尤其是邊遠偏僻山區的經濟一直處于落后狀態，中藥材經濟的發展能夠兼顧全區不同地貌，使得邊遠偏僻山區的經濟走向良性發展的道路。內蒙產甘草一直為甘草的道地藥材，而本次測試結果及文獻報道均顯示延安產甘草品質優于內蒙產甘草。本實驗的結果為進一步開創延安品牌的野生藥材提供可能，為延安經濟發展開辟新的領域，調整延安產業結構，促進經濟轉型，改變延安單一經濟結構模型，具有重要意義。