MCV和MCH聯合血紅蛋白電泳篩查常見地中海貧血的研究

朱瑾，劉潔，黃建成

（1.福建醫科大學附屬閩東醫院產前診斷實驗室，福建 福安 355000；2.福建醫科大學附屬閩東醫院檢驗科，福建 福安 355000）

近年來，地中海貧血逐漸受到臨床關注，根據基因分類，可將患者分為α-地中海貧血和β-地中海貧血。兩種貧血患者的貧血基因所在位置不同，α-地中海貧血患者的基因主要在16號染色體上，而β-地中海貧血患者的基因則在11號染色體上。臨床數據顯示[1]，超過90%的β-地中海貧血患者是由于點突變所導致的，α-地中海貧血主要的發生原因與等位基因的缺失密切相關。地中海貧血的出現，不僅會對患者造成較大的傷害，且易發生遺傳，需針對孕期女性加強篩查診斷。從本質上分析，地中海貧血是一種遺傳性慢性溶血性貧血病，重型地中海貧血是致死性疾病，目前在臨床上還無有效的根治方案。通過產前診斷避免重型地中海貧血患兒的出生是優生方面的一個重要手段，而產前診斷的前提是發現和確診夫婦雙方為同型地中海貧血基因攜帶者。為有效降低地中海貧血的發生率，可在產前檢查等方面加強篩查工作，研究發現[2]，可通過孕期檢查查出地中海貧血，地中海貧血是一種隱性基因遺傳病，大多數人群并未表現出地中海貧血的癥狀，更易使基因攜帶者忽視遺傳篩查、孕期檢查等工作。一旦檢查不到位，很可能遺傳給胎兒，影響胎兒的健康成長，因此，加強孕婦地中海貧血篩查工作非常重要。本研究通過MCV、MCH聯合血紅蛋白電泳篩查常見地中海貧血，分析多種檢測方法對于常見地中海貧血篩查的應用效果，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 回顧性分析2017年1月至2018年12月于本院產前診斷機構進行地中海貧血篩查和診斷的4 136例為篩查對象，年齡18～45歲，平均年齡（30.6±2.1）歲。

1.2 方法 首先采集血液標本，采血過程中，選擇觀察對象體表淺靜脈作為采血部位，以肘部靜脈、手背靜脈、內踝靜脈作為首選。通常選擇肘部靜脈采血，但如果受檢者的肘部靜脈不明顯，可選擇其他部位靜脈，采血過程中，注意避開患者有紅腫、潰瘍的部位。然后對患者進行常規采血，注意不可長時間使用止血帶壓迫（＜30 s），長時間壓迫會影響實驗結果。采血時盡量選擇使用封閉式、真空的采血設備，避免血液樣本污染。對于血常規指標MCV＜82 fl，MCH＜27 pg的標本，采取血紅蛋白電泳檢查方式，使用的儀器為CAPILLARYS 2電泳儀，對所有孕婦的血液樣本進行電泳檢查，檢查過程中可根據HbA2數據判斷患者的地中海貧血類型，若HbA2水平＜2.5%，屬于α-地中海貧血，若HbA2水平≥3.5%即屬于β-地中海貧血，可對患者所攜帶的地中海貧血基因進行初步判斷。進行地中海貧血基因檢測，進一步確定地中海貧血基因的情況，首先在α-地中海貧血患者中，有3種基因缺失的情況，一種是基因缺失SEA雜合子，二是基因缺失-α3.7，還有一種屬于基因缺失-α4.2，均是α-地中海貧血的常見基因變化情況；另外還有非缺失型α-地中海貧血患者，主要是αCS，αQS以及αWS三種基因型，缺失型地中海貧血患者占α-地中海貧血總數的90%，非缺失型占10%左右；而針對β-地中海貧血患者中，由于主要的基因變化屬于突變基因型，需要對CD41-42、CD31、CD27-28等17種點突變基因進行排查，確定具體的地中海貧血類型。地中海貧血篩查步驟一般先行血常規檢測再做血紅蛋白電泳，陽性者做基因診斷確診，最后進行產前診斷。

1.3 篩查結果判斷標準 患者MCV＞82 fl，MCH＞27 pg，2.5＜HbA2＜3.5，HbF正常，如出現其他HbG等出現異常血紅蛋白區帶，擬為異常HbH病；MCV＜82 fl，MCH＜27 pg，HbA2＜2.5%初步判斷為ɑ-地中海貧血。MCH＜27 pg，HbA2≥3.5%，和/或HbF增高，屬于β-地中海貧血。

1.4 統計學方法 采用SPSS 20.0統計學軟件進行數據分析，計數資料以[n（%）]表示，行χ2檢驗，計量資料以“x±s”表示，行t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 134例地中海貧血基因結果 基因檢測陽性134例，其中β-地中海貧血56例，α-合并β-地中海貧血2例，α地中海貧血76例，基因檢測結果，見表1。

表1 134例地中海貧血基因檢查結果

2.2 地中海貧血患者MCV、MCH及血紅蛋白水平與正常值比較 電泳4 135例，異常1 655例，基因檢測陽性134例，篩查的敏感度較高，且常見地中海貧血患者的MCV、MCH及血紅蛋白水平與正常值比較差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 地中海貧血患者MCV、MCH及血紅蛋白水平與正常值比較（±s）

表2 地中海貧血患者MCV、MCH及血紅蛋白水平與正常值比較（±s）

注：MCV，平均紅細胞體積；MCH，平均紅細胞血紅蛋白；HbA2，血紅蛋白水平

組別地中海貧血陽性患者正常值t值P值MCV 74.3±2.8 85.8±3.1 6.229 5＜0.05 MCH 30.8±2.1 24.5±1.9 7.674 8＜0.05 HbA2 2.88±0.46 3.91±0.72 6.304 6＜0.05

3 討論

地中海貧血最早發現于地中海地區，而地中海貧血又分為α-地中海貧血和β-地中海貧血。α-地中海貧血靜止型的患者無明顯的臨床癥狀，甚至無貧血的現象，患者的紅細胞形態也較為正常，而發展為標準型的患者，會有輕度貧血的情況，這類患者的紅細胞滲透性也稍有降低；若患者表現為輕度或中度貧血的情況，會影響到其他臟器健康，并引起肝脾腫大、黃疸等現象，若妊娠期女性出現上述情況，會產生更大危害，導致胎兒水腫、死胎等，十分危險[3-4]。β-地中海貧血靜止型患者癥狀不明顯，也不會表現出明顯的貧血現象，但可從患者的血片中觀察到少量的靶形紅細胞；輕度性貧血的患者HbA2增高，發展至中度時，患者的脾臟會表現出輕度腫大的情況，且網織紅細胞可達到5%左右，患者的紅細胞滲透脆性也明顯降低[5]。輕癥的地中海貧血，也就是雜合子/地中海貧血基因攜帶者，如–α/αα、--/αα等，一般情況下無生命危險，但這類群體的紅細胞的攜氧能力更差[6]。按照貧血嚴重程度，地中海貧血一般分為輕型、中間型和重型。輕型一般為地中海貧血攜帶者，兩個等位基因中一個有問題，一般無明顯臨床特征或只有輕微貧血；中間型地中海貧血的機制比較復雜，如地中海貧血的基因均發生突變，但某個突變發生在啟動子區域，因此，基因還保留部分活性。地中海貧血的發生，會對患者身體造成較大危害，做好相關診斷工作非常重要。

加強地中海貧血的產前篩查非常重要，超聲檢測胎兒大腦中動脈血流頻譜也可及早發現“巴氏水腫胎”[7]。地中海貧血是一種隱性基因遺傳病。多數人只是攜帶地中海貧血基因而不表現出任何貧血癥狀，地中海貧血只會遺傳，不會傳染[5]。假如父母中有一個人攜帶地中海貧血基因，子女就可能會遺傳到地中海貧血基因。中間型地中海貧血是從臨床癥狀的嚴重程度進行劃分，按照貧血嚴重程度，地中海貧血一般分為輕型、中間型和重型。輕型一般為地中海貧血攜帶者，兩個等位基因一個有問題，一般無臨床特征或只有輕微貧血。中間型地中海貧血的機制較復雜。

本研究結果表明，地中海貧血患者的血常規（紅細胞、白細胞、血小板、血紅蛋白等）檢測結果與正常值比較差異有統計學意義（P＜0.05），可作為臨床診斷地中海貧血的重要指標。對孕期女性進行地中海貧血的篩查工作是實現優生優育的重要步驟，目前國家對于孕檢地中海貧血的篩查也非常重視，并對一些較為貧困的地區實施免費孕期地中海貧血篩查措施，孕婦在接受地中海篩查貧血時也需積極配合孕檢要求，仔細檢查孕期Hb、HbA2等的水平，一般女性在懷孕12周后即可進行地中海貧血篩查，通過抽取靜脈血液檢查基因狀況，一旦確診也不可過于緊張焦慮，及時進行治療和病情控制，需注意，此病與缺鐵性貧血有很大差異，不可隨意補充鐵元素，可適當調理膳食結構，多飲水與配合運動鍛煉，保持良好的心情狀態，可有效改善病情帶來的影響。

綜上所述，對地中海貧血患者使用MCV、MCH結合血紅蛋白電泳進行篩查檢驗，可及時了解患者的血液情況，有助于提高地中海貧血的診斷準確率。利用MCV、MCH及血紅蛋白電泳聯合篩查可排除大部分的假陽性，減輕患者負擔，篩查和診斷意義較大，是比較經濟、簡便、安全的一種檢測手段。地中海貧血的產前篩查診斷工作，對于避免地中海貧血患兒的出生及產科急危重并發癥的發生，優生優育有較高的價值。