尿液細菌培養與尿沉渣細菌定量計數在泌尿系統感染篩查中的對比分析

侯素君，閆秀中，王曉梅，周緒云，焦 玲

山東省日照市中醫醫院，山東日照 276800

泌尿系統感染(UTI)是一種常見且多發的感染性疾病[1-2]，是由病原菌侵犯泌尿系統、引發炎性反應所致，其主要臨床表現為尿頻、尿急、尿痛、尿液渾濁、蛋白尿等。臨床診斷泌尿系統感染的主要方法為實驗室檢查，尿液細菌培養為金標準[3-5]，在泌尿系統感染的診斷中應用價值高，但常規的中段尿細菌培養需2～3 d才能作出報告，會耽誤早期診斷以及治療的最佳時機，甚至可能會出現慢性感染或敗血癥，臨床醫生往往在尿培養正式報告之前先經驗治療。故此，選擇一種快捷且準確的篩查方式意義重大。本研究將尿液細菌培養和尿沉渣細菌定量計數聯合尿沉渣白細胞檢驗進行對比分析，旨在促進泌尿系統感染診斷準確率的提高，緩解抗菌藥物濫用情況，滿足臨床快速診斷的需求。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年3月至2020年2月本院收入的疑似泌尿系統感染患者200例為研究對象，其中男性120例，女性80例，年齡42～75歲，平均(58.5±0.5)歲。

1.2儀器與試劑 Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀及配套試劑，質控品購自伯樂生物技術有限公司；VITEK-2 Compact全自動微生物分析儀及相應鑒定板，質控菌株大腸埃希菌ATCC 25922、銅綠假單胞菌ATCC2 7853、金黃色葡萄球菌ATCC 25923、肺炎克雷伯菌ATCC 700603、大腸埃希菌ATCC 700323、糞腸球菌ATCC 51299、糞腸球菌ATCC 29212、大腸埃希菌ATCC 35218、腐生葡萄球菌ATCC 750、金黃色葡萄球菌ATCC 29213和白色假絲酵母菌ATCC 90028，均由山東省臨床檢驗中心提供。

1.3方法

1.3.1標本采集 按照文獻[6]參考標準指導患者留取清潔中段尿液20～30 mL,分別裝在兩個無菌有蓋容器中，立即送往實驗室，2 h內完成尿液細菌培養接種和尿沉渣細菌定量計數。

1.3.2尿液細菌培養法 使用10 μL無菌定量接種環接種血瓊脂平板、麥康凱平板，35 ℃培養18～24 h，有細菌生長則對菌落數量進行計算，采用法國生物梅里埃公司VITEK-2 Compact全自動微生物分析儀進行菌株鑒定，無細菌生長繼續培養24 h。判斷標準參考文獻[6]：革蘭陰性菌，細菌數≥105CFU/mL，說明標本為感染菌尿；細菌數在104～105CFU/mL，表明標本為疑似感染菌尿，可結合臨床癥狀判斷或復查；細菌數低于104CFU/mL，提示臨床意義不大。革蘭陽性菌：感染菌尿、無感染菌尿的標準分別為細菌數≥104CFU/mL、<104CFU/mL；真菌：感染菌尿、無感染菌尿的標準分別為細菌數≥104CFU/mL(兩次培養以上)、<104CFU/mL。

1.3.3尿沉渣細菌定量計數法 使用UF-1000i全自動尿沉渣分析儀(日本sysmex公司生產)對標本中的細菌數進行檢測，儀器每天用專用質控品(2種濃度級別)進行質控監測。細菌數>100/μL且白細胞>10/μL確定為感染菌尿[7-8]；細菌數>8/HP、>10/HP分別與尿液細菌培養中>102CFU/mL、>105CFU/mL相當。若患者有泌尿系感染癥狀出現，而細菌檢驗未得出檢測，提示可能存在衣原體感染。

1.4觀察指標 觀察兩種檢測方法的陽性率。觀察尿液細菌培養陽性標本中的病原菌分布情況。以尿液細菌培養結果為金標準，對尿沉渣細菌定量計數法于泌尿系統感染中的診斷效能進行評價。同時對尿沉渣細菌通道檢測革蘭陽性球菌和革蘭陰性桿菌的結果進行比較。

1.5統計學處理 將兩組各項觀察指標數據錄入統計學軟件SPSS21.0中進行處理，計數資料以例數或百分率形式表示，總符合率=100%×[(真陽性+真陰性)/總標本數]；靈敏度=100%×[真陽性/(真陽性+假陰性)]；特異度=100%×[真陰性/(真陰性+假陽性)]，行χ2檢驗，P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結 果

2.1兩種方法檢測結果比較 200例患者的尿液標本中，尿沉渣細菌定量計數測定陽性129例，陽性率64.50%(129/200)；尿液細菌培養陽性126例，陽性率63.00%(126/200)；兩種方法檢測陽性率比較，差異無統計學意義(χ2=0.097,P>0.05)。

2.2尿液細菌培養陽性標本中的病原菌分布情況 126例陽性患者標本中共檢出病原菌126株，革蘭陰性菌、革蘭陽性菌、真菌的構成比分別為70.63%(89/126)、23.81%(30/126)、5.56%(7/126)；革蘭陰性菌以大腸埃希菌51.59%(65/126)為主，革蘭陽性菌以屎腸球菌8.73%(11/126)為主。見表1。

表1 尿液細菌培養陽性標本中的病原菌分布情況

2.3尿沉渣細菌定量計數在泌尿系感染診斷中的效果評價 以尿液細菌培養結果為金標準，將尿沉渣細菌定量計數檢測結果中的129份陽性標本和71份陰性標本進行尿液細菌培養，對比評估兩種方法的符合率。尿沉渣細菌定量計數和尿液細菌培養的陽性標本符合率為96.90%(125/129)，假陰性率0.31%(4/129)，陰性標本符合率為97.18%(69/71)，假陽性率0.28%(2/71)；兩種方法符合率比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 尿沉渣細菌定量計數與尿液細菌培養檢測結果比較(n)

2.4尿沉渣細菌通道檢測革蘭陽性球菌 以尿液細菌培養結果為金標準，尿沉渣細菌通道檢測革蘭陽性球菌的符合率為88.00%，靈敏度為60.00%(18/30)，特異度為92.94%(158/170)。尿沉渣細菌通道與尿液細菌培養檢測革蘭陽性球菌結果見表3。

表3 兩種檢測方法檢測革蘭陽性球菌的結果(n)

2.5尿沉渣細菌通道檢測革蘭陰性桿菌 以尿液細菌培養結果為金標準，尿沉渣細菌通道檢測革蘭陰性桿菌的符合率為88.50%，靈敏度為77.53%(69/89)，特異度為97.30%(108/111)。尿沉渣細菌通道與尿液細菌培養檢測革蘭陰性桿菌結果見表4。

表4 兩種檢測方法檢測革蘭陰性桿菌的結果(n)

2.6尿沉渣細菌通道檢測革蘭陽性球菌與革蘭陰性桿菌結果比較 以尿液細菌培養結果為金標準，尿沉渣細菌通道檢測革蘭陽性球菌與革蘭陰性桿菌的符合率、靈敏度和特異度，革蘭陰性桿菌檢測結果均優于革蘭陽性球菌。見表5。

表5 尿沉渣細菌通道檢測革蘭陽性球菌與革蘭陰性桿菌結果比較(%)

3 討 論

95%以上的泌尿系統感染是由單一細菌引起的，主要病原菌為大腸埃希菌，其次是腸球菌[9-10]。泌尿系統感染的早期癥狀不明顯，若未得到及時的診斷和治療，病情會向菌血癥或敗血癥進展[4,11]，因此早期診斷泌尿系統感染十分重要。尿液細菌培養與尿沉渣細菌定量計數檢測的意義在于檢測人體泌尿系統是否有病原菌存在，對于存在細菌感染的患者，均進行抗菌藥物敏感試驗，從而為臨床醫生選擇合理的抗菌藥物提供參考[12]。

尿液作為機體的排泄物之一，可對腎臟器官的病理變化情況進行反映[13]。正常尿液無菌，而人體泌尿生殖道外存在細菌，且女性陰道內一般情況下無致病菌存在，但存在條件致病菌。pH值的改變會導致正常菌群狀況失衡，因此進行尿培養時應注意排除外界細菌干擾。尿液細菌培養是泌尿系統感染的診斷金標準，其過程步驟較多，檢查耗時長，陽性率低，不利于患者盡早接受治療，因此，需要采用更加便捷、準確的檢測方法。尿沉渣細菌定量計數是一種全自動尿沉渣分析儀進行細菌檢測的方法，具有設備簡單、操作簡便的特點，在基層醫療單位以及大規模篩查中具有顯著作用[14-16]。

尿沉渣是尿液中的有形成分，是原尿經過離心后形成的沉渣，也是尿液有形成分質和量的組合。尿沉渣細菌定量計數能夠對泌尿系統疾病進行診斷、鑒別、定位，其能夠監測藥物治療效果；另外尿沉渣細菌定量計數檢測包括多種技術，半導體激光、特異性核酸熒光染色和流式細胞技術，細菌檢測使用專用通道和特異性染液，最大限度地消除干擾物質對細菌檢測的影響，其能夠利用激光將細胞及有形成分激發，促使散射光、熒光等光信號產生[17-18]，再將其向電信號轉化，有助于對各種有形成分進行定量分析，因此具有較高的檢測準確率，且及時高效，大量的尿液標本篩查采用尿沉渣細菌計數比較合適。尿沉渣細菌定量計數采用UF-1000i全自動尿沉渣分析儀檢測尿液標本，該分析儀配有專用的細菌檢測通道，由紅色半導體激光發射紅褐色激光、照射經過核酸染色后在鞘流貫流分析池中形成鞘流標本，對尿中各個粒子進行多角度散射光和不同級別的熒光檢測，能夠將尿液中其他微小成分的影響減輕[19]，從而獲得高精密、高可信度的分析數據，細菌檢驗的特異度可得到提高。

本研究中，對尿沉渣細菌定量計數檢測結果與臨床診斷金標準尿液細菌培養檢測結果進行比較，200例中段尿標本細菌培養檢測結果顯示，陽性率為63.00%，尿沉渣細菌定量計數顯示，陽性率為64.50%，兩種檢測方法的陽性率相近，說明了尿沉渣細菌定量計數的準確性較高。200例中段尿檢測標本中，尿沉渣細菌定量計數與尿液細菌培養的陽性標本符合率為96.90%，陰性標本符合率為97.18%；假陰性率0.31%，假陽性率0.28%；陽性及陰性標本的符合率均高達95%以上，說明了兩種檢測方法應用在泌尿系統感染診斷中均具有較高的價值。分析本研究中出現假陰性結果的原因可能與檢測前使用抗菌藥物和抗菌藥物濫用有關，以及與尿液殘存低濃度的抗菌藥物抑制細菌生長、檢測前大量飲水、留取尿液前使用消毒液清洗尿道等因素有關；而假陽性結果的出現則與留取尿液時被污染相關。使用UF-1000i細菌計數則受抗菌藥物和培養方法干擾較小，可以彌補金標準尿液培養結果陽性率較低的不足。

同時UF-1000i尿沉渣分析儀可以提供直觀的細菌檢測散點圖和泌尿系感染診斷信息，通過圖形分析可以初步判斷檢出細菌為陽性球菌、陰性桿菌或混合細菌感染[9]。本研究結果顯示UF-1000i的細菌通道與金標準尿液細菌培養相比，革蘭陽性球菌和革蘭陰性桿菌的符合率、特異度均較高，說明UF-1000i尿沉渣分析儀在鑒別診斷泌尿系感染患者是革蘭陽性球菌感染還是革蘭陰性桿菌感染方面準確率較高，臨床醫生可以根據UF-1000i報告的革蘭陽性球菌或革蘭陰性桿菌，再結合泌尿系感染常見病原菌的臨床分布情況和耐藥情況，指導尿液細菌培養結果不明情況下的臨床經驗治療用藥，輔助臨床醫師選擇合理有效的抗菌藥物，減輕患者病痛和降低診療費用。UF-1000i尿沉渣細菌通道檢測革蘭陽性球菌與革蘭陰性桿菌結果相比較，符合率、靈敏度、特異度，差異均有統計學意義(P<0.05)，說明UF-1000i對于革蘭陰性桿菌的檢測能力優于革蘭陽性球菌，泌尿系感染的主要病原菌為革蘭陰性桿菌[9-10]，這種優勢檢測能力對臨床醫師經驗治療起到了良好指導作用。

總而言之，尿沉渣細菌定量計數同尿液細菌培養相比，陽性率相近，陽性率較高；陽性標本及陰性標本符合率均較高；設備簡單、操作方便，篩查速度快，可以作為臨床診斷泌尿系感染的參考依據，更適合應用在基層篩查泌尿系統感染中。同時尿沉渣細菌通道在泌尿系感染患者的早期針對性選擇抗菌藥物方面有較好的參考價值，特別是革蘭陰性桿菌引起的泌尿系感染，有更高的參考價值。