抗核抗體與抗β2糖蛋白-1抗體水平的相關性研究*

胡瓊文，田 華，劉春艷，李智杰，宋姍姍，雷胡芯，廖 璞

中國科學院大學重慶醫院/重慶市人民醫院檢驗科，重慶 400014

抗核抗體(ANA)是一組以自身真核細胞為靶抗原的自身抗體，是診斷自身免疫性疾病的基礎[1-2]。抗磷脂綜合征(APS)是一組由抗磷脂抗體介導的，以動靜脈血栓形成、反復妊娠失敗及血小板減少為特征的自身免疫性疾病[3]。抗β2糖蛋白-1(β2GP-1)抗體作為APS分類標準中的實驗室指標，參與了國際APS評分系統血栓風險評估及病理妊娠風險評估[4-6]。本研究通過對ANA核型、滴度與抗β2GP-1抗體水平進行相關性分析，探討了ANA陽性患者是否存在更高的血栓或病理妊娠風險。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2019年5月至2020年8月本院檢驗科常規檢測ANA譜的125例新鮮血清標本，其中ANA陽性患者(ANA陽性組)標本80例，ANA陰性患者(ANA陰性組)標本45例。

1.2儀器與試劑 儀器：德國Leica熒光顯微鏡、iFlash3000A全自動化學發光分析儀、-80 ℃低溫冰箱、CycleBlot48全自動免疫印跡儀、Mk3酶標儀、100～1 000 μL加樣槍，5～50 μL加樣槍。試劑：ANA IgG檢測試劑盒(間接免疫熒光法,歐蒙醫學)、ANA譜(IgG)檢測試劑盒(德國胡曼)、抗β2GP-1抗體檢測試劑盒(亞輝龍)。

1.3方法 ANA譜檢測采用化學發光免疫分析法進行抗β2GP-1抗體水平檢測，按照試劑說明書，抗β2GP-1抗體水平大于20 AU/mL判為陽性。采用抗β2GP-1抗體陽性非定值質控品進行室內質量控制。繪制Levey-Jennings質控圖，質控規則采用12S預警，13S、22S、R4S失控的規則，觀察和控制檢測過程的精密度。

2 結 果

2.1兩組基線資料比較 兩組年齡比較差異無統計學意義(P>0.05)。ANA陽性組女性占比與ANA陰性組比較，差異有統計學意義(P<0.05)。兩組抗PM-Scl抗體陽性例數比較，差異無統計學意義(P>0.05)，其余抗體陽性例數比較差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組基線資料比較

2.2ANA核型與滴度特征分布情況 ANA陽性組中ANA核型以核顆粒型(30例)、核均質型(18例)為主，ANA滴度以1∶1 000(32例)、1∶320(27例)為主；抗β2GP-1抗體陽性血清中ANA核型以核顆粒型(6例)、胞漿顆粒型(4例)為主，ANA滴度以1∶100(5例)、1∶1 000(4例)為主。

2.3相關性分析 ANA陽性組ANA核型、滴度與抗β2GP-1抗體定量相關性分析結果表明，ANA核型、滴度與抗β2GP-1抗體定量之間不存在線性相關性。見圖1。

注：A為ANA滴度與抗β2GP-1抗體定量相關分析；B為ANA核型與抗β2GP-1抗體定量相關分析。

3 討 論

APS是以動脈和(或)靜脈血栓形成、復發性宮內胎兒丟失、血小板減少癥、溶血性貧血和神經系統疾病與循環抗磷脂抗體存在為主要特征的系統性自身免疫性疾病[3]。β2GP-1作為一種天然抗凝劑可抑制血液凝固的內在途徑及凝血酶原活性，已被鑒定為主要抗原目標，這導致了抗β2GP-1抗體干擾天然抗凝劑β2GP-1的穩態特性從而使機體處于易栓狀態[7]。

化學發光技術已被應用于自身抗體檢測[8-9]，有研究表明新的化學發光免疫分析法對抗心磷脂抗體和抗β2GP-1抗體的測定具有較高的診斷性能[10-11]。本研究通過對80例ANA陽性患者和45例ANA陰性患者的血清進行抗β2GP-1抗體定量檢測，發現ANA陽性組比ANA陰性組中抗β2GP-1抗體陽性者所占比例更高，Pearson相關分析發現ANA核型、滴度與抗β2GP-1抗體定量之間不存在線性相關性。

ANA作為自身免疫性疾病(AID)重要的生物學標志，是臨床應用中最廣泛、最基礎的一組自身抗體。臨床上ANA常見于系統性紅斑狼瘡等系統性AID患者，也可以見于器官特異性AID患者，如自身免疫性肝病等，此外，ANA還可以出現于慢性感染性疾病、腫瘤及健康人群中[12]。本研究發現ANA陽性患者與ANA陰性患者相比有更高的抗β2GP-1抗體陽性例數，而抗β2GP-1抗體可干擾天然抗凝劑β2GP-1的穩態特性從而使機體處于易栓狀態，因此推斷ANA陽性患者存在潛在更高的血栓或不良妊娠風險，臨床上需警惕。

本研究對患者ANA核型、滴度與抗β2GP-1抗體水平的相關性進行研究，目前國內外相關研究報道較少。但本研究存在一定的局限性，由于總標本例數和抗β2GP-1抗體陽性例數均較少，統計學上存在一定的偏倚，后續需要增加總標本例數以得出更加信服的結論。