重慶市江津區不同孕期、基因型的珠蛋白生成障礙性貧血孕婦血常規指標分析

白文學，劉焰利，張 霞，龍堯水

重慶市江津區婦幼保健院檢驗科，重慶 402260

珠蛋白生成障礙性貧血(簡稱地貧)是一種因珠蛋白合成障礙所致的遺傳性溶血性疾病[1-3]。我國長江以南各省地貧發病率較高、影響較大，重慶市每年約有1萬例孕婦可能會生出重型地貧患兒，重型地貧患兒的出生對其家庭和社會帶來了沉重的負擔[4-5]。目前地貧尚無有效的治療方法,所以早期檢測對于地貧的診斷及干預尤為重要。目前常用檢測方法為地貧基因檢測、血紅蛋白分析、血常規檢測，其中地貧基因檢測逐漸成為最重要的檢測方法。地貧基因檢測可用于地貧診斷及分型，但在醫療水平尚比較薄弱的偏遠地區或者社區，醫生無法及時有效地開展基因檢測，而不同類型的地貧患者其血常規檢測相關指標表現也不一，所以血常規檢測成為地貧篩查的重要指標[6-9]。為研究重慶市江津區孕婦人群地貧遺傳學特點，本文重點研究不同孕期、基因型地貧孕婦血常規指標變化，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016-2020年在重慶市江津區婦幼保健院產檢的孕婦，對其資料進行整理，剔除重復、關鍵信息缺失等不符合本研究的對象，最終納入8 559例孕婦作為研究對象。將8 559例孕婦地貧基因檢測結果中地貧基因陽性孕婦作為地貧組、地貧基因陰性孕婦作為對照組。地貧組按照孕期分為孕早期(<14周)165例、孕中期(14～28周)87例、孕晚期(>28周)126例；對照組孕早期6 076例、孕中期1 698例、孕晚期407例。8 559例孕婦年齡為15～50歲，平均年齡(27.06±5.03)歲。本研究經重慶市江津區婦幼保健院醫學倫理委員會研究批準。

1.2方法

1.2.1血常規指標檢測 采用真空采血管分別抽取研究對象靜脈血2 mL于乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝管中，顛倒混勻8次，備用，血常規指標檢測需在 4 h內完成，地貧基因檢測在5 d內完成，標本保存在 2～8 ℃冰箱內。采用希森美康XN-1000自動血細胞分析及配套試劑檢測紅細胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)、紅細胞比容(HCT)、紅細胞平均體積(MCV)、平均血紅蛋白含量(MCH)、平均血紅蛋白濃度(MCHC)、紅細胞體積分布寬度標準差(RDW-SD)。

1.2.2地貧基因檢測 采用導流雜交法對研究對象進行地貧基因檢測。采用裂解法提取DNA，PCR 結合導流雜交技術檢測3種缺失型地貧(--SEA、-α3.7和-α4.2)、3種突變類型α地貧(CS、QS和WS)和17種突變類型β地貧[-28(A-G)、-29(A-G)、-30(T-C)、-32(C-A)、CD14/15(+G)、CD17(A-T)、CD27/28(+C)、CD31(-C)、CD41/42(-TCTT)、CD43(G-T)、CD71/72(+A)、IVS-I-1(G-T，G-A)、IVS-I-5(G-C)、IVS-II-654(C-T)、βE(G-A)、CAP(A-C，A-AAAC)、Int(T-G)]。其中-α3.7、--SEA、-α4.2、CS、WS、CD17(A-T)、CD41/42(-TCTT)、IVS-II-654(C-T)基因型改變較常見，納入常見地貧基因型，剩余基因型改變(包括兩種及以上基因型改變)納入少見地貧基因型。觀察整張膜條上出現的藍紫色斑點。陰性對照檢測結果膜條無藍紫色斑點出現。若在突變或缺失檢測探針出顯色強度與相應正常對照探針相近的藍紫色斑點，則該位點為地貧突變或缺失的雜合子；若在突變或缺失檢測探針處出現的藍紫色斑點，相應的正常對照探針處未出現藍紫色斑點，則該位點為地貧突變或缺失的純合子；若僅在正常對照探針處出現藍紫色斑點，則待測樣品中沒有上述地貧突變或缺失。地貧基因陽性標準：以出現任一種地貧基因陽性者為判定標準。

2 結 果

2.1地貧基因檢測 8 559例孕婦地貧基因檢測結果顯示，地貧基因陽性孕婦378例(4.42%)，其中α地貧孕婦238例(62.96%)，其基因型分別為-α3.7 114例(30.16%)、--SEA 89例(23.54%)、-α4.2 15例(3.97%)、CS 7例(1.85%)、WS 6例(1.59%)、少見型α地貧7例(1.85%)；β地貧孕婦140例(37.04%)，其基因型分別為CD17(A-T) 51例(13.49%)、CD41/42(-TCTT) 34例(8.99%)、IVS-II-654(C-T) 28例(7.41%)、少見型β地貧27例(7.14%)。

2.2地貧組和對照組血常規指標比較 與對照組比較，地貧組RBC升高，Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW-SD均降低，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 對照組與地貧組血常規指標比較

2.3α地貧和β地貧孕婦與對照組血常規指標比較 與對照組相比，α地貧、β地貧孕婦Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW-SD均降低，差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 α地貧與β地貧孕婦與對照組血常規指標比較

2.4常見地貧基因型孕婦與對照組血常規指標比較 與對照組比較，--SEA基因型孕婦RBC升高，MCV、MCH、MCHC、RDW-SD降低，差異有統計學意義(P<0.05)。CD17(A-T)基因型孕婦RBC升高，Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW-SD降低，差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 常見地貧基因型孕婦與對照組血常規指標比較

2.5少見地貧基因型孕婦與對照組血常規指標比較 與對照組比較，少見α地貧基因型孕婦MCV、MCH、MCHC、RDW-SD降低，差異有統計學意義(P<0.05)，見表4。

表4 少見地貧基因型孕婦與對照組血常規指標比較

2.6不同孕期兩組孕婦血常規指標比較 與對照組比較，地貧組孕中期、孕晚期RBC均升高，MCV、MCH、MCHC、RDW-SD均降低，差異有統計學意義(P<0.05)，見表5。

表5 不同孕期兩組孕婦血常規指標比較

3 討 論

地貧屬小細胞低色素性貧血，對于重型地貧新生兒，其出生后即可出現黃疸、貧血和肝脾腫大等現象，嚴重時甚至危及新生兒生命[10-14]。重慶江津區位于重慶西南部，屬于地貧高發區。相對于群體篩查，地貧基因檢測的適應性存在不足，檢測周期較長且費用較高，如果把相應的血常規指標作為地貧早期篩查指標，可以提高篩查效率，降低篩查成本。本研究8 559例孕婦地貧基因檢測結果顯示，地貧基因陽性378例(4.42%)，其中α地貧238例，占62.96%，與文獻[15]報道結果相符。本研究結果顯示，α地貧孕婦地貧基因型主要為-α3.7、--SEA兩種，β地貧孕婦地貧基因型主要為CD17(A-T)、CD41/42(-TCTT)、IVS-II-654(C-T)。與對照組比較，地貧組患者 RBC升高，Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW-SD均降低，且MCV<80 fL，MCH<27 pg，RDW-SD降低，符合地貧小細胞低色素性貧血的血常規指標分布特點[16-17]。與α地貧孕婦比較，β地貧孕婦Hb、HCT、MCV、MCH、RDW-SD較低，提示β地貧孕婦血常規指標變化幅度更大，貧血表現更明顯。本研究結果顯示，與對照組比較，地貧組孕中期、孕晚期MCV、MCH、MCHC、RDW-SD均降低，提示地貧孕婦隨孕期延長貧血程度逐漸加重。為避免中重型地貧患兒的出生，夫婦一方確診為地貧攜帶者，其配偶應行地貧基因檢測。本研究有部分血常規指標正常而地貧基因檢測陽性孕婦，是因為孕婦進行產前遺傳咨詢時，高度懷疑地貧而進行的地貧基因檢測。

綜上所述，本研究初步了解了重慶市江津區地貧孕婦基因型分布情況和地貧孕婦的血常規指標變化。孕婦血常規檢測對孕婦地貧初篩及降低地貧患兒的出生率具有重要的臨床意義。