福建福鼎地區蜜蜂細菌性病原菌調查與分析

王為城

摘要：為了解福鼎地區蜜蜂細菌性病原菌流行情況。對2019—2021年采集病死的蜜蜂樣品423份，采用常規的細菌分離鑒定和PCR方法進行細菌性并進行分離鑒定。結果顯示，結果顯示分離得到幼蟲芽孢桿菌、蜂房蜜蜂球菌、屎腸球菌、蜜蜂螺旋體病、蜜蜂敗血桿菌、蜂房哈夫尼菌6種細菌性疾病，分別占采集樣品的分別占采集樣品的13.5%、13.9%、3.9%、4.5%、14.2%、19.1%，其中以蜜蜂敗血桿菌、蜂房哈夫尼菌、幼蟲芽孢桿菌蜂房蜜蜂球菌4種病原菌為流行的主要病原菌。6種細菌性疾病呈現混合感染，以二重病原菌感染、三重病原菌感染及四重病原菌感染所占比例較高，分別占采集樣品的14.2%、12.3%、13.5%。說明該地區蜜蜂細菌性病較嚴重，呈現多重感染。

關鍵詞：蜜蜂;細菌性疾病;分離鑒定;調查;分析

中圖分類號：S895文獻標識碼：Bdoi：10.3969/j.issn.2096-3637.2021.23.003

Investigation and Analysis of Bacterial Pathogens of Honey Bees in Fuding，Fujian Province

WANG Weicheng

（Agricultural Comprehensive Law Enforcement Brigade，Fuding City，Fujian Ningde 355200，China）

Abstract：To understand the prevalence of bacterial pathogens in Apis Mellifera in Fuding. 423 Bee samples from 2019——2021 were isolated and identified by routine bacterial isolation and PCR. The results showed that six bacterial diseases were isolated，including Bacillus cereus，bee colony bee coccus，Bee Enterococcus Faecium，Bee spirochete disease，Bee Septicemia Bacillus，and Hafniellacellulosae，13.5%，13.9%，3.9%，4.5%，14.2% and 19.1% of the samples，respectively，among them，Septicemia Bacilli，Hafniellacellulosae and Bacillus cereus were the main pathogens. There were mixed infection in 6 kinds of bacterial diseases，the proportion of double，triple and quadruple pathogens were 14.2%，12.3% and 13.5%，respectively.The results showed that the bacterial venereal disease of honey bees in this area was serious and presented multiple infection.

Keywords：bee，bacterial diseases，isolation and identification，investigation，analysis

0引言

經過統計我國每年蜂蜜產量達50 t以上，占世界總產量的65%以上，其出口量達12萬t，養蜂業成為組成生態農業的重要組成部分。近年，隨著蜜蜂養殖數量的增加，蜜蜂細菌性疾病發生與流行呈現逐年增高的趨勢，且成為危害蜜蜂養殖業的嚴重的疾病之一，嚴重影響蜜蜂的經濟效益，臨床中經過統計蜜蜂的細菌性疾病的的發生率在50%以上，該病成為奶牛養殖過程中常見疾病，且給養蜂業帶來巨大的經濟損失。試驗對2019—2021年采集采集病死的蜜蜂樣品423份進行細菌性病原菌分離，為該病的綜合防控提供參考依據。

1材料與方法

1.1病料來源

2019—2021年采集采集病死的蜜蜂樣品423份進行細菌性病原分離鑒定。

1.2主要試劑

7%綿羊血脫纖培養基，普通營養培養基，均購自青島日水微生物科技有限公司;細菌鑒定試紙條購自法國梅里埃公司;2ch3TaqMarkerMix，購北京酷來搏科技有限公司;DL2000DNAmarker;購自北京邁瑞達科技有限公司。

1.3細菌分離培養

無菌條件下，對采集的病死蜂樣品進行處理，處理的樣品接種于7%綿羊血脫纖培養基恒溫37 ℃培養12～24 h，挑取單個菌落接種普通營養培養基純化培養，并染色鏡檢。

1.4細菌生化試驗

對普通營養培養基分離菌株，參照細菌的試紙條說明書對分離菌株進行生化試驗鑒定。

1.5分離菌株的細菌PCR鑒定

采用水煮法提取分離菌株的基因組DNA，報道細菌的16SrRAN通用引物，引物由華大基因公司合成，以提取分離菌株的基因組DNA為模板進行PCR鑒定和測序，測序結果根據Genbank登錄的參考株進行同源性對比。

2結果

2.1細菌分離鑒定結果

對2019—2021年采集病死的蜜蜂樣品423份，采用常規的細菌分離鑒定、生化試驗和PCR方法進行細菌的分離鑒定，結果顯示分離得到美洲幼蟲腐臭病（幼蟲芽孢桿菌）、歐洲幼蟲腐臭病（蜂房蜜蜂球菌）、屎腸球菌、蜜蜂螺旋體病、蜜蜂敗血桿病（蜜蜂敗血桿菌）、蜜蜂副傷寒（蜂房哈夫尼菌）6種細菌性疾病，分別占采集樣品的13.5%、13.9%、3.9%、4.5%、14.2%、19.1%，其中蜜蜂敗血桿菌、蜂房哈夫尼菌、幼蟲芽孢桿菌蜂房蜜蜂球菌4種病原菌所占比例較高，見表1。

2.2多重病原菌感染分析結果結果

對2019—2021年采集病死的蜜蜂樣品423份，分離得到美洲幼蟲腐臭病（幼蟲芽孢桿菌）、歐洲幼蟲腐臭病（蜂房蜜蜂球菌）、屎腸球菌、蜜蜂螺旋體病、蜜蜂敗血桿病（蜜蜂敗血桿菌）、蜜蜂副傷寒（蜂房哈夫尼菌）等6細菌性疾病。并對6種細菌性病原進行多重感染分析，結果由表可知，二重病原菌感染、三重病原菌感染、四重病原菌感染、五重病原菌感染、六重病原菌感染分別占采集樣品的14.2%、12.3%、13.5%、4.5%、3.8%，其中以二重病原菌感染、三重病原菌感染及四重病原菌感染所占比例較高，見表2。

3討論與結論

蜜蜂的細菌性疾病具有感染率高、死亡率高、危害程度嚴重、傳播迅速及持續時間長等特點。蜜蜂根據發病特點蜜蜂的細菌性疾病主要包括幼蟲的細菌病和成峰的細菌病。蜜蜂的細菌性疾病對養蜂業的危害較大，對其流行病調查具有重要的意義。2019—2021年采集病死的蜜蜂樣品423份中分離得到幼蟲芽孢桿菌、蜂房蜜蜂球菌、屎腸球菌、蜜蜂螺旋體病、蜜蜂敗血桿菌、蜂房哈夫尼菌等6種細菌性疾病，其中以蜜蜂敗血桿菌、蜂房哈夫尼菌、幼蟲芽孢桿菌蜂房蜜蜂球菌4種病原菌為流行的主要病原菌，6種細菌性疾病呈現混合感染，以二重病原菌感染、三重病原菌感染及四重病原菌感染所占比例較高，分別占采集樣品的14.2%、12.3%、13.5%。說明該地區蜜蜂細菌性病較嚴重，呈現多重感染。應該引起重視，注意蜜蜂細菌病的綜合防控。

參考文獻

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