去氫駱駝蓬堿對(duì)線蟲神經(jīng)毒性機(jī)制的內(nèi)源性代謝研究

孫倩倩，杜 裕，劉 明，宋星卓，邢彥燾，王析瑞，蔣坤秀，王 娜，劉永剛

(1.北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 102488；2.生物醫(yī)學(xué)分析中心，北京 100850)

去氫駱駝蓬堿(harmine, HM)，又稱肉葉蕓香堿，是一種三環(huán)β-咔啉類生物堿，主要來源于多年生草本蒺藜科駱駝蓬(PeganumharmalaL.)，在駱駝蓬子中含量較高，具有抗菌、抗腫瘤、降血糖、抗氧化和抗寄生蟲等藥理活性[1-2]。但駱駝蓬子有毒，去氫駱駝蓬堿具有嚴(yán)重的神經(jīng)毒性，會(huì)引起患者嘔吐、震顫、幻覺甚至死亡，因此未應(yīng)用于臨床[3]。有研究表明[4]，去氫駱駝蓬堿可能通過誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞的活化，激活的小膠質(zhì)細(xì)胞促使炎癥因子釋放增加，導(dǎo)致神經(jīng)組織損傷。但是，目前對(duì)去氫駱駝蓬堿的神經(jīng)毒性機(jī)制尚不明確。

秀麗隱桿線蟲(Caenorhabditiselegans,C.elegans)屬于線蟲動(dòng)物門動(dòng)物。線蟲作為模式生物，具有培養(yǎng)簡單、易保存和傳代、便于觀察、遺傳背景清晰和造模簡單等優(yōu)勢(shì)[5-8]。線蟲以尿嘧啶滲漏突變型大腸桿菌(E.coliOP50)為食，在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，且單個(gè)培養(yǎng)基上(直徑9 cm)可存活幾百條線蟲，簡單易行。線蟲擁有簡單但完整的神經(jīng)系統(tǒng)，有利于深入研究人類神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能[9]。目前研究發(fā)現(xiàn)[10-11]，可通過線蟲的運(yùn)動(dòng)行為、攝食行為、乙酰膽堿酯酶、基因表達(dá)定量分析和神經(jīng)元形態(tài)反映神經(jīng)毒性。

代謝組學(xué)通過觀察生物體系受刺激或干擾后，其代謝產(chǎn)物隨時(shí)間的變化來研究完整生物體的功能和代謝[12]。通常采用高效液相色譜(HPLC)、液相色譜-質(zhì)譜(LC-MS)、氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)以及核磁共振(NMR)等高通量、高分辨和高靈敏度的分析手段研……