張鈺清,孫公偉,邢 志,張四純,張新榮
(清華大學(xué)化學(xué)系,北京 100084)
細(xì)菌在微生物種群活動(dòng)與人體健康的關(guān)系、微生物致病研究中占據(jù)著重要的位置[1]。大量研究表明,除了侵入人體的細(xì)菌會(huì)直接或間接導(dǎo)致多種疾病,人體內(nèi)細(xì)菌群落的組成結(jié)構(gòu)也會(huì)對(duì)人體的激素水平、血壓調(diào)控,甚至癌癥治療產(chǎn)生影響[2]。為了深入研究細(xì)菌及其產(chǎn)物對(duì)生物體的作用,研究者們對(duì)精準(zhǔn)、快速的細(xì)菌檢測(cè)、鑒定和分型方法有了越來(lái)越高的需求[3-5]。
常用的細(xì)菌檢測(cè)方法有生化染色法、核酸測(cè)序法、電化學(xué)檢測(cè)法、熒光標(biāo)記法、酶聯(lián)免疫檢測(cè)法、質(zhì)譜檢測(cè)法等[6-16]。生化染色法和核酸測(cè)序法是早期細(xì)菌鑒定的金標(biāo)方法。前者主要通過(guò)觀察菌落形態(tài)和細(xì)菌細(xì)胞壁特殊分子的生化染色結(jié)果,識(shí)別菌株種類;后者則是通過(guò)對(duì)細(xì)菌核酸的擴(kuò)增檢測(cè)和基因測(cè)序來(lái)確定細(xì)菌的種類。但是這兩種方法對(duì)細(xì)菌的純度要求較高,需要在細(xì)菌的分離培養(yǎng)上花費(fèi)大量時(shí)間,難以實(shí)現(xiàn)對(duì)混合細(xì)菌的快速檢測(cè)[5]。電化學(xué)法、熒光標(biāo)記法、酶聯(lián)免疫法大多依靠細(xì)菌的特異性抗原或者特征核酸片段識(shí)別細(xì)菌,根據(jù)反應(yīng)前后電信號(hào)或光信號(hào)的變化表征細(xì)菌的數(shù)量。雖然檢測(cè)成本較低且檢測(cè)速度快,但在進(jìn)行多組分檢測(cè)時(shí)會(huì)受到限制。電化學(xué)法和酶聯(lián)免疫法不適用于多組分的同時(shí)檢測(cè),而熒光法雖然有多種熒光標(biāo)記基團(tuán)可供選擇,但在實(shí)際進(jìn)行多組分檢測(cè)時(shí),不可避免的光譜重疊會(huì)限制可同時(shí)使用的熒光探針數(shù)量[17-19]?!?br>