微透析-液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在中藥研究中的應(yīng)用

龐 博，劉 舒，劉志強(qiáng)，劉淑瑩，宋鳳瑞

(1.中國科學(xué)院長春應(yīng)用化學(xué)研究所，長春質(zhì)譜中心&吉林省中藥化學(xué)與質(zhì)譜重點實驗室，吉林 長春 130022；2.天津市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢測技術(shù)研究院，天津 300384)

中醫(yī)藥歷經(jīng)幾千年的發(fā)展，在疾病的預(yù)防和治療方面發(fā)揮了重要作用。然而，由于中藥成分的復(fù)雜性以及體內(nèi)過程的多樣性，早期中藥相關(guān)研究受分析技術(shù)及方法學(xué)的制約。20世紀(jì)80年代出現(xiàn)的電噴霧電離質(zhì)譜技術(shù)，將液相色譜與質(zhì)譜相結(jié)合，極大推進(jìn)了中藥現(xiàn)代化的發(fā)展進(jìn)程。特別是液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)與各種生物分析技術(shù)的不斷融合，大大擴(kuò)展了質(zhì)譜技術(shù)在現(xiàn)代中藥研究及生命科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用范圍，如微透析-液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)將微透析實時、原位取樣的特點，與液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)的快速分離、結(jié)構(gòu)表征的優(yōu)勢相結(jié)合，近年來被廣泛用于中藥活性成分的篩選、中藥藥代動力學(xué)及作用機(jī)制等方面的研究[1-5]。本文將對以上應(yīng)用進(jìn)行概述。

1 微透析技術(shù)簡介

微透析是以膜透析原理為基礎(chǔ)的微量生物活體動態(tài)連續(xù)取樣技術(shù)[6]，早期主要用于神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域。近年來，微透析技術(shù)已被成功應(yīng)用于許多組織器官及體液的研究[4,7-9]。微透析取樣技術(shù)的原理圖示于圖1。實驗中選取與細(xì)胞外液組成相似的生理溶液作為灌流液，將含有半透膜結(jié)構(gòu)的探針插入采樣組織，在灌流液恒速灌注過程中，由于半透膜兩側(cè)存在濃度差，小分子物質(zhì)可以沿濃度梯度逐漸擴(kuò)散并被灌流液不斷帶出，而蛋白質(zhì)等生物大分子及與蛋白結(jié)合的非游離型藥物則不能通過半透膜，從而達(dá)到取樣的目的[10-11]?！?br>