凝聚胺技術(shù)在臨床輸血檢驗(yàn)中的優(yōu)勢(shì)及應(yīng)用效果

姚文娟 顏巍

對(duì)出血性疾病患者而言，主要治療手段為輸血治療。大量研究資料顯示，輸血治療能夠提高出血性疾病患者的治療效果，維持其體內(nèi)血壓穩(wěn)定循環(huán)[1]。隨著輸血治療被廣泛應(yīng)用，輸血安全性逐漸受到有關(guān)人員的重視。基于此，在患者輸血之前采用高效率且方便的血液檢驗(yàn)技術(shù)具有重要意義。現(xiàn)階段來看，臨床常用凝聚胺法、鹽水法、酶法、抗球蛋白試驗(yàn)法進(jìn)行血液檢查。凝聚胺技術(shù)是一種不完全抗體檢驗(yàn)方法，具有以下幾種特點(diǎn)：其一，操作成本低；其二，操作便捷；其三，靈敏度高等。也有研究認(rèn)為，凝聚胺技術(shù)在篩選抗體和自身免疫溶血性貧血中具有理想效果，因此不難看出凝聚胺技術(shù)在臨床輸血檢驗(yàn)中具有較大應(yīng)用優(yōu)勢(shì)[2]。為了進(jìn)一步驗(yàn)證這一結(jié)論，文章選取在2019年1—12月收治的280例接受輸血檢查患者進(jìn)行對(duì)照觀察，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院（在2019年1—12月）收治的280例接受輸血檢查患者，進(jìn)行隨機(jī)分組。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）均在知情下參與；（2）意識(shí)清楚者；（3）檢查前30 d未使用過影響檢查結(jié)果的藥物；（4）臨床資料完整者。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）妊娠期者、哺乳期者；（2）合并血液系統(tǒng)疾病者；（3）合并精神障礙者；（4）中途退出本次研究者。凝聚胺技術(shù)組有34例男、36例女，平均年齡為（50.5±12.3）歲。鹽水組有32例男、38例女，平均年齡為（51.2±11.7）歲。酶法組有31例男、39例女，平均年齡為（52.3±10.8）歲。抗球蛋白試驗(yàn)組有33例男、37例女，平均年齡為（52.8±10.1）歲。三組性別、年齡比較無差異（P＞0.05）。

1.2 方法

四組研究對(duì)象在輸血檢查前告知其在空腹?fàn)顟B(tài)下采集血液標(biāo)本。酶法組和抗球蛋白試驗(yàn)組的有關(guān)操作參考相關(guān)文獻(xiàn)中的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)[3]。

凝聚胺技術(shù)組應(yīng)用凝聚胺法，主要操作步驟為：（1）選用2支試管，將研究對(duì)象的2滴血清和獻(xiàn)血人員的1滴紅細(xì)胞懸液加入第一支試管中，紅細(xì)胞懸液濃度為3%~5%；（2）將研究對(duì)象的1滴紅細(xì)胞懸液和獻(xiàn)血人員的2滴血清加入第二支試管中，紅細(xì)胞懸液濃度為2%~5%；（3）根據(jù)凝聚胺試劑盒說明書進(jìn)行有關(guān)操作。

鹽水組應(yīng)用鹽水法，主要操作步驟為：（1）將研究對(duì)象的靜脈血樣進(jìn)行離心處理，確保血清分離成功后加入生理鹽水介質(zhì)，紅細(xì)胞鹽水懸液濃度為3%~5%；（2）將研究對(duì)象和獻(xiàn)血者的血清分別放入試管中，在研究對(duì)象血清中滴入獻(xiàn)血者的紅細(xì)胞懸液，在獻(xiàn)血者的血清中滴入研究對(duì)象的紅細(xì)胞懸液，搖勻，離心；（3）觀察紅細(xì)胞狀態(tài)，如果持續(xù)保持凝聚狀態(tài)則為陽性，如果出現(xiàn)分散狀態(tài)則為陰性。

1.3 觀察指標(biāo)

分析四組接受輸血檢查患者的靈敏度以及凝聚胺法特異性情況和非特異性凝聚消失情況。靈敏度為陽性例數(shù)的比值；特異性凝聚成凝聚狀態(tài)，非特異性凝聚為凝塊在0~3 min內(nèi)呈分散狀態(tài)。凝集狀態(tài)分別分為最強(qiáng)凝集（++++）、強(qiáng)凝集（+++）、一般凝集（++）、弱凝集（+）、無凝集（-）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

資料分析采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料用（x-±s）表示，組間比較采用Student’st檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用率或構(gòu)成比表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher精確概率法。所有統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)均為雙側(cè)概率檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為0.05。

2 結(jié)果

2.1 四組不同方法的靈敏度比較

凝聚胺技術(shù)組接受輸血檢查患者的靈敏度明顯高于鹽水組、酶法組、抗球蛋白試驗(yàn)組（P＜0.05），見表1。

表1 四組不同方法的靈敏度比較[例（%）]

2.2 凝聚胺法特異性情況和非特異性凝聚消失情況分析

凝聚胺法特異性在不同時(shí)間段（5~10 s、11~20 s、21 s~3 min、≥3 min）的消失例數(shù)明顯高于凝聚胺法非特異性（P＜0.05），見表2。

表2 凝聚胺法特異性情況和非特異性凝聚消失情況分析[例（%）]

3 討論

臨床對(duì)于輸血后的有效性非常重視，輸血后患者的機(jī)體免疫力對(duì)抗原細(xì)胞產(chǎn)生一定程度的損傷，對(duì)于病情嚴(yán)重患者將產(chǎn)生溶血性輸血反應(yīng)，繼而威脅到患者的生命健康安全。基于此，在輸血之前開展輸血測(cè)驗(yàn)對(duì)提高患者的輸血安全性具有重要價(jià)值。傳統(tǒng)檢測(cè)方法是鹽水法，但隨著鹽水法在臨床的廣泛應(yīng)用。臨床發(fā)現(xiàn)，雖然鹽水法是一種操作比較簡(jiǎn)單的方法，可在短時(shí)間捏獲取血液檢驗(yàn)結(jié)果，但該方法的檢測(cè)準(zhǔn)確性并不理想，容易發(fā)生遺漏現(xiàn)象，會(huì)提高不良事件的發(fā)生率。

通過輸血檢驗(yàn)可有效檢測(cè)出受檢者血液中完全抗體和不完全抗體的組合情況，繼而推斷出患者接受輸血后是否發(fā)生特異性凝集和非特異性凝聚，繼而實(shí)現(xiàn)交叉配血，提高輸血安全性[4]。目前來看，凝聚胺技術(shù)應(yīng)用時(shí)間比較短。酶法是臨床中較為常用的一種輸血檢驗(yàn)方法，利用酶與特定成份來發(fā)生特異性反應(yīng)，繼而確定檢查對(duì)象的血液成分是否有完全抗體成份和不完全抗體成份。酶法能夠?qū)Σ煌瑱z驗(yàn)樣本進(jìn)行分離處理，再完成血液成份的分析和鑒定工作。也有資料顯示，對(duì)于特定酶而言，只對(duì)特定的抗體產(chǎn)生反應(yīng)[5]。酶法也存在不足之處，例如，無法排除偶發(fā)性的特異性變化，不同環(huán)境以及不同濃度下的酶法特異性變化也不一，因此其檢驗(yàn)靈敏度不夠高。抗球蛋白試驗(yàn)法是一種應(yīng)用在紅細(xì)胞不完全抗體檢驗(yàn)的方法，根據(jù)試驗(yàn)標(biāo)本能夠進(jìn)行直接試驗(yàn)和間接試驗(yàn)，是一種簡(jiǎn)單的交叉配血檢驗(yàn)方法[6]。當(dāng)抗球蛋白的不完全抗體發(fā)生特異性情況時(shí)，紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集狀況，結(jié)果呈陽性，因此也說明血液中含有對(duì)應(yīng)抗體[7]。總而言之抗球蛋白試驗(yàn)法是一種檢驗(yàn)靈敏度較高的方法，但是在完全抗體檢驗(yàn)中的靈敏度檢驗(yàn)效果不高，與此同時(shí)對(duì)紅細(xì)胞表面不完全抗體的檢驗(yàn)靈敏度比較高[8]。但有研究指出，臨床現(xiàn)今應(yīng)用 RBC IgG抗體檢測(cè)技術(shù)中，凝聚胺技術(shù)是最可靠的一種檢測(cè)手段。凝聚胺技術(shù)本身是依靠凝聚胺自身正電荷與負(fù)電荷的中和特點(diǎn)，在溶解后借助正電荷附著在紅細(xì)胞的表面，從而達(dá)到降低表面電位，和紅細(xì)胞發(fā)生特異性凝聚，促使凝聚胺再次中和紅細(xì)胞懸濁液，促使紅細(xì)胞表面缺失但是明顯需要的電荷進(jìn)行擴(kuò)散，從而達(dá)到檢測(cè)目的。再者，凝聚胺技術(shù)能夠有效診斷配對(duì)血型之間是否保持穩(wěn)定，在診斷和預(yù)防新生兒血型不合溶血中有著良好表現(xiàn)。凝聚胺技術(shù)檢查過程中，加入試劑后紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集狀況，如果60 s內(nèi)凝集分散，則表示檢驗(yàn)結(jié)果為陰性，則提示交叉配血成功；如果60 s內(nèi)未分散，則表示檢驗(yàn)結(jié)果為陽性，則提示交叉配血失敗且無法互相輸血[9]。從上述數(shù)據(jù)來看，凝聚胺技術(shù)的檢出時(shí)間比較短，限制時(shí)間在60 s內(nèi)，從檢驗(yàn)效率來看，凝聚胺技術(shù)遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于其他檢驗(yàn)方法[10]。臨床還有研究指出，與鹽水法比較，凝聚胺技術(shù)的靈敏度、準(zhǔn)確度以及穩(wěn)定性更高，且操作比較簡(jiǎn)單，可直觀觀察應(yīng)用結(jié)果，可有效鑒別血型，可有效篩查抗體，可有效預(yù)防溶血性輸血不良反應(yīng)的發(fā)生。

本文研究結(jié)果顯示凝聚胺技術(shù)組接受輸血檢查患者的靈敏度明顯高于鹽水組、酶法組、抗球蛋白試驗(yàn)組（P＜0.05），凝聚胺法特異性在不同時(shí)間段（5~10 s、11~20 s、21 s~3 min、≥3 min）的消失例數(shù)明顯高于凝聚胺法非特異性（P＜0.05）。凝聚胺技術(shù)針對(duì)紅細(xì)胞表面唾液酸展開中和之后所出現(xiàn)的可逆非特異凝聚，臨床中對(duì)紅細(xì)胞免疫球蛋白G抗體進(jìn)行及時(shí)且有效的檢測(cè)[11]。凝聚胺技術(shù)主要原理表現(xiàn)為：凝聚胺存在正電荷，可有效中和負(fù)電荷，通過有效溶解將正電荷以及血清中的紅細(xì)胞有機(jī)結(jié)合，從而降低接受輸血治療的患者電位，中和時(shí)紅細(xì)胞可會(huì)發(fā)揮出非特異性凝聚作用，紅細(xì)胞懸液與凝聚胺產(chǎn)生中和效果，根據(jù)此特點(diǎn)對(duì)人體中的紅細(xì)胞表面進(jìn)行相關(guān)檢測(cè)。凝聚胺技術(shù)相比起酶法、鹽水法和抗球蛋白試驗(yàn)方法等操作起來更為簡(jiǎn)單，與此同時(shí)可有效提高靈敏度[12]。

綜上所述，凝聚胺技術(shù)在臨床輸血檢驗(yàn)中的優(yōu)勢(shì)及應(yīng)用效果顯著。