73%丙炔氟草胺·乙草胺乳油的高效液相色譜分析方法

李世忠

（遼寧省農藥檢定站，遼寧 沈陽 110034）

1 前言

丙炔氟草胺·乙草胺乳油主要由丙炔氟草胺和乙草胺復配而成，丙炔氟草胺·乙草胺乳油為玉米田苗后除草劑，適用于防除玉米田一年生和多年生禾本科雜草和闊葉雜草。目前對于丙炔氟草胺·乙草胺乳油復配有效成分含量的檢測，多采用氣相色譜和液相色譜分別檢測。通過大量的實驗測定并結合本實驗室的條件，找到了丙炔氟草胺·乙草胺乳油的液相色譜分離方法，結果表明，方法快速準確，適用于農藥企業質量控制和質檢機構市場監控。

2 實驗部分

2.1 儀器與試劑

安捷倫HP1100液相色譜儀，具二極管陣列檢測器；色譜工作站；KQ-100超聲波清洗器；BP221S賽多利斯電子天平；色譜柱：Hypersil ODS 4.6 mm×250 mm 5μm。

丙炔氟草胺標樣≥98.0%；乙草胺標樣≥98.0%；2,4-滴異辛酯≥98.0%。

2.2 色譜條件

流動相：V（乙腈）∶V（水）=50∶50；經濾膜過濾，并進行脫氣；

流速：1.0 mL·min-1；

檢測波長：230 nm；

進樣體積：5μL；

保留時間（min）: 丙炔氟草胺約5.2 min，乙草胺約10.6 min。

在上述色譜條件下，丙炔氟草胺和乙草胺的標樣譜圖見圖1，丙炔氟草胺·乙草胺乳油樣品的色譜圖見圖2。

圖1 丙炔氟草胺·乙草胺標樣譜圖

圖2 丙炔氟草胺·乙草胺乳油樣品譜圖

由此可見，色譜峰分離較好。

2.3 分析步驟

2.3.1 標樣溶液的配制：

稱取丙炔氟草胺標樣約0.03（精確至0.000 1 g）置于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻、備用。稱取乙草胺標樣約0.085 g (精確至0.000 1 g），置于50 mL容量瓶中，用移液管準確移取5 mL上述丙炔氟草胺溶液至于其中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻、制成混合標樣溶液備用。

2.3.2 試樣溶液的配制

準確稱取約0.12 g樣品（準確至0.000 1 g ）于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解，超聲振蕩后，冷卻至室溫后用孔徑為0.45 μm的濾膜過濾，待測。

2.3.3 測定

在上述操作條件下，待儀器穩定后，連續注入數針標樣溶液，直至相鄰兩針丙炔氟草胺（乙草胺）峰面積相對變化小于1.5%后，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。

2.3.4 計算

將測得的兩針試樣溶液以及試樣前后兩針標樣溶液中辛酰溴苯腈（煙嘧磺隆、2，4-滴異辛酯）分別進行平均。

將測得的兩針試樣溶液以及試樣前后兩針標樣溶液峰面積分別進行平均，丙炔氟草胺（乙草胺）的質量分數X1按式(1)計算：

式中：m1—標樣溶液中丙炔氟草胺（乙草胺）的質量，g；

m2—試樣的質量，g；

A1—標樣溶液中丙炔氟草胺（乙草胺）峰面積的平均值；

A2—樣品溶液中丙炔氟草胺（乙草胺）峰面積的平均值；

ω—標樣中丙炔氟草胺（乙草胺）的質量分數，%；

r—標樣稀釋倍數丙炔氟草胺r=10，乙草胺r=1。

3 結果與討論

3.1 線性關系試驗

稱取丙炔氟草胺標樣0.301 2 g （精確至0.000 1 g）（質量分數99.3%），置于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻、備用。稱取乙草胺標樣0.856 2 g（精確至0.000 1 g）（質量分數99.2%），置于50 mL容量瓶中，用移液管準確移取5 mL上述丙炔氟草胺溶液至于其中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻、用移液管分別移取3、4、5、6、7 mL至50 mL容量瓶中，用乙腈定容，配置成5個梯度濃度的標準溶液。待儀器穩定后按濃度從低到高順序進樣。以標準溶液濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標制得標準曲線。見圖1、圖2。

圖3 丙炔氟草胺測定方法線性關系圖

圖4 乙草胺測定方法線性關系數據

3.2 精密度試驗

對73%丙炔氟草胺·乙草胺乳油試樣進行5次平行測定，檢驗分析方法的精密度。測得丙炔氟草胺的標準偏差為0.004，相對標準偏差為0.18%，相對標準偏差低于2.33% Horwits公式計算值，測得乙草胺的標準偏差為 0.229，相對標準偏差為0.33%，相對標準偏差低于1.41% Horwits公式計算值。因此本方法對73%丙炔氟草胺·乙草胺乳油中的丙炔氟草胺和乙草胺含量測定有良好的精密度。

3.3 準確度試驗

為驗證本方法的系統誤差，對方法的準確度進行了驗證，按照配方比例要求，將除原藥以外的所有助劑混合，做制劑空白。按制劑標稱值在制劑空白中分別添加一定質量的丙炔氟草胺標樣、乙草胺標樣，分別測定丙炔氟草胺、乙草胺的回收率，最終測定丙炔氟草胺回收率在98.6%～100.1%之間，乙草胺回收率在98.8%～99.9%之間，分析方法具有良好的準確度。

3.4 特異性測定試驗

本標準分析方法采用HPLC-DAD峰純度分析法對丙炔氟草胺、乙草胺進行鑒別。由譜圖可知，73%丙炔氟草胺·乙草胺乳油在該分析方法下丙炔氟草胺、乙草胺于230 nm處對紫外光均有較強的吸收信號。從色譜圖可以清晰地看出，有效成分丙炔氟草胺、乙草胺處無其他物質干擾，色譜峰純度因子丙炔氟草胺為999.8、乙草胺為999.8、符合定量分析要求。

3.5 非分析物干擾試驗

助劑中的任何干擾物均會導致分析方法出現系統偏差，分析時同時測定不帶助劑的丙炔氟草胺、乙草胺原藥和空白樣品，通過不加助劑的原藥色譜圖和不加原藥的助劑色譜圖判定，結果顯示，非分析物對有效成分丙炔氟草胺、乙草胺的分析不構成干擾。

4 結束語

用本高效液相色譜法檢測丙炔氟草胺·乙草胺乳油中的丙炔氟草胺和乙草胺，具有快速準確等優點，且重現性、穩定性、分離效果均能滿足產品的質量要求，是一個較為理想的檢驗方法。