GC測(cè)定艾司奧美拉唑鈉中2-苯基-2-丙醇?xì)埩袅?/h1>
2021-09-03 09:54:50張治云
食品與藥品 2021年4期
楊 帥，張治云
（山東省藥學(xué)科學(xué)院，山東 濟(jì)南 250101）
近年，消化道潰瘍疾病的發(fā)病率逐年增高，質(zhì)子泵抑制劑的應(yīng)用也越來越廣泛。艾司奧美拉唑是奧美拉唑的S-異構(gòu)體，是全球首個(gè)異構(gòu)體質(zhì)子泵抑制劑（proton pump inhibitor，PPI），通過特異性的靶向作用機(jī)制減少胃酸分泌，是壁細(xì)胞中質(zhì)子泵的特異性抑制劑，艾司奧美拉唑較奧美拉唑具有更高的生物利用度和更好的藥動(dòng)學(xué)性質(zhì)[1-2]。
過氧化氫異丙苯（cumene hydroperoxide，CHP）已廣泛用于精細(xì)化工、高分子材料和有機(jī)合成等領(lǐng)域[3]。藥物合成中，常將CHP作為不對(duì)稱氧化劑，可用于右旋蘭索拉唑、埃索美拉唑、左旋泮托拉唑鈉等多種原料藥合成[3-9]。CHP化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，自身易分解[10-12]，其不穩(wěn)定性一方面帶來安全隱患，另一方面為反應(yīng)過程帶來不必要的副產(chǎn)物[12-17]。本文研究了CHP主要的分解產(chǎn)物2-苯基-2-丙醇（又名α-枯基醇，枯烯醇，二甲基芐醇，二甲基苯基甲醇），建立了氣相色譜法（GC）檢測(cè)艾司奧美拉唑鈉原料藥中2-苯基-2-丙醇?xì)埩袅康姆椒ā１疚慕⒌姆椒`敏高，穩(wěn)定性好，色譜柱耗材易于采購，檢測(cè)成本低，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確，方法重現(xiàn)性好，符合《中國(guó)藥典》2020年版[18]的有關(guān)規(guī)定。
1 儀器與試藥
1.1 儀器
Agilent 7890B 氣相色譜儀，包括氫火焰離子化檢測(cè)器（FID）及色譜工作站（美國(guó)安捷倫公司）；Mettler XS205電子分析天平（瑞士梅特勒-托利多公司）。
1.2 試藥
艾司奧美拉唑鈉（自制，批號(hào)：20180802，含量：99.56 %）；2-苯基-2-丙醇（上海阿拉丁生化科技，編號(hào)：P107040，含量：97 %）；二甲基亞砜（天津康科德，色譜純，批號(hào)：181010）。
2 方法與結(jié)果
2.1 色譜條件
色譜柱：安捷倫DB-624毛細(xì)管柱（30 m×0.53 mm，3 μm）；初始溫度為50 ℃，以每分鐘10 ℃的速率升溫至220 ℃，保持5 min；進(jìn)樣口溫度：230 ℃；FID檢測(cè)器溫度：250 ℃。
2.2 溶液的制備
2.2.1 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取2-苯基-2-丙醇適量，加溶劑（二甲基亞砜）溶解并定量稀釋成每1 ml中含50 μg的溶液，作為對(duì)照品溶液。
2.2.2 供試品溶液的制備 取艾司奧美拉唑鈉50 mg，精密稱定，置5 ml量瓶中，加溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。
2.3 專屬性試驗(yàn)
取空白溶劑（二甲基亞砜）、對(duì)照品溶液、供試品溶液各1 μl，分別注入氣相色譜儀，依法測(cè)定，典型色譜圖見圖1。結(jié)果空白溶劑對(duì)2-苯基-2-丙醇測(cè)定無干擾，說明本法專屬性良好。
圖1 專屬性試驗(yàn)GC圖譜
2.4 線性關(guān)系
精密稱取2-苯基-2-丙醇31.35 mg，置已盛有適量溶劑的25 ml量瓶中，加溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。精密量取貯備液0.1，0.5，1.0，1.5，2.0 ml，分別置25 ml量瓶中，加溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為線性1～5號(hào)溶液。分別量取1 μl注入氣相色譜儀，依法測(cè)定，以2-苯基-2-丙醇濃度（C）為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的峰面積（A）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果，2-苯基-2-丙醇濃度在5～100 μg/ml范圍內(nèi)與峰面積的線性關(guān)系良好，線性方程為A=1.5691C-0.1995，相關(guān)系數(shù)（r）為0.9999。
2.5 精密度試驗(yàn)
取2.2.1項(xiàng)下對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，計(jì)算2-苯基-2-丙醇峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）。結(jié)果，2-苯基-2-丙醇峰面積RSD為0.88 %，表明方法系統(tǒng)精密度良好。
2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)
取2.2.1項(xiàng)下對(duì)照品溶液，分別于配制后0，2，4，8，16，24，32，48 h，精密量取1 μl注入氣相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果，48 h內(nèi)2-苯基-2-丙醇峰面積無明顯變化趨勢(shì)，RSD為1.33 %（n=8），表明對(duì)照品溶液配制后至少在48 h內(nèi)穩(wěn)定。
2.7 定量限與檢測(cè)限
取2.2.1項(xiàng)下對(duì)照品溶液，逐級(jí)稀釋成不同濃度的溶液，進(jìn)樣測(cè)定，以S/N≈10時(shí)對(duì)應(yīng)濃度為定量限，以S/N≈3時(shí)對(duì)應(yīng)濃度為檢出限。結(jié)果，2-苯基-2-丙醇的定量限為4.7605 μg/ml，檢出限為1.6181 μg/ml。
2.8 重復(fù)性試驗(yàn)
取艾司奧美拉唑鈉樣品（批號(hào)：20180802）6份，每份約50 mg，分別精密稱定，依法測(cè)定樣品中2-苯基-2-丙醇的含量。結(jié)果，6份樣品中均未檢出2-苯基-2-丙醇。
2.9 回收率試驗(yàn)
精密稱取2-苯基-2-丙醇35.06 mg，置入已盛有適量溶劑的25 ml量瓶，加溶劑稀釋至刻度，搖勻。精密量取0.8，1.0，1.2 ml，分別置入25 ml量瓶，加溶劑至刻度，搖勻。取艾司奧美拉唑鈉樣品（批號(hào)：20180802）9份，每份約50 mg，分別精密稱定，置入5 ml量瓶，分別用配制的3組溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，取2.2.1項(xiàng)下對(duì)照品溶液，同法測(cè)定。按外標(biāo)法計(jì)算2-苯基-2-丙醇的回收率，結(jié)果見表1。
表1 2-苯基-2-丙醇回收率試驗(yàn)結(jié)果
2.10 耐用性試驗(yàn)
通過改變初始柱溫、進(jìn)樣口溫度、檢測(cè)器溫度和載氣流速等參數(shù)，以樣品溶液中2-苯基-2-丙醇含量為指標(biāo)考察色譜條件耐用性。結(jié)果表明，色譜條件在確認(rèn)的耐用性范圍內(nèi)變動(dòng)對(duì)樣品中2-苯基-2-丙醇含量測(cè)定結(jié)果無影響，說明該方法的耐用性良好。
2.11 樣品測(cè)定
取艾司奧美拉唑鈉（批號(hào)：2 0 1 8 1 0 2 7，20181112，20181125），按2.2及2.3項(xiàng)方法測(cè)定2-苯基-2-丙醇，結(jié)果均未檢出。
3 討論
CHP是艾司奧美拉唑鈉原料藥合成過程中重要的反應(yīng)試劑，其本身化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，參與合成反應(yīng)后易生成多種副產(chǎn)物。本文采用GC對(duì)測(cè)定其主要分解產(chǎn)物，在方法開發(fā)過程中篩選了不同的色譜柱，調(diào)整了不同的升溫程序及速率等，使得2-苯基-2-丙醇測(cè)定的重現(xiàn)性較好，上述方法的開發(fā)，對(duì)類似樣品中CHP及其副產(chǎn)物殘留量的測(cè)定有一定的指導(dǎo)意義。
楊 帥，張治云
（山東省藥學(xué)科學(xué)院，山東 濟(jì)南 250101）
近年，消化道潰瘍疾病的發(fā)病率逐年增高，質(zhì)子泵抑制劑的應(yīng)用也越來越廣泛。艾司奧美拉唑是奧美拉唑的S-異構(gòu)體，是全球首個(gè)異構(gòu)體質(zhì)子泵抑制劑（proton pump inhibitor，PPI），通過特異性的靶向作用機(jī)制減少胃酸分泌，是壁細(xì)胞中質(zhì)子泵的特異性抑制劑，艾司奧美拉唑較奧美拉唑具有更高的生物利用度和更好的藥動(dòng)學(xué)性質(zhì)[1-2]。
過氧化氫異丙苯（cumene hydroperoxide，CHP）已廣泛用于精細(xì)化工、高分子材料和有機(jī)合成等領(lǐng)域[3]。藥物合成中，常將CHP作為不對(duì)稱氧化劑，可用于右旋蘭索拉唑、埃索美拉唑、左旋泮托拉唑鈉等多種原料藥合成[3-9]。CHP化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，自身易分解[10-12]，其不穩(wěn)定性一方面帶來安全隱患，另一方面為反應(yīng)過程帶來不必要的副產(chǎn)物[12-17]。本文研究了CHP主要的分解產(chǎn)物2-苯基-2-丙醇（又名α-枯基醇，枯烯醇，二甲基芐醇，二甲基苯基甲醇），建立了氣相色譜法（GC）檢測(cè)艾司奧美拉唑鈉原料藥中2-苯基-2-丙醇?xì)埩袅康姆椒ā１疚慕⒌姆椒`敏高，穩(wěn)定性好，色譜柱耗材易于采購，檢測(cè)成本低，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確，方法重現(xiàn)性好，符合《中國(guó)藥典》2020年版[18]的有關(guān)規(guī)定。
1 儀器與試藥
1.1 儀器
Agilent 7890B 氣相色譜儀，包括氫火焰離子化檢測(cè)器（FID）及色譜工作站（美國(guó)安捷倫公司）；Mettler XS205電子分析天平（瑞士梅特勒-托利多公司）。
1.2 試藥
艾司奧美拉唑鈉（自制，批號(hào)：20180802，含量：99.56 %）；2-苯基-2-丙醇（上海阿拉丁生化科技，編號(hào)：P107040，含量：97 %）；二甲基亞砜（天津康科德，色譜純，批號(hào)：181010）。
2 方法與結(jié)果
2.1 色譜條件
色譜柱：安捷倫DB-624毛細(xì)管柱（30 m×0.53 mm，3 μm）；初始溫度為50 ℃，以每分鐘10 ℃的速率升溫至220 ℃，保持5 min；進(jìn)樣口溫度：230 ℃；FID檢測(cè)器溫度：250 ℃。
2.2 溶液的制備
2.2.1 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取2-苯基-2-丙醇適量，加溶劑（二甲基亞砜）溶解并定量稀釋成每1 ml中含50 μg的溶液，作為對(duì)照品溶液。
2.2.2 供試品溶液的制備 取艾司奧美拉唑鈉50 mg，精密稱定，置5 ml量瓶中，加溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。
2.3 專屬性試驗(yàn)
取空白溶劑（二甲基亞砜）、對(duì)照品溶液、供試品溶液各1 μl，分別注入氣相色譜儀，依法測(cè)定，典型色譜圖見圖1。結(jié)果空白溶劑對(duì)2-苯基-2-丙醇測(cè)定無干擾，說明本法專屬性良好。
圖1 專屬性試驗(yàn)GC圖譜
2.4 線性關(guān)系
精密稱取2-苯基-2-丙醇31.35 mg，置已盛有適量溶劑的25 ml量瓶中，加溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。精密量取貯備液0.1，0.5，1.0，1.5，2.0 ml，分別置25 ml量瓶中，加溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為線性1～5號(hào)溶液。分別量取1 μl注入氣相色譜儀，依法測(cè)定，以2-苯基-2-丙醇濃度（C）為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的峰面積（A）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果，2-苯基-2-丙醇濃度在5～100 μg/ml范圍內(nèi)與峰面積的線性關(guān)系良好，線性方程為A=1.5691C-0.1995，相關(guān)系數(shù)（r）為0.9999。
2.5 精密度試驗(yàn)
取2.2.1項(xiàng)下對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，計(jì)算2-苯基-2-丙醇峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）。結(jié)果，2-苯基-2-丙醇峰面積RSD為0.88 %，表明方法系統(tǒng)精密度良好。
2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)
取2.2.1項(xiàng)下對(duì)照品溶液，分別于配制后0，2，4，8，16，24，32，48 h，精密量取1 μl注入氣相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果，48 h內(nèi)2-苯基-2-丙醇峰面積無明顯變化趨勢(shì)，RSD為1.33 %（n=8），表明對(duì)照品溶液配制后至少在48 h內(nèi)穩(wěn)定。
2.7 定量限與檢測(cè)限
取2.2.1項(xiàng)下對(duì)照品溶液，逐級(jí)稀釋成不同濃度的溶液，進(jìn)樣測(cè)定，以S/N≈10時(shí)對(duì)應(yīng)濃度為定量限，以S/N≈3時(shí)對(duì)應(yīng)濃度為檢出限。結(jié)果，2-苯基-2-丙醇的定量限為4.7605 μg/ml，檢出限為1.6181 μg/ml。
2.8 重復(fù)性試驗(yàn)
取艾司奧美拉唑鈉樣品（批號(hào)：20180802）6份，每份約50 mg，分別精密稱定，依法測(cè)定樣品中2-苯基-2-丙醇的含量。結(jié)果，6份樣品中均未檢出2-苯基-2-丙醇。
2.9 回收率試驗(yàn)
精密稱取2-苯基-2-丙醇35.06 mg，置入已盛有適量溶劑的25 ml量瓶，加溶劑稀釋至刻度，搖勻。精密量取0.8，1.0，1.2 ml，分別置入25 ml量瓶，加溶劑至刻度，搖勻。取艾司奧美拉唑鈉樣品（批號(hào)：20180802）9份，每份約50 mg，分別精密稱定，置入5 ml量瓶，分別用配制的3組溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，取2.2.1項(xiàng)下對(duì)照品溶液，同法測(cè)定。按外標(biāo)法計(jì)算2-苯基-2-丙醇的回收率，結(jié)果見表1。
表1 2-苯基-2-丙醇回收率試驗(yàn)結(jié)果
2.10 耐用性試驗(yàn)
通過改變初始柱溫、進(jìn)樣口溫度、檢測(cè)器溫度和載氣流速等參數(shù)，以樣品溶液中2-苯基-2-丙醇含量為指標(biāo)考察色譜條件耐用性。結(jié)果表明，色譜條件在確認(rèn)的耐用性范圍內(nèi)變動(dòng)對(duì)樣品中2-苯基-2-丙醇含量測(cè)定結(jié)果無影響，說明該方法的耐用性良好。
2.11 樣品測(cè)定
取艾司奧美拉唑鈉（批號(hào)：2 0 1 8 1 0 2 7，20181112，20181125），按2.2及2.3項(xiàng)方法測(cè)定2-苯基-2-丙醇，結(jié)果均未檢出。
3 討論
CHP是艾司奧美拉唑鈉原料藥合成過程中重要的反應(yīng)試劑，其本身化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，參與合成反應(yīng)后易生成多種副產(chǎn)物。本文采用GC對(duì)測(cè)定其主要分解產(chǎn)物，在方法開發(fā)過程中篩選了不同的色譜柱，調(diào)整了不同的升溫程序及速率等，使得2-苯基-2-丙醇測(cè)定的重現(xiàn)性較好，上述方法的開發(fā)，對(duì)類似樣品中CHP及其副產(chǎn)物殘留量的測(cè)定有一定的指導(dǎo)意義。
