一種健脾消食復方中藥制劑的研制

陶 剛，涂宏建，賈福懷，晏永球，于善凱，李 杰

(寧波御坊堂生物科技有限公司，浙江 寧波 315012)

脾與胃是人體重要臟器[1]，一臟一腑，互為表里，為氣血生化之源、后天之本。人依靠脾胃完成水谷的消化吸收及輸送，維持生命。脾主運化水谷與水濕，主統血，胃主受納腐熟。積食厭食為常見慢性障礙性疾病，可引起體質量減輕、營養不良、惡心嘔吐、腹脹泄瀉、缺血貧血，進而影響生長發育、身心健康[2-3]。傳統中醫藥理論認為積食厭食主病位在脾胃，由脾胃虛弱導致臟器運行不暢、功能失調，宜采用補益脾胃之法。

健脾消食片為參考中醫藥經典古方，經配方優化工藝升級而成的復方中藥制劑，具有健脾益氣、消食化滯[4]的功效，用于治療脾胃虛弱、厭食氣虛、消化不良等癥。該方由焦三仙、淮山藥、茯苓、雞內金、薏苡仁、砂仁、陳皮、桔梗等10味藥材經典復配。

本研究基于傳統中醫藥制劑經驗，采用新時代制劑工藝創新成果，結合復方中藥特殊性質，擬定工藝為雞內金、茯苓粉成細粉，薏苡仁、砂仁、陳皮蒸餾成揮發油，藥渣與其他5味中藥混合水提，濃縮噴霧與藥物細粉制粒，噴揮發油，總混后壓片，通過實驗優化該中藥制劑加工工藝。

1 材料與方法

1.1 材料與設備

材料：焦山楂、焦麥芽、焦神曲、淮山藥、茯苓、雞內金、薏苡仁、砂仁、陳皮、桔梗均購自安徽佰順堂中藥飲片有限公司；聚酰胺粉；蘆丁對照品(購自中國食品藥品檢定研究院)；乙醇；甲醇；苯(以上試劑均為分析純)。設備：數顯恒溫水浴鍋；鼓風干燥箱；紫外可見光分光光度計；超聲波清洗器；低速離心機；噴霧干燥機；粉碎機。

1.2 測定方法

理化、重金屬、農殘：GB 5009(《食品安全國家標準5009系列標準》GB 5009.4-2016、GB 5009.11-2014、GB 5009.12-2017、GB 5009.17-2014、GB/T 5009.19-2008)；粗多糖：硫酸-苯酚法[5]；微生物指標：GB 4789(《食品安全國家標準食品微生物學檢驗》GB 4789.2-2016、GB 4789.3-2016、GB 4789.4-2016、GB 4789.10-2016、GB4789.15-2016)；總黃酮：《保健食品理化及衛生指標檢驗與評價技術指導原則(2020年版)》[6]。

1.3 工藝流程

中藥(含蒸餾藥渣)→切片→一煎→過濾→二煎→過濾→合并濾液→離心→濃縮

噴霧干燥→混合→制軟材制粒→烘干→整粒→總混→壓片→灌裝封口

↑ ↑

中藥細粉←粉碎←雞內金+茯苓 揮發油←蒸餾←粗粉←薏苡仁+砂仁+陳皮

1.4 工藝要點

1.4.1 粉碎 雞內金、茯苓以1∶3比例混合粉碎成細粉，過100目。

1.4.2 水蒸氣蒸餾 將薏苡仁、砂仁、陳皮以1.5∶1∶2.5比例混勻，粗粉后加10倍水浸泡1.5 h，蒸餾5 h，收集揮發油及藥渣。

1.4.3 提取 淮山藥、桔梗、焦山楂、焦麥芽、焦神曲按1.5∶1∶6∶3∶5比例稱量并切片，與同配方量薏苡仁、砂仁、陳皮提揮發油后藥渣混均后加藥重10倍水，提取2次，1.5 h/次，濾過。

1.4.4 離心濃縮 合并濾液，離心處理，減壓濃縮至相對密度1.05～1.08(60 ℃)。

1.4.5 噴霧干燥 稀浸膏噴成干粉，進風溫度165～175 ℃，出風溫度80～90 ℃，上料速度300 mL/h。

1.4.6 混合制粒烘干 提取物添加配方量中藥細粉混勻，加10%的95%酒精，攪拌3 min，14目制粒，55 ℃ 3 h烘干。

1.4.7 整粒總混壓片 干顆粒14目整粒，均勻噴灑配方比例揮發油，添加適量硬脂酸鎂總混5 min，硬度100～150 N，裝量1 g/片。

1.4.8 灌裝 數粒灌裝軋蓋封口。

2 方法與結果

2.1 揮發油提取工藝

為確定該中藥制劑中揮發油制備工藝，以加水量、浸泡時間、提取時間為考察指標。單因素比較，以揮發油提取率作參考指標，優選薏苡仁、砂仁、陳皮的揮發油提取工藝。揮發油提取率(%)=揮發油體積(mL)×100%/含油藥材質量(g)。

2.1.1 加水量考察 按配方比例稱4份薏苡仁、砂仁、陳皮，每份80 g混勻粗粉，置2 L圓底燒瓶中，分別加入藥材量8、10、12、14倍水，浸泡1 h蒸餾5 h，收集揮發油并計算提取率，結果見表1。

表1 加水量對揮發油提取率影響

由數據可知，加水量10倍時揮發油提取率為1.82%，為14倍水時提取率的98.65%，基本提取完全，考慮節約能耗將加水量定為10倍。

2.1.2 浸泡時間考察 按照配方比例稱取5份薏苡仁、砂仁、陳皮，每份80 g，混勻并粗粉，置于2 L圓底燒瓶中，加藥材量10倍水，分別浸泡0、0.5、1.0、1.5、2 h，按上述方法水蒸氣蒸餾5 h，收集揮發油并計算提取率，結果見表2。

表2 浸泡時間對揮發油提取率影響

由表2數據可知，當浸泡時間為1.5 h時，提取率高達1.9%，揮發油提取量最高，因此浸泡時間定為1.5 h。

2.1.3 提取時間考察 按照比例稱取4份薏苡仁、砂仁、陳皮，每份80 g，混勻并粗粉，置于2 L圓底燒瓶中，加藥材量10倍水浸泡1.5 h，分別按上述方法蒸餾4、5、6、7 h，收集揮發油計算提取率，結果見表3。

表3 提取時間對揮發油提取率影響

由表3數據可知，5、6、7 h提取下，揮發油提取率差異不大，考慮工藝優化及減少生產成本，優化提取時間為5 h。

2.1.4 揮發油提取工藝的驗證 按實驗中確定的最佳條件驗證3批次，結果見表4。

由表4數據可知，驗證實驗與單因素實驗結果接近，說明該工藝穩定可靠。確定薏苡仁、砂仁、陳皮揮發油提取工藝為10倍水、浸泡1.5 h、提取5 h。

表4 揮發油提取工藝驗證

2.2 固形物含量測定

精密稱取稀浸膏濃縮液樣品25 g，置于干燥至恒重并稱重的蒸發皿中，水浴蒸干，于105 ℃干燥箱干燥4 h，干燥器中冷卻30 min，精密稱定。以干燥品計算供試品中固形物含量。公式如下：固形物含量w=(m2-m3)×V/m1，式中：w為浸膏固形物含量(g)；m1為浸膏供試品稱取質量(g)；m2為干燥后供試品蒸發皿總質量(g)；m3為恒重后蒸發皿質量(g)；V為定容體積。

2.3 總黃酮測定

2.3.1 對照品溶液制備 精密稱取5.0 mg蘆丁，甲醇溶解定容至100 mL，得50 μg/mL標準溶液。

2.3.2 試樣處理 稱取適量試樣，加乙醇定容至25 mL，搖勻超聲提取20 min，吸取上清液1 mL于蒸發皿中，加1 g聚酰胺粉吸附，水浴揮去乙醇，轉入層析柱。20 mL苯洗，棄去苯液，甲醇洗脫，定容至25 mL，于360 nm下測定吸收值。

2.3.3 標準曲線繪制 吸取蘆丁標準溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL于10 mL比色管中，加甲醇至刻度，搖勻，360 nm比色，標曲回歸方程為Y=0.027 3X-0.010 2，r=0.999 0，線性范圍0.004 95～0.024 75 mg/mL。

2.3.4 計算公式 計算公式：X=(A×V2×100)/(V1×M×1 000)，X為總黃酮含量(mg/100 g)；A為標曲中計算得來的黃酮量(μg)；M為試樣質量(g)；V1為測定用試樣體積(mL)；V2為試樣定容總體積(mL)。

2.4 中藥提取工藝研究

采用正交實驗設計，以焦山楂中總黃酮及浸膏固形物含量為評價指標綜合評分，選擇煎煮次數、加水量、提取時間3個影響總黃酮及固形物含量的主要因素進行考察，每因素3水平，優選中藥最佳提取工藝，因素水平設計見表5。

表5 工藝正交實驗因素水平

2.4.1 樣品制備 按配方稱取焦山楂、焦麥芽、焦神曲、淮山藥、桔梗飲片與同配方量薏苡仁、砂仁、陳皮蒸餾萃取揮發油后殘渣9份，每份200 g，按L9(34)正交實驗表安排工藝實驗，提取、過濾、濃縮、定容至250 mL得稀浸膏，分測稀浸膏中總黃酮及固形物含量。

2.4.2 數據分析 加權綜合評分法，以總黃酮及固形物含量9次實驗最大值為100分，將指標總黃酮及固形物總量轉換為評分值，固形物含量加權系數為0.55，總黃酮總量系數為0.45，綜合評價篩選最佳工藝，實驗安排見表6，方差分析見表7。

表6 正交實驗安排及直觀分析

表7 方差分析

2.4.3 結果分析 結果可見，以綜合評分為考察指標，提取效果影響因素由大到小依次為：提取次數>加水量>提取時間，最佳提取條件A2B2C3。由方差分析可知，提取次數對提取效果綜合評分影響顯著(P<0.05)，因此選擇提取2次。提取時間2、3水平間差異不顯著，綜合生產實際，考慮縮短周期、降低成本及節能減排等因素，最終優選工藝為A2B2C2，即提取2次，10倍水量，提取1.5 h。

2.4.4 最佳提取工藝驗證 淮山藥、茯苓、薏苡仁、焦麥芽、焦神曲、陳皮均含多糖成分，焦山楂含大量總黃酮，確定制劑功效成分為粗多糖、總黃酮。水和稀醇對多糖提取效果好。總黃酮提取多使用煎煮法和醇提回流法，煎煮法得到浸膏量較多，溶出效果好，乙醇回流法提取黃酮含量高。但本品為復方制劑，各原料配伍綜合起效，因此提取條件不能簡單以黃酮提取量確定。水提取法簡單、經濟，符合中藥傳統食用方法，醇提會損失大量有益多糖，因此本品采用水提取法結合實驗篩選，稱取配方比例藥材及蒸餾藥渣3份，每份200 g，按優選提取工藝進行3次驗證實驗，濃縮定容并測定總黃酮、固形物總量并計算綜合評分，結果見表8。結果表明，3批驗證與正交實驗優選結果基本吻合，證明正交實驗優選提取工藝合理，穩定可行。

表8 工藝驗證實驗結果

2.5 噴霧干燥工藝考察

根據設備情況，優選中藥濃縮液干燥方法為噴霧干燥，在設備干燥條件(進風溫度、出風溫度)相對固定基礎上，濃縮液不同密度對噴干效果影響較大，實驗以噴干粉狀態及干燥過程掛壁情況為綜合評價指標，考察不同密度下濃縮液干燥效果，結果見表9。實驗結果表明，濃縮液相對密度控制在1.05～1.08(60 ℃)噴干效果最佳。

表9 濃縮液相對密度對噴干效果的影響

2.6 產品質量控制

按標準嚴控產品質量、保障產品品質對企業發展壯大及提升產品美譽度十分重要。

2.6.1 感官 棕褐色片，具有中藥特有氣味，無異味，無肉眼可見外來異物。

2.6.2 微生物指標 菌落總數≤10 000 CFU/g，大腸菌群≤0.92 MPN/g，霉菌酵母≤50 CFU/g，致病菌不得檢出。

2.6.3 功效成分指標 粗多糖含量(以葡萄糖計)≥1 600 mg/100 g，總黃酮(以蘆丁計)≥350 mg/100 g。

2.6.4 理化指標 灰分≤10%，崩解時限≤60 min，鉛≤1 mg/kg，總汞≤0.3 mg/kg，總砷≤0.5 mg/kg。

2.6.5農殘 六六六≤0.1 mg/kg，滴滴涕≤0.1 mg/kg。

3 討論

單一藥物僅能控制或緩解某些單一癥狀，很難徹底緩解全部癥狀，調節復雜身體狀況，復方可提升效果減少毒副作用[7]。人體臟腑氣血系統存在動態平衡，諸多中藥對調節臟腑氣血具有較大優勢。本制劑配伍遵循“君臣佐使”原則，以雞內金、焦神曲為君藥，健胃消食、化積健脾；輔以焦山楂、焦麥芽、淮山藥，消食導滯、健脾補虛，協調配合君藥；佐以利水滲濕、健脾寧心之茯苓，理脾滲濕之薏苡仁，理氣溫胃之砂仁，理氣調胃之陳皮，桔梗為使，宣肺利咽、祛痰排膿，引諸藥上行。諸藥合用共奏健脾、益氣、消食之功，消化各種食物積滯，主治脾虛厭食、消化不良等證。

健脾消食湯劑屬口服制劑，療效確切但煎煮麻煩、攜帶服用不便[8]，而健脾消食片具有穩定性好、安全性高、功效成分高、服用攜帶方便等多重優點，適合患者長期服用，消除積食厭食癥狀，改善體質，增進食欲。