北京密云地區(qū)規(guī)?；i場(chǎng)豬O型口蹄疫、藍(lán)耳及豬瘟抗體效價(jià)檢測(cè)與分析

史洪巖，王 娟，郁 茵

（1.北京市密云區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局東邵渠所，北京101500；2.北京市密云區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局檀營(yíng)所，北京101500；3.北京市密云區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，北京101500）

近年來，隨著我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的集約化、規(guī)?；⒖焖俚匕l(fā)展，對(duì)我國(guó)農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展起著重要作用，提高了養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)效益[1]，但是隨之帶來一些疫病的頻發(fā)。目前，在我國(guó)普遍流行的疫病主要有口蹄疫、藍(lán)耳病、豬瘟、豬圓環(huán)病毒病等，給養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）帶來很大困擾，增加養(yǎng)殖成本，降低生產(chǎn)效益和經(jīng)濟(jì)效益[2]。目前，對(duì)于經(jīng)常發(fā)生的疫病的主要預(yù)防措施是疫苗免疫在規(guī)?；i場(chǎng)，疫病是造成規(guī)模化生豬養(yǎng)殖場(chǎng)、種豬場(chǎng)重要經(jīng)濟(jì)損失的重要原因，也是制約豬場(chǎng)發(fā)展的重要原因之一[3]。因此，本研究選取北京密云某規(guī)?；i場(chǎng)對(duì)其豬群的圓環(huán)病毒、藍(lán)耳病毒、豬瘟病毒進(jìn)行抗體檢測(cè)，以期為該地區(qū)豬場(chǎng)發(fā)生的主要疫病的預(yù)防和控制提供參考，降低規(guī)?；i場(chǎng)因疫病帶來的經(jīng)濟(jì)損失。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

2020年12月15日對(duì)北京密云某規(guī)?；i場(chǎng)不同養(yǎng)殖階段的豬群進(jìn)行血液樣品收集310份。其中，哺乳仔豬血液樣品35份、保育豬血液樣品50份、后備母豬血液樣品40份、經(jīng)產(chǎn)母豬血液樣品95份、育肥豬血液樣品80份、種公豬10份。將采集的上述血液樣品當(dāng)場(chǎng)進(jìn)行離心（4 000 r/min離心80 min）收集血清，標(biāo)記號(hào)碼，分裝于Ep管中，低溫保存迅速帶回實(shí)驗(yàn)室置于-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 疫苗免疫程序

豬場(chǎng)的疫苗免疫程序根據(jù)《國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防控規(guī)劃（2012～2020）》農(nóng)業(yè)農(nóng)村部制定的常見動(dòng)物疫病免疫的推薦方案（試行）對(duì)豬口蹄疫-O型、藍(lán)耳、豬瘟等進(jìn)行普遍免疫。

1.3 試驗(yàn)試劑及儀器

1.3.1 儀器設(shè)備

電熱恒溫培養(yǎng)箱由上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司生產(chǎn)；洗板機(jī)由美國(guó)伯騰儀器有限公司生產(chǎn)；酶標(biāo)儀由瑞士Tecan公司生產(chǎn)；移液器由Thermo公司生產(chǎn)。

1.3.2 試驗(yàn)試劑

豬口蹄疫-O型抗體檢測(cè)試劑盒由蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)；豬藍(lán)耳病毒抗體檢測(cè)試劑盒由MEDIAN公司生產(chǎn)；豬瘟抗體檢測(cè)試劑盒由西班牙海博萊生物大藥廠生產(chǎn)。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 檢測(cè)方法

本試驗(yàn)采集的血液樣品使用ELISA的方法進(jìn)行豬口蹄疫-O型病毒、藍(lán)耳病毒、豬瘟病毒抗體的檢測(cè)，操作過程中嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。酶標(biāo)儀的檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)置為450 nm測(cè)定各種病毒抗體的OD450nm值。

1.4.2 結(jié)果判定

豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）：樣品的S/P值＜0.4，說明該樣品結(jié)果為陰性，無抗體；若樣品的S/P值≥0.4，說明該樣品結(jié)果為陽性，有抗體。

豬藍(lán)耳病病毒（PRRSV）：樣品的S/P≥0.4，說明該樣品結(jié)果為陽性，有抗體；S/P＜0.4，說明該樣品結(jié)果為陰性，無抗體。

豬瘟病毒（CFSV）：被檢樣品的阻斷率≤30%判為CSFV陰性；被檢樣品的阻斷率≥40%判為CSFV陽性；被檢樣品的阻斷率＜40%，樣品判為可疑。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2015軟件進(jìn)行簡(jiǎn)單整理統(tǒng)計(jì)，利用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行單因素方差分析，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同豬群豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體檢測(cè)結(jié)果（見表1）

由表1可知，豬場(chǎng)的哺乳仔豬、保育豬、育肥豬、后備母豬、經(jīng)產(chǎn)母豬和種公豬的豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體陽性檢出率分別為94.29%、52.00%、93.75%、75.00%、97.89%、80.00%，不同豬群的豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體的S/P值存在一定差異（P＜0.05）。其中，經(jīng)產(chǎn)母豬的豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體的S/P值最大，為2.63，顯著高于其他豬群的豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體的S/P值（P＜0.05）；保育豬的豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體的S/P值最小，為1.36。哺乳仔豬、育肥豬、后備母豬、經(jīng)產(chǎn)母豬、種公豬的陽性檢出率均超過國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定（70%）。

表1 不同豬群豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體檢測(cè)結(jié)果Tab.1 Results of detection of antibodies against porcinefoot-and-mouth disease-O virus(FMDV-O)in different swineherds

2.2 不同豬群豬藍(lán)耳病毒（PRRSV）抗體檢測(cè)結(jié)果（見表2）

由表2可知，豬場(chǎng)的哺乳仔豬、保育豬、育肥豬、后備母豬、經(jīng)產(chǎn)母豬和種公豬的藍(lán)耳病毒（PRRSV）抗體陽性檢出率 分 別 為91.43%、84.00%、97.50%、87.50%、95.79%、100.00%，不同豬群的藍(lán)耳病毒（PRRSV）抗體的S/P值未產(chǎn)生顯著性差異（P＞0.05）。其中，種公豬的藍(lán)耳病毒（PRRSV）抗體的S/P值最大，為1.83，陽性率為100%；保育豬的藍(lán)耳病毒（PRRSV）抗體的S/P值最小，為1.63，陽性率為84%，也高于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（70%）。

表2 不同豬群豬藍(lán)耳病毒（PRRSV）抗體檢測(cè)結(jié)果Tab.2 Test resultsof PRRSV antibodies in different swineherds

2.3 不同豬群豬瘟病毒（CFSV）抗體檢測(cè)結(jié)果（見表3）

由表3可知，豬場(chǎng)的哺乳仔豬、保育豬、育肥豬、后備母豬、經(jīng)產(chǎn)母豬和種公豬的豬瘟病毒（CFSV）抗體陽性檢出率分 別為88.57%、86.00%、100.00%、95.00%、94.74%、100.00%，不同豬群的豬瘟病毒（CFSV）抗體的水平存在顯著性差異（P＜0.05）。其中，育肥豬和種公豬的豬瘟病毒（CFSV）抗體的陽性率為100%，平均阻斷率較高，顯著高于其他豬群（P＜0.05）；所有豬群的豬瘟病毒（CFSV）抗體的陽性率均高于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（70%）。

表3 不同豬群豬瘟病毒（CFSV）抗體檢測(cè)結(jié)果Tab.3 Test resultsof classical swinefever virus(CFSV)antibodies in different swineherds

3 討論

豬口蹄疫O型疫病是由口蹄疫病毒引起的一種接觸性傳染病。集約化、規(guī)?；拇笮宛B(yǎng)豬場(chǎng)日常中應(yīng)采取綜合防控措施，可避免該類疫病的爆發(fā)及傳播，豬場(chǎng)日常管理中，要注重該病毒的監(jiān)測(cè)、及時(shí)免疫、疫苗免疫效果等工作，避免給養(yǎng)殖場(chǎng)造成不必要的經(jīng)濟(jì)損失[4]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，哺乳仔豬、保育豬、育肥豬、后備母豬、經(jīng)產(chǎn)母豬和種公豬的豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體的S/P值存在一定差異。其中，經(jīng)產(chǎn)母豬的豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體的S/P值最大，為2.63，顯著高于其他豬群的豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體的S/P值；保育豬的豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體的S/P值最小，為1.36。哺乳仔豬、育肥豬、后備母豬、經(jīng)產(chǎn)母豬、種公豬的陽性檢出率均超過國(guó)家規(guī)定的70%。導(dǎo)致上述各豬群監(jiān)測(cè)結(jié)果不同的原因可能是由各類豬群的飼養(yǎng)環(huán)境、免疫情況及疫苗有效性等因素引起的。研究表明，僅僅進(jìn)行1次免疫，免疫效果相對(duì)較低，需加強(qiáng)免疫才能夠提高抗體免疫效價(jià)[5]。所以導(dǎo)致該豬場(chǎng)保育豬的豬口蹄疫-O型病毒（FMDV-O）抗體的S/P值最小。在生豬養(yǎng)殖生產(chǎn)中，需要結(jié)合本場(chǎng)的實(shí)際生產(chǎn)情況，科學(xué)、合理規(guī)劃各類疫病的免疫程序，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)各類疫病的免疫抗體水平?？谔阋逴型是我國(guó)養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)中比較頻發(fā)的疫病之一。養(yǎng)殖人員需要高度重視此病的預(yù)防工作，保證做到抗體陽性檢出率不低于國(guó)家的規(guī)定（＞70%）。對(duì)于免疫效果不理想的豬群，需要及時(shí)制定、調(diào)節(jié)免疫程序，及時(shí)進(jìn)行二次免疫，避免不必要的經(jīng)濟(jì)損失[6]。

該豬場(chǎng)種公豬的藍(lán)耳病毒（PRRSV）抗體的S/P值最大，為1.83，陽性率為100%；保育豬的藍(lán)耳病毒（PRRSV）抗體的S/P值最小，為1.63，陽性率為84%，均高于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的70%，說明該場(chǎng)PRRSV免疫防控效果較好。研究表明，保育豬在已經(jīng)得不到母源抗體的有效保護(hù)時(shí)，若其首免時(shí)間選擇良好，會(huì)使保育豬藍(lán)耳病抗體在維持在相對(duì)較高的水平；但也需對(duì)抗體較低豬只進(jìn)行補(bǔ)免，并持續(xù)關(guān)注豬藍(lán)耳病毒抗體水平的變化，及時(shí)調(diào)整免疫程序[7-9]。

不同類別豬瘟免疫抗體檢測(cè)結(jié)果表明，不同豬群的豬瘟病毒（CFSV）抗體的水平存在顯著性差異。其中，育肥豬和種公豬的豬瘟病毒（CFSV）抗體的陽性率為100%，平均阻斷率較高，顯著高于其他豬群；所有豬群的豬瘟病毒（CFSV）抗體的陽性率均高于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（70%）；保育豬的抗體陽性率較低，平均阻斷率為68.29%，說明該類別豬群免疫效果較差。研究表明，在生豬養(yǎng)殖過程中需要強(qiáng)化防疫工作的管理水平，提高養(yǎng)殖人員的防疫意識(shí)。日常管理工作應(yīng)及時(shí)制訂科學(xué)、合理的免疫程序，對(duì)抗體水平較低的豬群應(yīng)及時(shí)制訂方案進(jìn)行補(bǔ)免，以保證進(jìn)入下一階段前有較高的豬瘟病毒抗體水平[10-12]。

應(yīng)在母豬源頭做好各類疫病的免疫工作，保證新生仔豬的健康。新生仔豬和保育豬養(yǎng)殖生產(chǎn)中，應(yīng)加強(qiáng)免疫次數(shù)，保證哺乳仔豬和保育豬有較高的FMDV-O、PRRSV、CFSV抗體水平。目前，對(duì)于病毒類的疫病，應(yīng)注重綜合管理預(yù)防措施工作，養(yǎng)殖人員應(yīng)時(shí)刻對(duì)各類病毒抗體水平進(jìn)行監(jiān)測(cè)，一旦出現(xiàn)抗體水平波動(dòng)較大的情況，應(yīng)及時(shí)采取免疫措施，合理規(guī)劃免疫程序，確保豬群有較高的抗體水平。如發(fā)現(xiàn)豬患病，需要立刻及時(shí)淘汰，做無害化處理，避免大規(guī)模感染傳播。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，北京密云地區(qū)該豬場(chǎng)的豬口蹄疫-O型、藍(lán)耳、豬瘟病毒抗體陽性檢出率中只有保育豬的豬口蹄疫-O型抗體水平低于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，其余豬群以上3種病毒抗體陽性率均符合國(guó)家規(guī)定。此豬場(chǎng)應(yīng)對(duì)保育豬的豬口蹄疫-O型進(jìn)行二次免疫，以便提高該豬場(chǎng)的整體免疫水平，提高生產(chǎn)效益。